PACAP 1-38

Le PACAP 1-38 a des effets stimulateurs puissants, efficaces et soutenus sur la production de NPY et de catécholamines neuronales sympathiques[1]. C'est un neuropeptide pléiotrope, présentant une variété d'actions biologiques, y compris des activités en tant que neurotransmetteur, neuromodulateur, facteur neurotrophique, ainsi qu'un immunomodulateur, dans les cellules immunitaires par son effet sur la signalisation MAPK et la modulation de l'activation de NFκB. Ce composé prévient de manière spectaculaire les lésions des cellules tubulaires rénales proximales cultivées causées par les chaînes légères de myélome par la suppression de la production de cytokines pro-inflammatoires, en inhibant la p38 MAPK et la translocation de NFκB via les récepteurs PAC1 et VPAC1. Il inhibe directement la croissance des cellules de myélome et peut également le faire indirectement en supprimant la production du facteur de croissance, IL-6, par les cellules stromales de la moelle osseuse, qui est stimulée par l'adhésion des cellules de myélome. Ce neuropeptide a supprimé la libération d'IL-6 et de TNFα de manière dose-dépendante[2].

Le PACAP38 est capable d'inhiber l'expression des cytokines induites par les chaînes légères avec une grande puissance et a prévenu les dommages cellulaires résultants in vivo. Cependant, ce composé est également considéré comme un facteur autorégulateur pour certaines tumeurs, stimulant leur croissance de manière autocrine[2].

• Lignées cellulaires

  human renal proximal tubule cell line

• Concentrations

  0.0001-100 nM

• Temps dincubation

  3 days

• Méthode

  Human renal proximal tubule cells plated onto 6-well tissue culture plates are grown at 37°C in DRM-23E medium supplemented with 0.5% (vol/vol) FBS in an incubator for 24 hours. After prewashing with serum-free medium, the cells are incubated with κ-LC (1.5 mg/ml, ∼ 50 μM) for 3 days in the presence and absence of various concentrations of PACAP38 as well as kinase and transcription factor inhibitors. Cell viability is determined by trypan blue exclusion assays; in all experiments, at least 85% of cells remain viable. After exposure to test substances, culture supernatants are harvested and stored at –70°C for cytokine assays. After the medium is removed, the cells are washed with ice-cold PBS, and proteins are extracted by lysing cells with Sigma Mammalian Cell Lysis Reagents. Lysates are scraped and passed through a 21-gauge needle to shear DNA, and centrifuged at 12 000g for 10 minutes at 4°C. Finally, supernatants are harvested and used for kinase studies.

• Modèles animaux

  Male Sprague-Dawley rats

• Dosages

  2 nmol/10 mL

• Administration

  i.v.