Home PI3K/Akt/mTOR AMPK remmer Dorsomorphin Dihydrochloride

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

Dorsomorphin Dihydrochloride AMPK/BMP Pathway-remmer

Cat.Nr.S7306

Dorsomorphin 2HCl is een potente, reversibele, selectieve AMPK-remmer met een Ki van 109 nM in celvrije assays, en vertoont geen significante remming van verschillende structureel verwante kinasen, waaronder ZAPK, SYK, PKCθ, PKA en JAK3. Remt ook de type Ⅰ BMP-receptor-activiteit. Dorsomorphin induceert autophagy in kankercellijnen.
Dorsomorphin Dihydrochloride AMPK remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 472.41

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.98%
99.98

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
C2C12 Function assay 4 uM Inhibition of BMPR1-mediated osteoblast differentiation in BMP4-stimulated mouse C2C12 cells assessed as decrease in alkaline phosphatase level at 4 uM by spectrophotometry 18026094
C2C12 Function assay 4 uM Inhibition of BMPR1-mediated osteoblast differentiation in BMP6-stimulated mouse C2C12 cells assessed as decrease in alkaline phosphatase level at 4 uM by spectrophotometry 18026094
HepG2 Function assay 10 uM 30 mins Inhibition of BMPR1-mediated hepcidin mRNA expression in BMP2-stimulated human HepG2 cells at 10 uM treated 30 mins before BMP2 challenge measured after 16 hrs by qRT-PCR analysis 18026094
Hep3B Function assay 10 uM 30 mins Inhibition of BMPR1-mediated hepcidin mRNA expression in IL6-stimulated human Hep3B cells at 10 uM treated 30 mins before IL6 challenge measured after 6 hrs by qRT-PCR analysis 18026094
Hep3B Function assay 10 uM 30 mins Inhibition of BMPR1-mediated Id1 mRNA expression in IL6-stimulated human Hep3B cells at 10 uM treated 30 mins before IL6 challenge measured after 6 hrs by qRT-PCR analysis 18026094
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
BT-37 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
Rh41 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells 29435139
Rh30 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh30 cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
Rh18 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells 29435139
KB-3-1 qHTS assay P-glycoprotein substrates identified in KB-3-1 adenocarcinoma cell line, qHTS therapeutic library screen 31515284
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht 472.41 Formule

C24H25N5O.2HCl

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 1219168-18-9 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen BML-275 2HCl,Compound C 2HCl Smiles C1CCN(CC1)CCOC2=CC=C(C=C2)C3=CN4C(=C(C=N4)C5=CC=NC=C5)N=C3.Cl.Cl

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

Water : 47 mg/mL

DMSO : Insoluble
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC50/Ki
ALK2
ALK3
ALK6
AMPK
(Cell-free assay)
109 nM(Ki)
In vitro

Dorsomorphin remt de ACC-inactivering door AICAR en vermindert ook het effect van AICAR om de vetzuuroxidatie te verhogen of lipogene genen in hepatocyten te onderdrukken.

Remming van de AMPK-activiteit door Dorsomorphin remt bijna volledig de autofagische proteolyse in HT-29-cellen.

Bovendien remt Dorsomorphin selectief de BMP type I-receptoren ALK2, ALK3 en ALK6, en blokkeert zo BMP-gemedieerde SMAD1/5/8-fosforylering, transcriptie van doelgenen en osteogene differentiatie.

Kinase Assay
Gedeeltelijke zuivering van AMPK en in vitro kinase-assay.
Lever-AMPK wordt gedeeltelijk gezuiverd uit mannelijke SD-ratten tot de blauw-Sepharose stap. Het reactiemengsel van 100 μl bevat 100 μM AMP, 100 μM ATP (0,5 μCi 33P-ATP per reactie) en 50 μM SAMS in een buffer (40 mM HEPES, pH 7,0, 80 mM NaCl, 0,8 mM EDTA, 5 mM MgCl2, 0,025% BSA en 0,8 mM DTT). De reactie wordt gestart met de toevoeging van het enzym. Na 30 minuten incubatie bij 30°C wordt de reactie gestopt door toevoeging van 80 μl 1% H3PO4. Aliquoten (100 μl) worden overgebracht naar 96-wells MultiScreen-platen. De plaat wordt driemaal gewassen met 1% H3PO4, gevolgd door detectie in een Top-count. De in vitro AMPK-remmingsgegevens verkregen met verbinding C — (6-[4-(2-Piperidin-1-yl-ethoxy)-fenyl)]-3-pyridin-4-yl-pyyrazolo[1,5-a] pyrimidine — worden aangepast aan de volgende vergelijking voor competitieve remming door niet-lineaire regressie met behulp van een kleinste-kwadraten Marquardt-algoritme in een computerprogramma geschreven door N. Thornberry van Merck Research Laboratories: Vi/Vo = (Km + S)/[S + Km × (1 + I/Ki)], waarbij Vi de geremde snelheid is, Vo de beginsnelheid is, S de substraat (ATP) concentratie is, Km de Michaelis-constante voor ATP is, I de remmer (verbinding C) concentratie is en Ki de dissociatieconstante voor verbinding C.
In vivo

Dorsomorphin (10 mg/kg) verlaagt de basale niveaus van hepcidexpressie en verhoogt de serumijzerconcentraties bij volwassen muizen.

Dorsomorphin (0,2 mg/kg, i.v.) vermindert significant de expressie van VCAM-1 en ICAM-1 in de thoracale aorta van LPS-behandelde ratten.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21764059/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35241643/

Toepassingen

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot p-SMAD / SMAD Id1 / Id2 / Id3 pAMPK / AMPK / pACC / ACC / pRaptor / HIF1α p-ERK / ERK / Bcl2 / BAX / Cleaved caspase-3 LC3B I/ LC3B II
S7306-WB1
30808965
Immunofluorescence MyHC Id1 / MyoD
S7306-IF1
20689554
Growth inhibition assay Cell viability (MM cells) Cell viability (glioma cell lines)
S7306-viability1
25010525

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

Gelieve uw naam in te voeren.
Gelieve uw e-mailadres in te voeren. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.

Veelgestelde vragen

Vraag 1:
Is there any information you may provide as to WHICH AMPK SUBUNIT this compound is targeting in the AMPK complex?

Antwoord:
According to the reference (see link below), it should target the AMPK alpha subunit through ALCAR or metformin. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20844250