Fiche technique

Description biologique

Spécificité	CA19-9 Antibody [C17A13] détecte les niveaux endogènes de protéine CA 19-9.
Contexte	Le CA19-9 (antigène glucidique 19-9), également connu sous le nom de Sialyl Lewis A (sLeᵃ), est un antigène de groupe sanguin Lewis sialylé, un épitope glycanique tétrasaccharidique composé d'acide sialique, de galactose, de N-acétylglucosamine et de fucose, biosynthétisé via la voie du groupe sanguin Lewis et nécessitant un antigène Lewis fonctionnel pour sa formation. Le CA19-9 est exprimé sur les glycoprotéines et les glycolipides des membranes des cellules épithéliales, en particulier dans le pancréas, les voies biliaires, l'estomac et le côlon, et peut être libéré dans la circulation sanguine. C'est le biomarqueur sérique de référence actuel pour l'adénocarcinome pancréatique. Fonctionnellement, le CA19-9 sert de biomarqueur (pour le diagnostic, le pronostic, le suivi de la réponse au traitement et la détection des récidives), de prédicteur (en corrélation avec la charge tumorale, le stade et la résécabilité) et de promoteur de la progression du cancer en facilitant l'adhésion médiatisée par la E-sélectine, en améliorant l'angiogenèse, en modulant les réponses immunitaires et en influençant les interactions du microenvironnement tumoral. Au-delà du cancer du pancréas, le CA19-9 est élevé dans d'autres malignités gastro-intestinales et certaines maladies bénignes, et est à l'étude en tant que cible thérapeutique via des anticorps, des vaccins, des inhibiteurs de biosynthèse et des systèmes d'administration de médicaments guidés par le CA19-9.

Spécificité

CA19-9 Antibody [C17A13] détecte les niveaux endogènes de protéine CA 19-9.

Contexte

Le CA19-9 (antigène glucidique 19-9), également connu sous le nom de Sialyl Lewis A (sLeᵃ), est un antigène de groupe sanguin Lewis sialylé, un épitope glycanique tétrasaccharidique composé d'acide sialique, de galactose, de N-acétylglucosamine et de fucose, biosynthétisé via la voie du groupe sanguin Lewis et nécessitant un antigène Lewis fonctionnel pour sa formation. Le CA19-9 est exprimé sur les glycoprotéines et les glycolipides des membranes des cellules épithéliales, en particulier dans le pancréas, les voies biliaires, l'estomac et le côlon, et peut être libéré dans la circulation sanguine. C'est le biomarqueur sérique de référence actuel pour l'adénocarcinome pancréatique. Fonctionnellement, le CA19-9 sert de biomarqueur (pour le diagnostic, le pronostic, le suivi de la réponse au traitement et la détection des récidives), de prédicteur (en corrélation avec la charge tumorale, le stade et la résécabilité) et de promoteur de la progression du cancer en facilitant l'adhésion médiatisée par la E-sélectine, en améliorant l'angiogenèse, en modulant les réponses immunitaires et en influençant les interactions du microenvironnement tumoral. Au-delà du cancer du pancréas, le CA19-9 est élevé dans d'autres malignités gastro-intestinales et certaines maladies bénignes, et est à l'étude en tant que cible thérapeutique via des anticorps, des vaccins, des inhibiteurs de biosynthèse et des systèmes d'administration de médicaments guidés par le CA19-9.

Informations dutilisation

Application

IHC, FCM, ELISA

Dilution

IHC

1:100

Réactivité

Human

Source

Mouse Monoclonal Antibody

MW

Tampon de stockage

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

Stockage
(À partir de la date de réception)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

Méthodes expérimentales
IHC	Experimental Protocol： Deparaffinization/Rehydration 1. Deparaffinize/hydrate sections: 2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each. 3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each. 4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each. 5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each. 6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min. Staining 1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each. 2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min. 3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 4. Wash sections in wash buffer for 5 min. 5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature. 6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C. 7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each. 8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature. 9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each. 10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use. 11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity. 12. Immerse slides in dH2O. 13. If desired, counterstain sections with hematoxylin. 14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each. 16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

Méthodes expérimentales

IHC

Experimental Protocol：

Deparaffinization/Rehydration

1. Deparaffinize/hydrate sections:

2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.

3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.

4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.

5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.

6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.

Staining

1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.

2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.

3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

4. Wash sections in wash buffer for 5 min.

5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.

6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.

7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.

8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.

9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.

10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.

11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.

12. Immerse slides in dH2O.

13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.

14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.

16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

Références

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32827580/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30814526/

Données dapplication

IHC

Validé par Selleck

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human colorectal cancer tissue with F2466 at 1:100 dilution.