Stemregenin 1 (SR1)

StemRegenin 1 (SR1) augmente le nombre de cellules CD34+ après 5 à 7 jours avec une EC50 de 120 nM. La culture de cellules CD34+ de mPB avec des cytokines et ce composé (1 µM) pendant 7 jours augmente le nombre de populations de cellules souches et progénitrices hématopoïétiques CD34+, CD133+ et CD90+ de 2,6, 2,3 et 10 fois, respectivement, par rapport aux cellules témoins. La culture continue avec lui (1 µM) pendant 3 semaines entraîne une augmentation de 11 fois du nombre total de cellules nucléées (TNC), une augmentation de 73 fois des cellules CD34+ par rapport aux cultures témoins, et une augmentation de 1118 fois des cellules CD34+ par rapport aux cellules d'entrée. La culture de 1×10³ cellules CD34+ de sang de cordon pendant 5 semaines avec SR1 (1 µM) entraîne la production de 1,69×10⁶ cellules formant des colonies. Il induit l'expansion des cellules CD34+ en se liant et en antagonisant AhR, comme en témoignent les niveaux diminués d'ARNm de CYP1B1 et AHRR. [1]

Le traitement avec ce composé (1 µM) accélère la prolifération des cellules CD34+ et diminue les niveaux d'expression de VentX dans les cellules CD34+ humaines. L'expression ectopique de VentX empêche l'expansion des cellules CD34+ induite par SR1. [2]

La coculture séquentielle avec la protéine morphogénétique osseuse 4 (20 ng/mL), la PGE2 (2 µM) et lui (0,75 µM) conduit à une formation robuste de cellules progénitrices hématopoïétiques de CIPS de Macaca nemestrina. Les cellules CD34(+)CD38(-)Thy1(+)CD45RA(-)CD49f(+) isolées sur la base de l'expression de CD34 et cultivées dans SR1 (0,75 µM) s'étendent 3 fois et maintiennent ce phénotype de cellules souches hématopoïétiques à long terme. [3]

StemRegenin 1 (SR1) favorise l'expansion des cellules CB CD34+ qui contribuent à l'engraftment précoce et soutenu chez les souris NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ (NSG). [1]

• AhR ligand binding assay

  Les foies de souris sont homogénéisés dans un tampon (25 mM MOPS, 2 mM EDTA, 0,02 % NaN3 et 10 % glycérol, pH 7,4) contenant 20 mM de molybdate de sodium et des inhibiteurs de protéase, puis centrifugés à 100 000 g pendant 1 h. Les lysats traités avec SR1 (StemRegenin 1) sont incubés à température ambiante pendant 20 min, puis photolysés à 8 cm avec une lumière UV de 402 nm. Du charbon recouvert de dextran (1 %) est ajouté aux échantillons photolysés, qui sont ensuite centrifugés à 3000 g pendant 10 min pour éliminer le ligand libre. Les échantillons marqués sont résolus par SDS-PAGE à 8 % d'acrylamide-tricine, transférés sur une membrane PVDF et visualisés par autoradiographie. Les bandes AHR marquées sont excisées et comptées à l'aide d'un compteur γ.