Ustekinumab (anti-IL-12/IL-23)

De toevoeging van Ustekinumab (UST) remt significant de differentiatie van T folliculaire helper (TFH) cellen in vitro.[1]

Doel: TFH-celdifferentiatie-assay
Cellen: naïeve CD4+ T-cellen, T folliculaire helper (TFH) cellen, PBMC's
Concentraties: 100 ng/mL
Incubatietijd: 24 u
Methode: De TFH-celdifferentiatie-assay wordt uitgevoerd met vers geïsoleerde PBMC's van gezonde donoren (n = 16). Naïeve CD4+ T-cellen worden geïsoleerd met behulp van de humane Naïeve CD4+ T Cel Isolatie Kit II. In totaal worden 500.000 naïeve CD4+ T-cellen gekweekt in compleet medium in aanwezigheid van 12.5 μL/mL anti-CD3/CD28 in een platbodem 48-wells plaat. Na 24 uur kweek worden cytokinen toegevoegd en worden cellen gedurende nog eens 2.5 dagen geïncubeerd. In totaal worden 5 ng/mL IL-12 + 5 ng/mL TGFβ met en zonder 100 ng/mL UST en 100 ng/mL UST alleen gebruikt.
Referentie: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32679193

Ustekinumab kan worden toegepast op gehumaniseerde muizen, perifeer bloed en andere gerelateerde assays (Alleen ter referentie)

Ustekinumab wordt gegenereerd via recombinante humane IL-12 immunisatie van humane Ig (hu-Ig) transgene muizen. Ustekinumab bindt aan de p40-subeenheid die gemeenschappelijk is voor IL-12 en IL-23 en voorkomt hun interactie met de IL-12-receptor β1-subeenheid van de IL-12- en IL-23-receptorcomplexen.[2]