réservé à la recherche

Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC) Dyes chimique

N° Cat.S6928

Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC, Fluorescein isothiocyanate isomer I, 5-FITC) est une sonde fluorescente capable d'être conjuguée à des tissus et des protéines.
Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC) Dyes chimique Chemical Structure

Structure chimique

Poids moléculaire: 389.38

Aller à

Contrôle qualité

Lot : S692801 DMSO]78 mg/mL]false]Ethanol]10 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Pureté : 98.88%
98.88

Informations chimiques, stockage et stabilité

Poids moléculaire 389.38 Formule

C21H11NO5S

Stockage (À partir de la date de réception) 3 years -20°C(in the dark) powder
N° CAS 3326-32-7 -- Stockage des solutions mères

Synonymes Fluorescein isothiocyanate isomer I, 5-FITC Smiles OC1=CC2=C(C=C1)C3(OC(=O)C4=C3C=CC(=C4)N=C=S)C5=C(O2)C=C(O)C=C5

Solubilité

In vitro
Lot:

DMSO : 78 mg/mL (200.31 mM)
(Le DMSO contaminé par lhumidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Ethanol : 10 mg/mL

Water : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse Concentration Volume Poids moléculaire
Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo
Lot:

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Entrez les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant lexpérience)

mg/kg g μL

Étape 2 : Entrez la formulation in vivo (Ceci nest que le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter dabord sil ny a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter dabord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuiteμL PEG300, mélanger et clarifier, ajouter ensuiteμL Tween 80, mélanger et clarifier, ajouter ensuite μL ddH2O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuite μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Remarque : 1. Assurez-vous que le liquide est clair avant dajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous dajouter le(s) solvant(s) dans lordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue lors de lajout précédent est une solution claire avant de procéder à lajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme daction

In vitro

1.Préparation des protéines
1) Afin d'obtenir le meilleur effet de marquage, veuillez préparer la concentration de protéines (anticorps) à 2 mg/mL.
2) La valeur du pH de la solution protéique doit être de 8,5±0,5. Si le pH est inférieur à 8,0, du bicarbonate de sodium 1M doit être utilisé pour l'ajustement.
3) Si la concentration en protéines est inférieure à 2 mg/mL, l'efficacité du marquage sera considérablement réduite. Afin d'obtenir la meilleure efficacité de marquage, il est recommandé que la plage de concentration finale en protéines soit de 2-10 mg/mL.
4) La protéine doit être dans le tampon sans amine primaire (comme le Tris ou la glycine) et ion ammonium, sinon l'efficacité du marquage sera affectée.
2.Dye Preparation
Ajouter du DMSO anhydre dans le flacon de Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC) pour obtenir une solution mère de 10 mM. Bien mélanger par pipetage ou vortex.
3.Calcul du dosage du colorant
La quantité de ce composé nécessaire pour la réaction dépend de la quantité de protéine à marquer, et le rapport molaire optimal de celui-ci à la protéine est d'environ 10.
Exemple: en supposant que la protéine marqueur requise est 1 mL 2 mg/mL IgG (MW=150 000), utiliser 1 mL de DMSO pour dissoudre 1 mg de FITC, le volume requis est de 40 μL.
4.Réaction de conjugaison
1) Un bon volume de FITC fraîchement préparé à 10 mg/mL est lentement ajouté à 0,5 mL d'échantillon de protéine. En solution, agiter doucement pour mélanger, puis centrifuger brièvement pour recueillir l'échantillon au fond du tube de réaction. Ne pas trop mélanger pour éviter la dénaturation et l'inactivation des échantillons de protéines.
2) Les tubes de réaction ont été placés dans un endroit sombre et incubés doucement à température ambiante pendant 60 minutes à intervalles. Pendant 10 à 15 minutes, retourner doucement les tubes de réaction plusieurs fois pour mélanger complètement les deux réactifs et augmenter l'efficacité.
5.Purifier la conjugaison
Le protocole suivant est un exemple de purification d'un conjugué colorant-protéine en utilisant une colonne de Sephadex G-25.
1) Préparer la colonne de Sephadex G-25 selon les instructions du fabricant.
2) Charger le mélange réactionnel (de ""Run conjugation reaction"") sur le dessus de la colonne de Sephadex G-25.
3) Ajouter du PBS (pH 7,2-7,4) dès que l'échantillon descend juste en dessous de la surface supérieure de la résine.
4) Ajouter plus de PBS (pH 7,2-7,4) à l'échantillon désiré pour compléter la purification sur colonne.
Combiner les fractions qui contiennent le conjugué colorant-protéine désiré.

Informations sur lessai clinique

(données de https://clinicaltrials.gov, mis à jour le 2024-05-22)

Numéro NCT Recrutement Conditions Sponsor/Collaborateurs Date de début Phases
NCT05312411 Recruiting
Osteosarcoma
Seattle Children''s Hospital|Umoja BioPharma Inc.
May 20 2022 Phase 1
NCT02743468 Completed
Polymorphism|Lung Inflammation
National Institute of Environmental Health Sciences (NIEHS)|National Institutes of Health Clinical Center (CC)
January 8 2019 --
NCT02878083 Terminated
ULCERATIVE COLITIS
Nantes University Hospital|Takeda|Mauna Kea Technologies|Institut National de la Santé Et de la Recherche Médicale France
January 11 2017 Not Applicable

Support technique

Instructions de manipulation

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Si vous avez dautres questions, veuillez laisser un message.

Veuillez entrer votre nom.
Veuillez entrer votre e-mail. Veuillez entrer une adresse e-mail valide.
Veuillez nous écrire quelque chose.