Name: Anisomycin (Flagecidin)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7409
Rating: 5 (85 reviews)

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Contrôle qualité

Lot : Pureté : 99.93%

99.93

Cibles apparentées	ERK p38 MAPK Raf MEK Ras KRas S6 Kinase MAP4K TAK1 Mixed Lineage Kinase
Autre JNK Inhibiteurs	CC-90001 SP600125 JNK-IN-8 JNK Inhibitor IX Tanzisertib Hydrochloride (CC-930) JNK Inhibitor VIII Polyphyllin I DTP3 BI-78D3 Bentamapimod (AS602801)

Culture cellulaire, traitement et concentration de travail

Lignées cellulaires	Type dessai	Concentration	Temps dincubation	Description de lactivité	PMID
HEK293	Function assay			Inhibitory concentration required to produce cytotoxicity against HEK293 cells, IC50=0.02μM.	16005213
HeLa	Function assay	10 uM		Inhibition of translation in human HeLa cells at 10 uM by 35S-methionine metabolic labeling study	15165136
HEK293	Function assay	100 uM	15 mins	Increase of JNK phosphorylation in U50488 treated untransfected HEK293 cells at 100 uM after 15 mins	17702750
HEK293	Function assay	50 uM	15 mins	Increase of U50488-induced JNK phosphorylation in untransfected HEK293 cells at 50 uM after 15 mins	17702750
RAW264.7	Function assay	5 uM	30 mins	Activation of p38MAPK in mouse RAW264.7 cells assessed as phosphorylation at Thr180/Tyr182 at 5 uM after 30 mins by Western blotting analysis	23294286
Sf9	Function assay	10 uM	6 to 24 hr	Increase of ATP level in Spodoptera frugiperda (fall armyworm) Sf9 cells at 10 uM after 6 to 24 hr by luminescent cell viability assay	ChEMBL
Sf9	Cytotoxicity assay	10 uM	72 hr	Cytotoxicity against Spodoptera frugiperda (fall armyworm) Sf9 cells at 10 uM after 72 hr by trypan blue dye exclusion test	ChEMBL
VERO-E6	Function assay		48 hrs	Determination of IC50 values for inhibition of SARS-CoV-2 induced cytotoxicity of VERO-E6 cells after 48 hours exposure to 0.01 MOI SARS CoV-2 virus by high content imaging, IC50=0.09μM.	ChEMBL
VERO-E6	Function assay		48 hrs	Toxicity CC50 against VERO-E6 cells determined at 48 hours by high content imaging (same conditions as 2_LEY without exposure to 0.01 MOI SARS CoV-2 virus), CC50=0.1μM.	ChEMBL
Vero E6	Function assay			CC50 determination at MOI 0.004 using CellTiter- Glo (CTG) assay, performed 3 days post-infection in Vero E6 cells, CC50<0.39μM.	ChEMBL
Vero E6	Function assay			CC50 determination at MOI 0.01 using CellTiter- Glo (CTG) assay, performed 3 days post-infection in Vero E6 cells, CC50<0.39μM.	ChEMBL
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Informations chimiques, stockage et stabilité

Poids moléculaire	265.3	Formule	C₁₄H₁₉NO₄	Stockage (À partir de la date de réception)	3 ans-20°Cpoudre
N° CAS	22862-76-6	Télécharger le SDF		Stockage des solutions mères	1 an-80°Cen solvant 1 mois-20°Cen solvant

Solubilité

In vitro
Lot:

DMSO : 53 mg/mL (199.77 mM)
(Le DMSO contaminé par lhumidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Ethanol : 16 mg/mL

Water : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse	Concentration	Volume	Poids moléculaire
=	×	×

Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo Lot:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe de vente pour des tests personnalisés.	2.650mg/ml (9.99mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 53 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe de vente pour des tests personnalisés.	0.850mg/ml (3.20mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 17 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Entrez les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant lexpérience)

Dosage : mg/kg Poids moyen des animaux : g Volume de dosage par animal :μL Nombre danimaux :

