uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC) Dyes chemisch

Cat.Nr.S6928

Fluoresceïne-5-isothiocyanaat (FITC, Fluoresceïne-isothiocyanaatisomeer I, 5-FITC) is een fluorescerende sonde die kan worden geconjugeerd aan weefsel en eiwitten.
Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC) Dyes chemisch Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 389.38

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: S692801 DMSO]78 mg/mL]false]Ethanol]10 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Zuiverheid: 98.88%
98.88

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht 389.38 Formule

C21H11NO5S

Opslag (Vanaf de ontvangstdatum) 3 years -20°C(in the dark) powder
CAS-nr. 3326-32-7 -- Opslag van stamoplossingen

Synoniemen Fluorescein isothiocyanate isomer I, 5-FITC Smiles OC1=CC2=C(C=C1)C3(OC(=O)C4=C3C=CC(=C4)N=C=S)C5=C(O2)C=C(O)C=C5

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 78 mg/mL (200.31 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 10 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

In vitro

1.Eiwitvoorbereiding
1) Om het beste labelingsresultaat te verkrijgen, gelieve de eiwit (antilichaam) concentratie van 2 mg/mL te bereiden.
2) De pH-waarde van de eiwitoplossing moet 8,5±0,5 zijn. Indien de pH lager is dan 8,0, moet 1M natriumbicarbonaat worden gebruikt voor aanpassing.
3) Indien de eiwitconcentratie lager is dan 2 mg/mL, zal de labeleringsefficiëntie sterk verminderd zijn. Om de beste labeleringsefficiëntie te verkrijgen, wordt aanbevolen dat het uiteindelijke eiwitconcentratiebereik 2-10 mg/mL is.
4) Het eiwit moet zich in een buffer bevinden zonder primaire amine (zoals Tris of glycine) en ammoniumionen, anders zal de labeleringsefficiëntie worden beïnvloed.
2.Dye Preparation
Voeg watervrij DMSO toe aan de flacon met Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC) om een 10 mM stockoplossing te maken. Meng goed door te pipetteren of te vortexen.
3.Berekening van de kleurstofdosering
De hoeveelheid van deze verbinding die nodig is voor de reactie hangt af van de hoeveelheid te labelen eiwit, en de optimale molaire verhouding ervan tot eiwit is ongeveer 10.
Voorbeeld: stel dat het vereiste markeringsproteïne 1 mL 2 mg/mL IgG (MW=150.000) is, gebruik 1 mL DMSO om 1 mg FITC op te lossen, het benodigde volume is 40 μL.
4.Uitvoeren van conjugatiereactie
1) Een goed volume vers bereide 10 mg/mL FITC wordt langzaam toegevoegd aan 0,5 mL eiwitmonster. Schud zachtjes in oplossing om te mengen en centrifugeer vervolgens kort om het monster onderaan de reactiebuis te verzamelen. Niet grondig mengen om denaturatie en inactivatie van eiwitmonsters te voorkomen.
2) De reactiebuisjes werden op een donkere plaats geplaatst en gedurende 60 minuten met tussenpozen zachtjes bij kamertemperatuur geïncubeerd. Draai de reactiebuisjes gedurende 10-15 minuten zachtjes meerdere keren om de twee reactanten volledig te mengen en de efficiëntie te verhogen.
5.Zuivering van de conjugatie
Het volgende protocol is een voorbeeld van kleurstof-eiwitconjugaatzuivering met behulp van een Sephadex G-25 kolom.
1) Bereid de Sephadex G-25 kolom voor volgens de instructies van de fabrikant.
2) Breng het reactiemengsel (van ""Run conjugation reaction"") aan op de bovenkant van de Sephadex G-25 kolom.
3) Voeg PBS (pH 7.2-7.4) toe zodra het monster net onder het bovenste harsoppervlak loopt.
4) Voeg meer PBS (pH 7.2-7.4) toe aan het gewenste monster om de kolomzuivering te voltooien.
Combineer de fracties die het gewenste kleurstof-eiwitconjugaat bevatten.

Informatie klinische proef

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Rekrutering Aandoeningen Sponsor/Medewerkers Startdatum Fasen
NCT05312411 Recruiting
Osteosarcoma
Seattle Children''s Hospital|Umoja BioPharma Inc.
May 20 2022 Phase 1
NCT02743468 Completed
Polymorphism|Lung Inflammation
National Institute of Environmental Health Sciences (NIEHS)|National Institutes of Health Clinical Center (CC)
January 8 2019 --
NCT02878083 Terminated
ULCERATIVE COLITIS
Nantes University Hospital|Takeda|Mauna Kea Technologies|Institut National de la Santé Et de la Recherche Médicale France
January 11 2017 Not Applicable

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

Gelieve uw naam in te voeren.
Gelieve uw e-mailadres in te voeren. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.