|
Comment citer 1. Pour la citation dans le texte (Matériel & Méthodes) : 2. Pour le tableau des ressources clés : |
||
|
Numéro vert : (877) 796-6397 -- États-Unis et Canada uniquement -- |
Fax : +1-832-582-8590 Commandes : +1-832-582-8158 |
Support technique : +1-832-582-8158 Ext:3 Veuillez indiquer votre numéro de commande dans le-mail. Nous nous efforçons de répondre à toutes les demandes par e-mail dans un délai dun jour ouvrable. |
Description biologique
| Spécificité | TSH Receptor/TSH-R Antibody [L10M22] détecte les niveaux endogènes de la protéine TSH Receptor/TSH-R totale. |
|---|---|
| Contexte | Le récepteur de l'hormone stimulant la thyroïde (TSHR) est un régulateur clé du métabolisme des hormones thyroïdiennes et sert de contrôleur principal de la fonction et de la croissance des cellules thyroïdiennes. Il appartient à la famille des récepteurs couplés aux protéines G avec sept domaines transmembranaires et est positionné sur la membrane basolatérale des cellules folliculaires thyroïdiennes. La protéine TSHR est composée de 764 acides aminés, a un poids moléculaire d'environ 87 kDa et médie ses effets par interaction avec plusieurs sous-types de protéines G, notamment Gαs et Gαq. Lors de l'activation par la TSH, le récepteur initie une signalisation intracellulaire via ces protéines G, modulant ainsi l'activité des molécules effectrices en aval. La voie Gαs stimule la cascade de l'adénosine monophosphate cyclique (cAMP), tandis que la voie Gαq active la cascade de la phospholipase C (PLC). À des concentrations élevées de TSH, le cAMP se lie à la protéine kinase A (PKA), qui phosphoryle divers effecteurs cibles, améliorant leur activité catalytique. En parallèle, l'activation de la PLC génère de l'inositol 1,4,5-triphosphate (IP₃) et du diacylglycérol (DAG), amplifiant ainsi davantage les réponses cellulaires. L'expression du TSHR est régulée positivement par les niveaux physiologiques de TSH, mais est régulée à la baisse à des concentrations de TSH persistantes. Une surstimulation chronique du TSHR, en particulier via la voie cAMP, peut entraîner une sécrétion excessive d'hormones thyroïdiennes, une hyperplasie folliculaire thyroïdienne et une hyperthyroïdie clinique. Les mutations du gène TSHR peuvent affecter la structure protéique du récepteur ou ses modifications post-traductionnelles, altérant ainsi la fonction du récepteur. Bien que le TSHR n'initie pas directement la cancérogenèse, il peut contribuer de manière significative à la croissance tumorale lorsque les oncogènes sont déjà activés. |
Informations dutilisation
| Application | IHC | Dilution |
|
||
|---|---|---|---|---|---|
| Réactivité | Human | ||||
| Source | Rabbit Monoclonal Antibody | MW | |||
| Tampon de stockage | PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 | Stockage (À partir de la date de réception) |
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years | ||
| IHC |
Experimental Protocol：
Deparaffinization/Rehydration
1. Deparaffinize/hydrate sections:
2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.
3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.
4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.
5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.
6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.
Staining
1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.
2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.
3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
4. Wash sections in wash buffer for 5 min.
5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.
6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.
7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.
8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.
9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.
10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.
11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.
12. Immerse slides in dH2O.
13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.
14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.
16. Mount sections with coverslips and mounting medium.
|
Références
|
Données dapplication
IHC
Validé par Selleck
-
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human thyroid gland tissue with F3696 at 1:1000 dilution.