Vedolizumab (anti-α4β7-integrin)

N° de catalogueA2045 Batch: A204502

Données techniques

N° CAS	943609-66-3
Formule	PBS Buffer, PH 7.4
Isotype	Human IgG1
Application	Vedolizumab (anti-α4β7-integrin)
Stockage (À partir de la date de réception)	Store the undiluted solution at 4°C in the dark to avoid freeze-thaw cycles.
Pureté	98%
Concentration en protéines:	5.72mg/ml
Niveau dendotoxines	＜1EU/mg

Activité biologique

Description	Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) est un anticorps monoclonal IgG1 humanisé qui cible l'α4β7 integrin pour le traitement de la colite ulcéreuse et de la maladie de Crohn.
In vitro	Le Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) se lie à un sous-ensemble de lymphocytes T CD4⁺ mémoires du sang périphérique humain, y compris les lymphocytes T auxiliaires à homing intestinal d'interleukine 17 au niveau le plus élevé, se lie également aux éosinophiles à des niveaux élevés, et aux lymphocytes T auxiliaires naïfs, aux lymphocytes T cytotoxiques naïfs et mémoires, aux lymphocytes B, aux cellules tueuses naturelles et aux basophiles à des niveaux plus faibles; Le Vedolizumab se lie aux lymphocytes T et B CD4⁺ mémoires avec une puissance subnanomolaire avec une EC50 de 0,3-0,4 nM.

Description

Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) est un anticorps monoclonal IgG1 humanisé qui cible l'α4β7 integrin pour le traitement de la colite ulcéreuse et de la maladie de Crohn.

In vitro

Le Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) se lie à un sous-ensemble de lymphocytes T CD4⁺ mémoires du sang périphérique humain, y compris les lymphocytes T auxiliaires à homing intestinal d'interleukine 17 au niveau le plus élevé, se lie également aux éosinophiles à des niveaux élevés, et aux lymphocytes T auxiliaires naïfs, aux lymphocytes T cytotoxiques naïfs et mémoires, aux lymphocytes B, aux cellules tueuses naturelles et aux basophiles à des niveaux plus faibles; Le Vedolizumab se lie aux lymphocytes T et B CD4⁺ mémoires avec une puissance subnanomolaire avec une EC50 de 0,3-0,4 nM.

Protocole (pour référence uniquement)

Test cellulaire :	Les PBMC ont été resuspendues dans un tampon de dosage pour la coloration intracellulaire de l'interleukine (IL) 17A des cellules mémoires CD4. Les PBMC ont été stimulées (ou non stimulées, pour les échantillons témoins) avec 50 ng/ml de phorbol 12-myristate 13-acétate et 1 µg/ml d'ionomycine en présence de 3 µM de Monensin pendant 5 h à 37°C. Après lavage, les cellules ont été colorées avec des anticorps marqués par fluorescence : vedolizumab, anti-α4 et anti-β7, anti-CD4 et anti-CD45RO, le cas échéant, à 4°C pendant 30 min. Les cellules ont ensuite été lavées avec du PBS froid et resuspendues dans une solution de travail de fixation et de perméabilisation, tampon de coloration à 4°C pendant 30 min. Après fixation et perméabilisation, les cellules ont été lavées avec un tampon de perméabilisation et bloquées avec 10% de sérum de rat normal à 4°C pendant 10 min. Après l'étape de blocage, les cellules ont été colorées avec un anticorps anti_x0002_IL17A conjugué à un fluorochrome à 4°C pendant 30 min. Enfin, les cellules ont été lavées avec un tampon de perméabilisation et analysées.

Test cellulaire :

Les PBMC ont été resuspendues dans un tampon de dosage pour la coloration intracellulaire de l'interleukine (IL) 17A des cellules mémoires CD4. Les PBMC ont été stimulées (ou non stimulées, pour les échantillons témoins) avec 50 ng/ml de phorbol 12-myristate 13-acétate et 1 µg/ml d'ionomycine en présence de 3 µM de Monensin pendant 5 h à 37°C. Après lavage, les cellules ont été colorées avec des anticorps marqués par fluorescence : vedolizumab, anti-α4 et anti-β7, anti-CD4 et anti-CD45RO, le cas échéant, à 4°C pendant 30 min. Les cellules ont ensuite été lavées avec du PBS froid et resuspendues dans une solution de travail de fixation et de perméabilisation, tampon de coloration à 4°C pendant 30 min. Après fixation et perméabilisation, les cellules ont été lavées avec un tampon de perméabilisation et bloquées avec 10% de sérum de rat normal à 4°C pendant 10 min. Après l'étape de blocage, les cellules ont été colorées avec un anticorps anti_x0002_IL17A conjugué à un fluorochrome à 4°C pendant 30 min. Enfin, les cellules ont été lavées avec un tampon de perméabilisation et analysées.

Références	https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19509315/

Références

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19509315/

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