Obinutuzumab (anti-CD20)

N° de catalogueA2023        Batch: A202301

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Données techniques

N° CAS 949142-50-1
Formule PBS buffer, pH 7.2
Isotype Human IgG1 isotype control
Source Humanized (from mouse)
Stockage
(À partir de la date de réception)		 Store the undiluted solution at 4°C in the dark to avoid freeze-thaw cycles
Pureté 99.65%
Concentration en protéines: 5 mg/ml
Niveau dendotoxines ≤1 EU/mg

Activité biologique

Description Obinutuzumab (anti-CD20) (Gazyva, GA101, Gazyvaro, Afutuzumab) est un nouvel anticorps monoclonal anti-CD20 humanisé, de type II, glyco-ingénierie, qui a été développé pour la leucémie lymphoïde et le lymphome d'origine B-cellulaire. PM : 146,1 kD.
In vitro

Le GA101 est le premier anticorps IgG1 humanisé de type II, conçu avec un fragment Fc, dirigé contre le CD20. Comparativement au rituximab, le GA101 présente une cytotoxicité directe et médiatisée par les cellules effectrices immunitaires accrue et une activité supérieure dans les essais cellulaires et les essais de déplétion des lymphocytes B dans le sang total.
In Vivo

Dans les modèles de xénogreffe de lymphome humain, le GA101 présente une activité antitumorale supérieure, entraînant l'induction d'une rémission tumorale complète et une survie globale accrue. Chez les primates non humains, le GA101 démontre une activité de déplétion des lymphocytes B supérieure dans les tissus lymphoïdes, y compris dans les ganglions lymphatiques et la rate.

Protocole (pour référence uniquement)

Test cellulaire :

  • Objectif : Essai FACS Annexin V/PI
    Cellules : Lignées cellulaires de LNH
    Concentrations : 10 μg/mL
    Temps d'incubation : 36 h
    Méthode : Pour la stimulation du CD40 des cellules hCD20 de souris transgéniques, les globules rouges (GR) sont éliminés par lyse hypotonique au chlorure d'ammonium-potassium (ACK), et les lymphocytes B spléniques intacts sont purifiés par déplétion des cellules non-B médiatisée par l'anti-CD43 (MACS). Les lymphocytes B sont incubés dans un milieu RPMI 1640 complet conditionné contenant 10 % de sérum de veau fœtal pendant 2 heures (avec ou sans 10 μg/mL de stimulation mitogénique) et soit des anticorps anti-CD40, soit des anticorps Fab2 anti-IgM. Ceci est suivi de 36 heures de stimulation anti-CD20 (GA101 ou rituximab 10 μg/mL). Comme contrôles positifs pour l'induction de la mort cellulaire, les agents suivants sont utilisés : 100nM de staurosporine pour l'apoptose médiatisée par les mitochondries, ou 1 μg/mL d'anti-CD95 Fas pour l'induction extrinsèque de l'apoptose.
    Référence : https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/

    Obinutuzumab peut s'appliquer aux souris humanisées (ex :souris SCID beige), au sang périphérique et à d'autres essais connexes (Uniquement à titre de référence)
Étude animale :

  • Objectif : Taux de contrôle tumoral (TCR) et inhibition de la croissance tumorale (TGI)
    Modèles animaux : Souris SCID beige femelles âgées de 4 à 8 semaines
    Formulation : --
    Dosages : 30 mg/kg
    Administration : i.p.
    Référence : https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24304419/

    Objectif : Études de xénogreffe de LNH chez des souris SCID beige
    Modèles animaux : Souris SCID beige femelles âgées de 4 à 5 semaines
    Formulation : --
    Dosages : 10 mg/kg, 30 mg/kg
    Administration : i.p.
    Référence : https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/

    Obinutuzumab peut s'appliquer aux souris humanisées (ex:souris SCID beige), au sang périphérique et à d'autres essais connexes (Uniquement à titre de référence)
Références
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28004361/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24304419/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/

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