Étape 2 : Entrez la formulation in vivo (Ceci nest que le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter dabord sil ny a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter dabord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuiteμL PEG300, mélanger et clarifier, ajouter ensuiteμL Tween 80, mélanger et clarifier, ajouter ensuite μL ddH₂O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuite μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Remarque : 1. Assurez-vous que le liquide est clair avant dajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous dajouter le(s) solvant(s) dans lordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue lors de lajout précédent est une solution claire avant de procéder à lajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme daction

Targets/IC₅₀/Ki	JNK
In vitro	Anisomycin (3 μM) diminue la synthèse des protéines dans les cellules MDA16 et MDA-MB-468, et réduit la formation de colonies par les cellules MDA-MB-468. Ce composé provoque une augmentation du nombre de cellules apoptotiques dans les cultures MDA-MB-468, mais pas dans les cultures MDA16. Il active la phosphorylation de JNK dans les cellules MDA-MB-468. Dans les cellules U251 et U87, cette substance chimique (0.01-8 μM) inhibe la croissance cellulaire de manière dépendante du temps et de la concentration avec des valeurs d'IC50 (48 h) de 0.233 et 0.192 μmol/L, respectivement. Elle (4 μM) provoque 21.5% et 25.3% d'apoptose dans les cellules U251 et U87, respectivement, et active la p38 MAPK et JNK, tout en inactivant ERK1/2. Ce composé (4 μM) réduit le niveau de la sous-unité PP2A/C de manière dépendante du temps dans les cellules U251 et U87. Il inhibe la prolifération des cellules EAC de manière dépendante de la concentration.
Kinase Assay	Phosphorylation de JNK
Kinase Assay	500 000 cellules/puits sont ensemencées dans des plaques à 6 puits et incubées pendant la nuit. Les cellules sont ensuite incubées pendant 1 h avec les composés testés ou du DMSO comme contrôle véhicule (concentration finale 1 % v/v). La puromycine est ajoutée (concentration finale de 18 μM) et les cellules sont incubées pendant 10 min supplémentaires pour marquer les chaînes polypeptidiques naissantes. Le marquage de fond est déterminé en incubant les cellules sans puromycine. Les cellules sont ensuite lavées dans du HBSS, récoltées par raclage et centrifugées (300 g, 5 min). Les cellules sont resuspendues dans 0.5 mL de DTT 50 mM contenant des inhibiteurs de phosphatase et incubées à 95℃ pendant 10 min. Les échantillons sont ensuite congelés instantanément dans de l'azote liquide et stockés à -20℃ jusqu'à ce qu'ils soient transférés. Les échantillons (20-30 μg de protéines/échantillon) sont transférés sur une membrane PVDF. La membrane est bloquée et incubée avec un anticorps anti-phospho-Thr183/Tyr185-JNK pendant la nuit à 4℃. Des anticorps secondaires sont utilisés pour marquer l'anticorps primaire et détectés à l'aide d'un scanner infrarouge. L'intensité du signal de fluorescence pour l'anticorps anti-phospho-JNK est corrigée du bruit de fond et normalisée pour le chargement.
In vivo	L'administration péritumorale d'Anisomycin (5 mg/kg) supprime significativement la croissance du carcinome ascitique d'Ehrlich (EAC), entraînant la survie d'environ 60 % des souris 90 jours après l'inoculation de l'EAC.
Références	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9154836/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24333448/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22684030/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23525555/

Applications

Méthodes	Biomarqueurs	PMID
Western blot	p-Keratin 20 / Keratin 20 / p-Keratin 18 / Keratin 18 / p-Keratin 8 / Keratin 8 / p-MK2 / p-hHSPB1 / hHSPB1 PP2A / PP2C p-ERK / ERK / p-JNK / JNK / p-p38 / ATF3	20724476
Immunofluorescence	p-Keratin 8 / p-Keratin 18 / p-Keratin 20	20724476
Growth inhibition assay	Cell viability	22684030