Name: BMS-345541
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S8044
Rating: 5 (51 reviews)

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.91%

99.91

Gerelateerde doelwitten	NF-κB HDAC Antioxidant ROS Nrf2 AP-1 MALT NOD
Overige IκB/IKK Inhibitoren	TBK1/IKKε-IN-5 Wedelolactone IKK-16 TPCA-1 Bay 11-7085 IMD 0354 MRT67307 HCl SC-514 WS6 Mesalazine (5-ASA)

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
THP1 cells	Function assay			Inhibition of LPS-induced TNFalpha secretion in THP1 cells, IC50=4 μM	17197177
SF9 cells	Function assay	20 μM		Inhibition of purified recombinant histidine-HA-tagged IKK-beta expressed in SF9 cells at 20 uM	18702457
H460	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human H460 cells assessed as reduction in cell viability after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 2.8 μM.	29655083
LLC	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against mouse LLC cells measured after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 4.8 μM.	27886548
A549	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human A549 cells measured after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 5.6 μM.	27886548
NCI-H1975	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human NCI-H1975 cells assessed as reduction in cell viability after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 8 μM.	29655083
A549	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human A549 cells assessed as reduction in cell viability after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 8.6 μM.	29655083
NCI-H1650	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human NCI-H1650 cells assessed as reduction in cell viability after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 9.3 μM.	29655083
Jurkat	Function assay			Inhibition of LPS-induced TNFalpha production in Jurkat cells, EC50 = 13.3 μM.	17540562
HL7702	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human HL7702 cells assessed as reduction in cell viability after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 15.3 μM.	29655083
NCI-H1650	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human NCI-H1650 cells measured after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 19.9 μM.	27886548
TC32	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells	29435139
A673	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells	29435139
DAOY	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells	29435139
Saos-2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells	29435139
BT-37	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells	29435139
RD	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells	29435139
SK-N-SH	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells	29435139
BT-12	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells	29435139
MG 63 (6-TG R)	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells	29435139
NB1643	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells	29435139
OHS-50	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells	29435139
Rh41	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells	29435139
SJ-GBM2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells	29435139
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	255.32	Formule	C₁₄H₁₇N₅	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	445430-58-0	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	N/A			Smiles	CC1=CC2=C(C=C1)N=C(C3=NC=C(N23)C)NCCN

