Vismodegib (GDC-0449)

Vismodegib (GDC-0449) cible la Hedgehog signaling pathway, bloquant les activités des récepteurs de surface cellulaire du ligand Hedgehog PTCH et/ou SMO et supprimant la signalisation Hedgehog. Ce composé prévient de multiples transporteurs à cassette de liaison à l'ATP (ABC) et bloque également ABCG2, Pgp et MRP1 — des ABC Transporter importants associés à la MDR. C'est un puissant inhibiteur des ABC Transporter, ABCG2/BCRP et ABCB1/Pgp, et un léger inhibiteur de ABCC1/MRP1. Dans les cellules HEK293 surexprimant ABCG2, il augmente la rétention du substrat fluorescent BODIPY d'ABCG2 et resensibilise ces cellules. Dans les cellules de rein de chien Madin-Darby II conçues pour surexprimer Pgp ou MRP1, il augmente la rétention de la calcéine-AM et les resensibilise. Il resensibilise également les cellules de carcinome pulmonaire non à petites cellules humaines NCI-H460/par et NCI-H460/MX20, qui surexpriment ABCG2 en réponse au SN-38. Les valeurs d'IC50 pour la prévention d'ABCG2 et de Pgp sont d'environ 1,4 μM et 3,0 μM, respectivement. [2] De plus, il altère l'homéostasie du Ca²⁺ intracellulaire et inhibe la croissance cellulaire dans les cellules cancéreuses pulmonaires résistantes. [3]

Vismodegib (GDC-0449) a été utilisé pour traiter le médulloblastome dans des modèles animaux. [2] Il prévient la croissance des xénogreffes pancréatiques primaires sans inhiber de manière non spécifique la prolifération des cellules pancréatiques. L'administration orale de ce composé provoque des régressions tumorales dans le modèle d'allogreffe de médulloblastome Ptch(+/-) à des doses ≥25 mg/kg et une inhibition de la croissance tumorale à des doses allant jusqu'à 92 mg/kg administrées deux fois par jour dans deux modèles de cancer colorectal dépendants du ligand, D5123 et 1040830. L'analyse de l'activité de la voie Hh et la modélisation PK/PD révèlent qu'il inhibe Gli1 avec un IC50 similaire dans les modèles de médulloblastome et de D5123 (0,165 μM et 0,267 μM, respectivement). La modulation de la voie est liée à l'efficacité en utilisant un modèle PK/PD intégré révélant une relation abrupte où > 50% de l'activité de GDC-0449 est associée à >80% de répression de la voie Hh. [4]

• Lignées cellulaires

  MDCKII cells

• Concentrations

  20 μM

• Temps dincubation

  2 hours

• Méthode

  MDCKII cells are seeded into 24-well plates at a density of 3 × 10⁵ cells per well and are allowed to attach. Medium is then changed to that containing different drugs (50 μM VP, or 20 μM Vismodegib (GDC-0449) in DMSO or DMSO alone as control, and nonfluorescent calcein-AM is added to a final concentration of 1.0 μM and incubated at 37 °C for 2 hours. It is then used in subsequent steps. Cells are washed twice with Ca²⁺, Mg²⁺-containing Hank's balanced salt solution buffer and lysed by shaking in 0.01% Triton X-100 in PBS buffer for 1 hour at room temperature or overnight at 4 °C. The lysate is then transferred into 96-well plates, and the fluorescence signal caused by the cell-derived calcein is quantified spectrophotometrically with a SpectraMax M5 Multi-Detection Readerusing an excitation wavelength of 495 nm and an emission wavelength of 515 nm. All manipulations are performed in the dark. All readings are expressed as mean ?SEM normalized to the control.

• Modèles animaux

  Ptch(+/-) allograft model, D5123 and 1040830

• Dosages

  ~ 100 mg/kg

• Administration

  Orally