Regorafenib (BAY 73-4506)

Le Regorafenib prévient fortement l'autophosphorylation du VEGFR2 dans les cellules NIH-3T3/VEGFR2 avec une IC50 de 3 nM. Dans les HAoSMC, ce composé supprime l'autophosphorylation du PDGFR-β après stimulation par le PDGF-BB, avec une IC50 de 90 nM. Il inhibe également la signalisation du FGFR dans les cellules de cancer du sein (BC) MCF-7 stimulées par le FGF10. Cette substance chimique a très puissamment inhibé les récepteurs mutants KIT^K642E et RET^C634W, avec des IC50 d'environ 20 nM et 10 nM, respectivement. Elle inhibe la prolifération des HUVEC stimulées par le VEGF¹⁶⁵, avec une IC50 d'environ 3 nM. Ce composé prévient la prolifération des HUVEC stimulées par le FGF2 et des HAoSMC stimulées par le PDGF-BB avec des IC50 de 127 nM et 146 nM, respectivement. [1] Il cible à la fois la prolifération des cellules tumorales et la vascularisation tumorale par l'inhibition des récepteurs des Protein Tyrosine Kinase (VEGFR, KIT, RET, FGFR et PDGFR) et des sérine/thréonine kinases (Raf et p38MAPK). [2] Cette substance chimique supprime la croissance des cellules humaines Hep3B, PLC/PRF/5 et HepG2 de manière concentration- et temps-dépendante. [3]

Le Regorafenib révèle un puissant TGI dose-dépendant dans divers modèles précliniques de xénogreffes humaines chez la souris, avec une régression tumorale dans les modèles de cancer du sein MDA-MB-231 et de carcinome rénal 786-O. Ce composé prévient non seulement la croissance des tumeurs mammaires syngéniques primaires 4T1 poussant orthotopiquement dans le coussinet adipeux, mais supprime également la formation de métastases tumorales dans le poumon. [1]

• Tests kinases

  Des tests in vitro utilisant les domaines kinase recombinants de VEGFR2 (murin aa785–aa1367), VEGFR3 (murin aa818–aa1363), PDGFRβ (aa561–aa1106), Raf-1 (aa305–aa648) et BRafV600E (aa409–aa765) sont réalisés. Le profilage initial de l'inhibition kinase in vitro est effectué à une concentration fixe de 1 μM de ce composé. Les valeurs de concentration inhibitrice de 50% (IC50) sont déterminées à partir de kinases répondeuses sélectionnées, par exemple VEGFR1 et RET. L'inhibition de la kinase TIE2 est mesurée à l'aide d'un test de fluorescence homogène résolue dans le temps (HTRF) utilisant une protéine de fusion recombinante de la glutathion-S-transférase, le domaine intracellulaire de TIE2 et le peptide biotine-Ahx-EPKDDAYPLYSDFG comme substrat.

• Lignées cellulaires

  GIST 882 and TT cells

• Concentrations

  5 nM-10 μM

• Temps dincubation

  96 hours

• Méthode

  For proliferation assays, GIST 882 and TT cells are grown in RPMI medium containing L-glutamine, and MDA-MB-231, HepG2 and A375 cells in DMEM always containing 10% hiFBS. Cells are trypsinized, plated at 5×10⁴ cells/well in 96-well plates in complete media containing 10% FBS and grown overnight at 37 °C. The next day, vehicle or Regorafenib serially diluted in complete growth media to between 10 μM and 5 nM final concentrations, and 0.2% DMSO, is added and incubation is continued for 96 hours. Cell proliferation is quantified.

• Modèles animaux

  Female athymic NCr nu/nu mice with Colo-205, MDA-MB-231 or 786-O

• Dosages

  3 mg/kg, 10 mg/kg, 30 mg/kg, 100 mg/kg

• Administration

  Orally