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

Water : 58 mg/mL

DMSO : 9 mg/mL (35.24 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Kenmerken	Allosteric IKK inhibitor with anti-inflammatory activity.
Targets/IC₅₀/Ki	IKK2 (Cell-free assay) 0.3 μM IKK1 (Cell-free assay) 4 μM
In vitro	BMS-345541 remt dosisafhankelijk de TNF-α-gestimuleerde fosforylering van IκBα in THP-1 monocyten met een IC50 van ~4 μM. Deze verbinding remt lipopolysaccharide-gestimuleerde tumornecrosefactor-α, interleukine-1β, interleukine-8 en interleukine-6 in THP-1-cellen met IC50-waarden in het bereik van 1 tot 5 μM. Het bindt op een wederzijds exclusieve manier ten opzichte van een peptideremmer die overeenkomt met aminozuren 26 - 42 van IκBα met Ser-32 en Ser-36 gewijzigd in aspartaten en op een niet-wederzijds exclusieve manier ten opzichte van ADP. Dit chemicaliën bindt aan vergelijkbare allosterische sites op IKK-1 en IKK-2, wat vervolgens de actieve sites van de subeenheden verschillend beïnvloedt. Het beïnvloedt verschillende mitotische celcyclusovergangen, waaronder mitotische entree, prometafase naar anafase progressie en cytokinese. Het toevoegen van deze verbinding aan de cellen die zijn vrijgekomen uit arrestatie in de G-fase blokkeert de activering van Aurora A, B en C, Cdk1-activering en histon H3-fosforylering. Behandeling van de mitotische cellen met deze chemicaliën resulteert in vroegtijdige cyclin B1- en securineafbraak, defecte chromosoomsegregatie en onjuiste cytokinese. Het blijkt ook het spoelcheckpoint in nocodazol-gearresteerde cellen te omzeilen. Deze effecten zijn niet primair te wijten aan een direct remmend effect van deze verbinding op mitotische kinasen zoals Cdk1, Aurora A of B, Plk1 of NEK2. Deze verbinding (10 μM) remt de groei van normale menselijke epidermale melanocyten en gemetastaseerde melanoomcellen (SK-MEL-5, A375 en Hs 294T) met respectievelijk 96% en 99% na 72 uur. Toepassing van 100 μM ervan op SK-MEL-5-celkweek resulteert in 87% apoptotische cellen na 24 uur via caspased-onafhankelijke en AIF-afhankelijke mitochondriën-gemedieerde wijze. Behandeling met deze chemicaliën (10 μM) resulteert in een reductie van 76% en 95% in IKK-activiteiten en NF-κB-activiteit, evenals CXCL1-productie. Het remt de groei van T-cel acute lymfoblastische leukemie (T-ALL) cellijnen BE-13, RPMI-8402 en DND-41, alle drie met een Notch1-mutatie, en T-ALL primaire cellen van pediatrische patiënten, met IC50 van 2-6 μM. 5 μM van deze verbinding induceert een arrestatie in de G2/M-fase van de celcyclus in BE-13- en DND-41-cellen, en een sub-G1-piektoename in RPMI-8402-cellen. 5 μM ervan behandeld gedurende 16 uur leidt tot een toename van apoptotische cellen in al deze cellen, gepaard gaand met een tijdsafhankelijke splitsing van procaspase-8, procaspase-3 en poly (ADP-ribose) polymerase (PARP). Dit chemicaliën (5 μM) induceert een tijdsafhankelijke defosforylering van IκBα en p65. T-ALL-cellen die ermee zijn behandeld, vertonen nucleaire translocatie van FOXO3a en herstel van zijn functies, inclusief controle van p21^Cip1-expressieniveaus. Het remt de TNFα-geïnduceerde expressie van zowel ICAM-1 als VCAM-1 in menselijke navelstrengveneus endotheelcellen met IC50 van 5 μM.
Kinase Assay	Enzymassays
Kinase Assay	Assays die de enzym-gekatalyseerde fosforylering van GST-IκBα meten, worden uitgevoerd door enzym (een uiteindelijke concentratie van 0,5 μg/mL) bij 30 ℃ toe te voegen aan oplossingen van 100 μg/mL GST-IκBα en 5 μM [³³P]ATP in 40 mM Tris HCl, pH 7,5, met 4 mM MgCl₂, 34 mM natriumfosfaat, 3 mM NaCl, 0,6 mM kaliumfosfaat, 1 mM KCl, 1 mM dithiothreitol, 3% (w/v) glycerol en 250 μg/mL runder serumalbumine. De specifieke activiteit van [³³P]ATP gebruikt in de assay is 100 Ci/mmol. Na 5 min worden de kinase-reacties gestopt door de toevoeging van 2× Laemmli monsterbuffer en warmtebehandeld bij 90 ℃ gedurende 1 min. De monsters worden vervolgens geladen op NuPAGE 10% BisTris gels. Na voltooiing van SDS-PAGE worden de gels gedroogd op een slab gel droger. De banden worden vervolgens gedetecteerd met behulp van een 445Si PhosphorImager, en de radioactiviteit wordt gekwantificeerd met behulp van ImageQuant software. Onder deze omstandigheden is de mate van fosforylering van GST-IκBα lineair met de tijd en concentratie van het enzym.
In vivo	BMS-345541 remt effectief de groei van melanoomtumoren op een dosisafhankelijke manier. Tumordragende muizen behandeld met 75 mg/kg van deze verbinding vertonen een effectieve remming van de groei van SK-MEL-5-, A375- en Hs 294T-tumoren met respectievelijk 86%, 69% en 67%, vergeleken met controledieren behandeld met alleen het vehikel. Deze verbinding, oraal toegediend in doses van 100 mg/kg, vermindert de ernst van dextransulfaatnatrium-geïnduceerde colitis bij muizen met een gewichtsverhouding, klinische score van de dikke darm, gemiddelde letselscore en gemiddelde ontstekingsscore van respectievelijk 0,86 (vs 0,77 van de vehikelgroep), 1,0 (vs 2,5 van de vehikelgroep), 5,66 (vs 8,52 van de vehikelgroep), 6,82 (vs 12,33 van de vehikelgroep). Dit chemicaliën (100 mg/kg), oraal toegediend via sondevoeding in water eenmaal daags vanaf het moment van de eerste collageenimmunisatie, remt klinische tekenen van ziekte in het murine CIA-model (0 vs ~8 van de vehikelgroep), vergezeld van verminderde pootzwelling. Het vermindert de cumulatieve artritis-letselscore van 4,4 naar 0, vergezeld van een lagere degradatie van de tibiotarsale gewrichten en de ernst van ontsteking, synoviale hyperplasie, botresorptie en kraakbeenerosie. Geen waarneembaar letsel werd waargenomen in de gewrichten van dieren, wat histologisch niet te onderscheiden is van die van leeftijd-gematchte, ziektevrije controledieren. Deze verbinding remt dosisafhankelijk IL-1β-boodschap, waarbij dieren in de 100 mg/kg dosisgroep niveaus vertonen die vergelijkbaar zijn met die van ziektevrije controledieren.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12403772/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17704647/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16467110/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22713244/ [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14991079/ [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14991079/ [7] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/13130486/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	IkB / p-IkB / p65 / p-p65 / p50 / p52 / Tax caspase-3 (p17) / PARP / cleaved PARP		18544167
Immunofluorescence	Cyclin D1 / p-Cyclin D1 NF-κB-p65		27546592