uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

SBI-0206965 ULK remmer

Cat.Nr.S7885

SBI-0206965 is een zeer selectieve autophagy kinase ULK1 remmer met een IC50 van 108 nM, ongeveer 7-voudige selectiviteit ten opzichte van ULK2. Deze verbinding remt autophagy en verbetert apoptosis in humane glioblastoom- en longkankercellen.

SBI-0206965 ULK remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 489.32

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.97%

99.97

Gerelateerde doelwitten	CXCR Autophagy Nrf2 Mitophagy LRRK2 FKBP Heme Oxygenase cGAS LC3 Cell wall
Overige ULK Inhibitoren	MRT68921 HCl ULK-101 LYN-1604 BL-918 SBP-7455 XST-14 DCC-3116

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen	Assaytype	Activiteitsbeschrijving	PMID
human Malme-3M cells	Function assay	Inhibition of FLAG-tagged ULK1 (unknown origin) expressed in HEK293T cells using GST-labelled Atg101 as substrate in presence of gamma-[32]P-ATP,IC50=0.108 µM.	29211480



Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	489.32	Formule	C₂₁H₂₁BrN₄O₅	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1884220-36-3	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	N/A			Smiles	CNC(=O)C1=CC=CC=C1OC2=NC(=NC=C2Br)NC3=CC(=C(C(=C3)OC)OC)OC

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 98 mg/mL (200.27 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 14 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	2.500mg/ml (5.11mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 50 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	ULK1 (Cell-free assay) 108 nM ULK2 (Cell-free assay) 711 nM
In vitro	In HEK293T getransfecteerd met WT of KI Myc-tagged ULK1 en WT Vps34, remt SBI-0206965 Ser249 fosforylatie van overexpressed Vps34 en Beclin1 Ser15 fosforylatie. Deze verbinding onderdrukt autophagy geïnduceerd door mTOR-remming in A549-cellen, en voorkomt ULK1-afhankelijke celoverleving in WT MEF's. Bovendien synergeert het ook met mTOR-remming om kankerceldood te induceren.
Kinase Assay	ULK1 kinase assays
Kinase Assay	γ-³²P-ATP assays om ULK1 kinase activiteit te meten worden uitgevoerd. Kort gezegd, Flag-ULK1 wordt getransfecteerd in HEK-293T cellen en 20 uur later behandeld zoals aangegeven. Het immuunprecipitaat wordt 3 keer gewassen in IP buffer, en gewassen in kinase buffer (25 mM MOPS, pH 7.5, 1 mM EGTA, 0.1 mM Na₃VO₄, 15 mM MgCl₂,). Hete en koude ATP worden toegevoegd met een uiteindelijke concentratie van 100 μM. Als substraten werden GST of het recombinante eiwit GST-Atg101 gezuiverd uit E. coli gebruikt in 1 μg voor elke reactie. Reacties worden gekookt en uitgevoerd op SDS-PAGE gels. Gels worden gedroogd en afgebeeld met PhosphoImager software.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26118643/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30078736/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	p-AMPK β1 / AMPK β1 / PARP / cleaved PARP / Caspase 8 / cleaved caspase 8 / LC3B I / LC3B II / p62 pACC / ACC / AMPK-pThr-172		30078736

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):