Home NF-κB IκB/IKK Remmer TPCA-1

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

TPCA-1 IKK-2 remmer

Cat.Nr.: S2824

TPCA-1 (GW683965) is een remmer van IKK-2 met een IC50 van 17,9 nM in een celvrije test, remt de NF-κB route, vertoont 22-voudige selectiviteit over IKK-1. TPCA-1 is ook een remmer van STAT3 en verbetert apoptose.
TPCA-1 IκB/IKK Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 279.29

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.85%
99.85

Celkweek, behandeling & werkconcentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
C57BL/6 mouse BMDM cells Cytotoxicity assay 24 h Cytotoxicity against C57BL/6 mouse BMDM cells assessed as LDH release after 24 hrs 22533790
C57BL/6 mouse BMDM cells Function assay 0.5 μM 1 h Antiinflammatory activity in C57BL/6 mouse BMDM cells assessed as inhibition of LPS-stimulated TNFalpha production at 0.5 uM pretreated for 1 hr before LPS challenge after 8 to 24 hrs by immunoassay 22533790
MDA-MB-231 Cytotoxicity assay 3 days Cytotoxicity against human MDA-MB-231 cells assessed as cell growth inhibition after 3 days by presto blue dye based plate reader method 27077228
TC32 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells 29435139
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
BT-37 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
U-2 OS qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
Rh18 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
Rh30 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh30 cells 29435139
Rh41 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for A673 cells) 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-MC cells 29435139
TC32 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for TC32 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
U-2 OS qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for U-2 OS cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-SH cells 29435139
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 279.29 Formule

C12H10FN3O2S 

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 507475-17-4 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen GW683965 Smiles C1=CC(=CC=C1C2=CC(=C(S2)NC(=O)N)C(=O)N)F

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 56 mg/mL (200.5 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
NF-κB
STAT3
IKK2
(Cell-free assay)
17.9 nM
In vitro

In een tijdopgeloste fluorescentie resonantie energieoverdrachtstest remt TPCA-1 de menselijke IKK-2 activiteit met een IC50 van 17,9 nM. Bovendien blijkt deze verbinding ATP-competitief te zijn. Verder vertoont het IC50-waarden van respectievelijk 400 nM en 3600 nM tegen IKK-1 en JNK3. Deze chemische stof remt de productie van TNF-α, IL-6 en IL-8 op een concentratieafhankelijke manier, met IC50-waarden van respectievelijk 170, 290 en 320 nM. Het remt de proliferatie van glioomcellen, evenals TNF-geïnduceerde RelA (p65) nucleaire translocatie en NFκB-afhankelijke IL8-genexpressie. Belangrijk is dat deze verbinding IFN-geïnduceerde genexpressie remt, waarbij de genexpressie van MX1 en GBP1 volledig wordt onderdrukt, terwijl het slechts een gering effect heeft op de expressie van ISG15.

Kinase Assay
IKK-2 test
Recombinant humaan IKK-2 (residuen 1-756) wordt tot expressie gebracht in baculovirus als een N-terminaal GST-gelabeld fusie-eiwit, en de activiteit ervan wordt beoordeeld met behulp van een tijdopgeloste fluorescentie resonantie energieoverdrachtstest. Kortom, IKK-2 (5 nM finaal), verdund in testbuffer (50 mM HEPES, 10 mM MgCl2, 1 mM CHAPS, pH 7,4, met 1 mM DTT en 0,01% w/v BSA), wordt toegevoegd aan putjes die verschillende concentraties van deze verbinding of DMSO-vehiculum (3% finaal) bevatten. De reactie wordt geïnitieerd door de toevoeging van GST-IκBα substraat (25 nM finaal)/ATP (1 μM finaal), in een totaal volume van 30 μL. De reactie wordt gedurende 30 min bij kamertemperatuur geïncubeerd en vervolgens beëindigd door de toevoeging van 15 μL 50 mM EDTA. Detectiereagens (15 μL) in buffer (100 mM HEPES, pH 7,4, 150 mM NaCl en 0,1% w/v BSA) dat anti-fosfoserine- IκBα-32/36 monoklonaal antilichaam 12C2, gelabeld met W-1024 europiumchelaat, en een allophycocyanine-gelabeld anti-GST-antilichaam bevat, wordt toegevoegd, en de reactie wordt nog eens 60 min bij kamertemperatuur geïncubeerd. De mate van fosforylering van GST- IκBα wordt gemeten als een verhouding van het specifieke 665-nm energietransfersignaal tot het referentie-europium 620-nm signaal, met behulp van een Packard Discovery plaatlezer.
In vivo

Profylactische toediening van TPCA-1 in doses van 3, 10 of 20 mg/kg, i.p., tweemaal daags, resulteert in een dosisafhankelijke vermindering van de ernst van murine collageen-geïnduceerde artritis (CIA). De significant verminderde ziekte-ernst en vertraging van het begin van de ziekte als gevolg van de toediening van deze verbinding in een dosis van 10 mg/kg, i.p., tweemaal daags, zijn vergelijkbaar met de effecten van het antireumatische geneesmiddel, i.p., om de andere dag. Nucleaire lokalisatie van p65, evenals de niveaus van IL-1beta, IL-6, TNF-alpha en interferon-gamma, zijn significant verminderd in het pootweefsel van muizen die met deze verbinding zijn behandeld. Bovendien resulteert de toediening van deze chemische stof in vivo in een significant verminderde collageen-geïnduceerde T-celproliferatie ex vivo. Therapeutische toediening van deze verbinding in een dosis van 20 mg/kg, maar niet bij 3 of 10 mg/kg, i.p., tweemaal daags, vermindert de ernst van CIA significant.

Referenties