Harmine hydrochloride

Harmine inhibe la phosphorylation du substrat par DYRK1A plus puissamment qu'il n'inhibe la phosphorylation du substrat par la kinase étroitement apparentée DYRK1B [concentrations inhibitrices maximales médianes (IC50) de 33 nM contre 166 nM, respectivement] et par les membres plus éloignés de la famille, DYRK2 et DYRK4 (1,9 μM et 80 μM, respectivement). Des concentrations beaucoup plus élevées de Harmine sont nécessaires pour supprimer l'autophosphorylation de la tyrosine de l'intermédiaire traductionnel de DYRK1A dans un système de traduction in vitro bactérien (IC50 = 1,9 μM). Harmine inhibe la phosphorylation d'un substrat spécifique par DYRK1A dans les cellules cultivées avec une puissance similaire à celle observée in vitro (IC50=48 nM), sans effets négatifs sur la viabilité des cellules. Harmine n'inhibe pas l'autophosphorylation de la tyrosine de DYRK1A dans les cellules HEK293[1]. Harmine est capable d'induire la prolifération des cellules bêta, d'augmenter la masse des îlots et d'améliorer le contrôle glycémique. C'est un stimulant du SNC[2].

Dans un modèle de pancréatectomie partielle (PPX), le traitement par Harmine induit un marquage Ki-67 dans les cellules bêta chez les souris opérées fictivement et chez les souris soumises à une PPX, avec la prolifération la plus robuste dans les cellules bêta des souris PPX traitées par Harmine. Dans le modèle PPX, la régénération de la masse des cellules bêta est substantiellement plus rapide chez les souris traitées par Harmine que chez les témoins, atteignant des valeurs quasi normales en seulement 14 jours. Dans un modèle de souris NOD-SCID euglycémiques non obèses et immunodéficientes combinées sévères, le marquage BrdU et Ki-67 est deux à trois fois plus élevé dans les cellules bêta humaines transplantées dans la capsule rénale des souris traitées par Harmine par rapport aux souris euglycémiques témoins, sans preuve de mort des cellules bêta. Dans un modèle de transplantation d'îlots humains de masse marginale chez des souris NOD-SCID diabétiques au streptozotocine, le traitement par Harmine entraîne également un contrôle glycémique quasi normal. Harmine induit la production des facteurs de transcription importants des cellules bêta NKX6.1, PDX1 et MAFA.

• Lignées cellulaires

  HeLa and HEK293 cells

• Concentrations

  1 nM-100 μM

• Temps dincubation

  56 h

• Méthode

  The effects of inhibitors on cell proliferation and viability are determined using a tetrazolium salt-based assay (WST-1). HeLa or HEK293 cells are seeded at a density of 5000 cells per well on 96-well plates. After overnight culture, serial dilutions of harmine in culture medium are applied to the wells (as triplicate samples) and the cells are cultured for 56 h without changing the medium, before the WST-1 assay is performed.

• Modèles animaux

  C57BL/6 mice

• Dosages

  10 mg/kg

• Administration

  i.p.