Bleomycin sulfate

Les cellules UT-SCC-12A et UT-SCC-12B sont toutes deux plus résistantes au Bleomycin sulfate avec une IC50 de 14,2 nM et 13 nM, respectivement. [1] Les macrophages alvéolaires incubés avec 0,01 μg/mL à 1μg/mL de ce composé pendant 18 heures sécrètent significativement plus de facteur de croissance des fibroblastes que les macrophages incubés sans ce produit chimique. Les macrophages stimulés par ce composé continuent à produire des quantités significatives de facteur de croissance des fibroblastes même après que ce produit chimique ait été retiré et remplacé par un milieu frais (sans Bleomycin sulfate). La sécrétion de facteur de croissance des fibroblastes par les macrophages alvéolaires stimulés par ce composé est inhibée par la cycloheximide, et les inhibiteurs de la 5-lipoxygénase NDGA (acide nordihydroguaïarétique) et BW755c, indiquant non seulement une exigence pour la synthèse protéique mais aussi pour les métabolites de la voie de la 5-lipoxygénase du métabolisme de l'acide arachidonique pour une expression complète de l'activité. [2] L'incubation avec ce produit chimique (400 µg/mL) pendant 24 heures diminue la viabilité des cellules NTera-2, et augmente les activités de la caspase-3, -8 et -9, les niveaux de Bax et de cytochrome c cytoplasmique et diminue les niveaux de Bcl-2. [3] En termes d'aberrations instables, l'effet clastogène de ce composé sur les cellules ADIPO-P2 persiste pendant au moins 10 jours après l'exposition. L'instabilité des télomères induite par ce produit chimique dans les cellules de mammifères persiste pendant plusieurs générations après l'exposition. De plus, l'apparition de fusions télomériques dans les cellules exposées à ce composé 10 jours après le traitement suggère que ce produit chimique peut induire une instabilité télomérique retardée. [4]

Au jour 7 post-Bleomycin sulfate, les cellules CD45+ dans le LBAf chez NOX-/- sont 1,7 fois > WT, dont 57% sont des Mf qui diminuent de 67% chez WT et de 83% chez NOX-/- au jour 21. [5]

• Lignées cellulaires

  ADIPO-P2 cells

• Concentrations

  2.5 μg/mL

• Temps dincubation

  30 minutes

• Méthode

  ADIPO-P2 cells are grown in D-MEM high glucose medium supplemented with 20% fetal calf serum, penicillin (100 U/mL) and streptomycin (100 μg/mL) at 37 °C and 5% CO₂ atmosphere. Cells are cultured as monolayer in TC25 Corning flasks containing 1.5 × 10⁵ cells/mL. For each experiment, two flasks are set up, one for the control and one for the treated culture. During the log phase of growth ADIPO-P2 cells are treated with a 30 minutes pulse of 2.5 μg/mL of Bleomycin sulfate. Control cultures are set up in parallel but not exposed to this compound. Time of exposure and concentration of this chemical are chosen according to previous studies carried out in our laboratory with mammalian cells exposed to it. At the end of the pulse treatment with this compound, the cells are washed twice with Hank's balanced salt solution and kept in culture with fresh culture medium until harvesting. Cells are continuously maintained in culture during 5 passages or subcultures after treatment. Subcultivation is carried out whenever the cultures became confluent (approximately 4 × 10⁵ cells/mL of culture medium). To estimate cell growth, at the time of subcultivation cells are collected by trypsinization, an aliquot of about 200 μL stained with 0.4% trypan blue, and the number of viable cells is determined. Cells are then suspended in fresh culture medium and dispensed into new culture flasks containing 1 × 10⁵ cells/mL to continue growing. The rest of the cells is discarded or dispensed in another flask for cytogenetic analysis, which is performed at 18 hours and 10 days after the end of treatments. To analyze chromosomal aberrations, colchicine (0.1 μg/mL) is added to cell cultures during the last 3 hours of culture. Chromosome preparations are made following standard procedures. After harvesting, cells are hypotonically shocked, fixed in methanol:acetic acid (3:1), spread onto glass slides and processed for PNA-FISH. Two independent experiments are carried out.

• Modèles animaux

  CD-1 mice

• Dosages

  5 mg/kg, 2 ml/kg

• Administration

  Administered via i.t.