Copanlisib (BAY 80-6946)

Dans les cellules KPL4 et les cellules PC3 stimulées par LPA, BAY 80-6946 réduit les niveaux de pAKT. Dans un sous-ensemble de lignées cellulaires cancéreuses humaines présentant des mutations PIK3CA et/ou une surexpression de HER2, BAY 80-6946 montre une activité antiproliférative et induit l'apoptose. [1] La combinaison de thérapies ciblant HER2 et BAY 80-6946 inhibe la croissance plus efficacement que chaque thérapie utilisée seule, et peut restaurer la sensibilité au trastuzumab et au lapatinib dans les cellules. [2]

Dans le modèle de xénogreffe tumorale de rat KPL4 ou HCT116, le BAY 80-6946 (6 mg/kg, i.v.) induit une régression tumorale complète à 100%. Chez les souris nues atteintes de NSCLC résistant à l'erlotinib Lu7860, dérivé de patient, et de modèles de tumeurs mammaires luminales dérivées de patient MAXF1398, le BAY 80-6946 (14 mg/kg, i.v.) provoque également une inhibition de la croissance tumorale. [1]

• Essais biochimiques de lipide kinase

  L'effet de BAY 80-6946 sur l'activité de PI3Kα, PI3Kβ et PI3Kγ est mesuré par l'inhibition de l'incorporation de ³³P dans le phosphatidylinositol (PI) dans des plaques MaxiSorp® de 384 puits revêtues de 2 µg/puits de PI et de phosphatidylsérine (PS) (rapport molaire 1:1). Dans chaque essai d'isoforme de PI3K, 9 µL de tampon de réaction (50 mM MOPSO, pH 7.0, 100 mM NaCl, 4 mM MgCl₂, 0,1% BSA) contenant 7,5 ng de protéine p110α ou p110β tronquée N-terminale marquée His, ou 25 ng de protéine p110γ humaine purifiée, sont utilisés. La réaction est démarrée en ajoutant 5 µL d'une solution d'ATP à 40 µM contenant 20 µCi/mL de [^{33>/sup>P]-ATP. Après 2 heures d'incubation à température ambiante, la réaction est arrêtée par l'ajout de 5 µL d'une solution d'EDTA à 25 mM. Les plaques sont lavées et un cocktail de scintillation Ultima Gold™ (25 µL) est ensuite ajouté. La radioactivité incorporée dans le substrat PI immobilisé est déterminée à l'aide d'un compteur à scintillation liquide BetaPlate.}

• Lignées cellulaires

  A series of cancer cell lines

• Concentrations

  ~5 μM

• Temps dincubation

  72 hours

• Méthode

  Cell proliferation over a 72-hour period is determined using the CellTiter-Glo® luminescent cell viability kit. Briefly, cells are plated in separate microtiter plates. Following an overnight incubation at 37ºC, luminescence values in the t=0 hour plates are determined. Test compounds diluted in growth medium are added to the t=72 hour plates, and the cells are then incubated for 72 hours at 37ºC. Luminescence values are determined with a Wallac 1420 Victor2™ 1420 multilabel HTS counter after a 10-minute reaction with CellTiter-Glo® solution. The percentage inhibition of cell growth is calculated by subtracting the luminescence values in the t=0 hour plates from the corresponding values in the t=72 hour plates. Differences in values between drug-treated cells and controls are used to determine the percentage inhibition of cell growth.

• Modèles animaux

  Rats bearing KPL4 or HCT116 xenografts

• Dosages

  6 mg/kg

• Administration

  i.v.