BGT226 (NVP-BGT226) maleate

Les effets anti-prolifératifs et pro-apoptotiques du NVP-BGT226 sont indépendants du statut bcr-abl. L'activation de la cascade de signalisation AKT/mTOR est supprimée par le NVP-BGT226 de manière concentration- et temps-dépendante. L'analyse par cytométrie en flux montre une accumulation de cellules en phase G(0)-G(1) avec une perte concomitante en phase S. Le NVP-BGT226 présente une puissante activité inhibitrice de la croissance contre toutes les lignées cellulaires testées, y compris les lignées cellulaires SCC4, TU183 et KB, avec une IC50 allant de 7,4 à 30,1 nM. Notamment, les cellules Detroit 562 et HONE-1, qui expriment la mutation PIK3CA H1047R, sont toujours sensibles à l'effet inhibiteur de croissance du traitement par NVP-BGT226. En outre, la sensibilité au NVP-BGT226 entre les cellules HONE-1. Les résultats de l'essai de marquage des extrémités d'ADN nickées par la désoxynucléotidyl transférase terminale (TUNEL) et l'analyse de la caspase 3/7 et de la PARP indiquent que le NVP-BGT226 induit la mort des cellules cancéreuses par une voie indépendante de l'apoptose. Le NVP-BGT226 induit l'autophagie, comme l'indiquent l'agrégation et la régulation positive de la chaîne légère 3B-II de la protéine associée aux microtubules, et la dégradation de p62. Le silençage génique de Beclin1 ou le cotraitement de l'inhibiteur d'autophagosome, la 3-méthyladénine, inhibe l'autophagie induite par le NVP-BGT226 et conduit à la récupération de la survie des colonies.[2] Le NVP-BGT226 inhibe la croissance dans les lignées cellulaires de myélome communes et les cellules de myélome primaires (telles que les lignées cellulaires de MM NCI-H929, U266, RPMI-8226 et OPM2) à des concentrations nanomolaires de manière temps-dépendante et dose-dépendante. Le NVP-BGT226 inhibe la phosphorylation de la protéine kinase B (Akt), P70S6k et 4E-BP-1 de manière temps-dépendante et dose-dépendante. L'effet stimulant du facteur de croissance 1 analogue à l'insuline, de l'interleukine-6 et du milieu conditionné des cellules stromales HS-5 sur la croissance des cellules de myélome est complètement abrogé par le NVP-BGT226. L'inhibition de la phosphoinositol-3-kinase/cible mammifère de la rapamycine par le NVP-BGT226 est très efficace, et le NVP-BGT226 représente un nouveau candidat potentiel pour la thérapie ciblée dans le myélome multiple. L'inhibition combinée de PI3K et de la cible mammifère de la rapamycine (mTOR) par le NVP-BGT226 s'est avérée très efficace en termes d'induction de l'apoptose et d'inhibition de la prolifération. [3] Dans une autre étude, après 24 heures, 86,9 % des cellules MiaPaCa-2 traitées avec 100 nM de NVP-BGT226 s'arrêtent en phase G0/G1 contre 55,6 % des cellules témoins. [4]

Dans un modèle animal xénogreffé, le NVP-BGT226 retarde significativement la croissance tumorale de manière dose-dépendante, avec une expression cytoplasmique supprimée de la p-p70 S6 kinase et la présence de la formation d'autophagosomes. Le NVP-BGT226 inhibe la croissance tumorale de manière dose-dépendante dans un modèle de souris xénogreffée de cellules FaDu. L'administration orale de NVP-BGT226 à 2,5 et 5 mg/kg pendant 3 semaines entraîne une réduction de 34,7 % et 76,1 % de la croissance tumorale au jour 21, respectivement (par rapport au contrôle). Le NVP-BGT226 présente une inhibition comparable de la croissance tumorale à la rapamycine. Le volume final des deux groupes est significativement plus petit que ceux traités avec LY294002 (un inhibiteur de PI3K) ou le contrôle. [2]

• Lignées cellulaires

  NCI-H929, U266, RPMI-8226 and OPM2 MM cells

• Concentrations

  20-250 nM

• Temps dincubation

  36 hours

• Méthode

  NCI-H929, U266, RPMI-8226 and OPM2 MM cells are seeded in 96-well plates at a concentration of 1.5 × 10⁴ cells/well in RPMI medium supplemented with 10% fetal bovine serum with or without NVP-BGT226 that is to be tested. After 36 hours, BrdU-labelling solution is added (final concentration: 10 μM), and cells are cultured for another 12 hours in a humidified atmosphere (37 °C/5% CO₂). Then, the plates are centrifuged (10 min, 300 g), and the supernatants are discarded. The plates are dried at 60 °C for 2 hours. After fixation with ethanol/HCl for 30 min at -20 °C, the DNA is partially digested by nuclease treatment for 30 min at 37 °C. The cells are washed three times with medium and incubated with anti-BrdU-POD labelling solution for 30 min at 37 °C. The anti-POD solution is removed and the cells are washed three times with washing buffer. The ABTS substrate solution is added, and absorbance is measured in a microplate reader at 405 nm with a reference wave length of 490 nm.

• Modèles animaux

  Human FaDu xenografted mice

• Dosages

  5 mg/kg for 3 weeks

• Administration

  Oral administration