ICG-001

ICG-001 n'a aucun effet sur la construction rapporteur associ e, FOPFLASH, qui contient des sites TCF mut s. Apr s un traitement avec 25 M de ce compos pendant 8 heures, les cellules SW480 r duisent les niveaux l' tat stationnaire d'ARN et de prot e Survivin et Cyclin D1, qui peuvent tous deux tre r gul s la hausse par la -cat nine. Ce compos induit s lectivement l'apoptose dans les cellules transform es mais pas dans les cellules coliques normales, r duit la croissance in vitro des cellules de carcinome du c l . [1] Il peut sauver ph notypiquement la diff renciation neuronale et la croissance des neurites induites par le facteur de croissance nerveuse (NGF) normal dans les cellules mutantes de la pr s niline-1, soulignant l'importance de la voie de signalisation TCF/ -cat nine sur la croissance des neurites et la diff renciation neuronale. [2] Une tude r cente d montre que 5 M de ce produit chimique inhibe l'EMT induite par la leptine, l'invasion et la formation de sph ro des tumorales dans les cellules MCF7. [3]

L'administration d'un analogue hydrosoluble d'ICG-001 pendant 9 semaines r duit la formation de polypes du c l et de l'intestin gr le de 42%, aussi efficacement que l'anti-inflammatoire non st ro dien, qui a constamment d montr son efficacit dans ce mod le. Aucune toxicit manifeste n'est d tect e tout au long du traitement. Dans le mod le de x nogreffe de souris nues SW620 de r gression tumorale, 150 mg/kg, i.v. de ce compos d montre une r duction spectaculaire du volume tumoral sur les 19 jours de traitement, sans mortalit ni perte de poids. [1] Ce produit chimique (5 mg/kg par jour) inhibe significativement la signalisation de la b ta-cat nine et att nue la fibrose pulmonaire induite par la bl omycine chez les souris, tout en pr servant l' pith lium. [4]

• Analyse par rapporteur DUAL-Luciferase

  Le syst me d'analyse par rapporteur Dual-Luciferase (DLR) offre un moyen efficace d'effectuer des dosages de double rapporteur. Dans l'analyse DLR^TM, les activit s des lucif rases de lucioles (Photinus pyralis) et de Renilla (Renilla reniformis, galement connue sous le nom de plume de mer) sont mesur es s quentiellement partir d'un chantillon unique. Le rapporteur lucif rase de luciole est mesur en premier par l'ajout du r actif d'analyse de lucif rases II (LAR II) pour g n rer un signal luminescent de type glow . Apr s quantification de la luminescence de la luciole, cette r action est teinte, et la r action de la lucif rase de Renilla est initi e en ajoutant simultan ment le r actif Stop & Glo dans le m me tube. Le r actif Stop & Glo produit galement un signal de type glow partir de la lucif rase de Renilla, qui d c c e lentement au cours de la mesure. Dans le syst me d'analyse DLR^TM, les deux rapporteurs donnent des dosages lin aires avec des sensibilit s subattomoles (<10-18) et aucune activit endog ne d'aucun des rapporteurs dans les cellules h tes exp rimentales. De plus, le format int gr de l'analyse DLR^TM permet une quantification rapide des deux rapporteurs, que ce soit dans des cellules transfect es ou dans des r actions de transcription/traduction sans cellules.

• Lignées cellulaires

  Human colon carcinoma cell lines SW480, SW620, and HCT116, normal colonic epithelial cell line CCD-841Co

• Concentrations

  ~25 μM

• Temps dincubation

  24 hours

• Méthode

  1. Prior to starting the assay, prepare the Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent, and mix thoroughly. 2. For best results, empirical determination of the optimal cell number, apoptosis induction treatment and incubation period for the cell culture system may be necessary. 3. Use identical cell numbers and volumes for the assay and the negative control samples. 4. Do not mix Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent and samples by manual pipetting. Mixing in this manner is unnecessary and may create bubbles that interfere with fluorescence readings or cross-contaminate the samples. Gentle mixing may be performed using a plate shaker. 5. Total incubation time for the assay depends upon the amount of caspase- 3/7 present in the sample. 6. The Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent is formulated to mediate cellular lysis and support optimal caspase-3/7 activity. In rare instances, the reagent does not affect complete lysis of cultured cells. In such cases, lysis is enhanced by a freeze-thaw cycle. For best results, freeze at -70 °C, then thaw at room temperature. After equilibration, mix to homogeneity and incubate until measurable fluorescence is achieved

• Modèles animaux

  C57BL/6 and nude mice tumor models

• Dosages

  20 mg/ kg

• Administration

  i.p.