Cytarabine

La Cytarabine (AraC) est phosphorylée en une forme triphosphate (Ara-CTP) impliquant la désoxycytidine kinase (dCK), qui entre en compétition avec le dCTP pour l'incorporation dans l'ADN, puis bloque la synthèse de l'ADN en inhibant la fonction des ADN et ARN polymérases. Ce composé présente une activité inhibitrice de croissance plus élevée envers les cellules CCRF-CEM de type sauvage par rapport à d'autres cellules de leucémie myéloïde aiguë (LMA) avec une IC50 de 16 nM. [1] Des concentrations croissantes de ce produit chimique (IC50 de 0,69 μM) entraînent une diminution de l'activité métabolique de la lignée cellulaire leucémique de rat sensible RO/1, et la toxicité cellulaire peut être fortement améliorée par transfection avec de la dCK humaine wt (IC50 de 0,037 μM) mais pas les formes de dCK inactives, alternativement épissées. [2] Elle induit apparemment l'apoptose des neurones sympathiques de rat à 10 μM, dont 100 μM montre la toxicité la plus élevée et tue plus de 80% des neurones en 84 heures, impliquant la libération du cytochrome-c mitochondrial et l'activation de la caspase-3, et la toxicité peut être atténuée par le knockdown de p53 et retardée par la délétion de bax. [3]

La Cytarabine est très efficace contre les leucémies aiguës, ce qui provoque le blocage et la synchronisation caractéristiques G1/S, et augmente le temps de survie des rats Brown Norway leucémiques d'une manière faiblement liée à la dose, indiquant que l'utilisation de dosages plus élevés de ce composé ne contribue pas à son efficacité antileucémique chez l'homme. [4] Ce produit chimique provoque également un retard de croissance placentaire et augmente l'apoptose des cellules trophoblastiques placentaires dans la zone du labyrinthe placentaire des rates Slc:Wistar gestantes, qui augmente à partir de 3 heures après le traitement et culmine à 6 heures avant de revenir aux niveaux de contrôle à 48 heures, avec une protéine p53, des gènes cibles transcriptionnels de p53 tels que p21, cyclineG1 et fas et l'activité de la caspase-3 remarquablement améliorés. [5]

• Essai d'inhibition de la croissance in vitro

  La solution mère de Cytarabine est préparée dans de l'éthanol absolu, et des dilutions en série de ce composé sont préparées. Les cellules CCRF-CEM sont mises en suspension dans du milieu RPMI supplémenté avec 10% de FBS, 0,1% de gentamicine et 1% de pyruvate de sodium. Les cellules sont mises en suspension dans leurs milieux respectifs pour donner 10 mL de suspensions cellulaires à une densité finale de 3-6 × 10⁴ cellules/mL. Des volumes appropriés de cette solution chimique sont transférés aux suspensions cellulaires, et l'incubation est poursuivie pendant 72 heures. Les cellules sont centrifugées et remises en suspension dans un nouveau milieu sans ce composé , et les numérations cellulaires finales sont déterminées. Les données sont analysées par ajustement de courbe sigmoïde de la numération cellulaire en fonction de la concentration de ce produit chimique, et les résultats sont exprimés en IC50 (concentration de ce composé qui inhibe la croissance cellulaire à 50% de la valeur de contrôle).

• Lignées cellulaires

  Rat leukemic cell lines RCL/0, RO/1 and K7 and human myelomonocytic leukemic U937

• Concentrations

  ~100 μM

• Temps dincubation

  24, 48 and 72 hours

• Méthode

  Cells are incubated in the presence of different concentrations of Cytarabine at 37 °C for 24, 48, and 72 hours. At the time of 20-, 44-, or 68-hour incubation in the presence of this compound, 10 mL of cell proliferation reagent WST-1 solution is added. After 2- and 4-hour incubation with WST-1, cell metabolic activity is assessed with colorimetric changes quantified by measuring the absorbance in a spectrophotometer at 450 nm. And cell division times are calculated from eosin counting in parallel with viability assay

• Modèles animaux

  Brown Norway rat with myelocytic leukaemia

• Dosages

  5 - 1000 mg/kg

• Administration

  Injection i.v.