Tamoxifen Citrate

Le Tamoxifen Citrate présente un effet antitumoral dû à son activité anti-œstrogénique (ER). Les valeurs d'affinité apparente de ce composé pour l'ER varient entre 30 et 0,01 % de celles obtenues pour l'œstradiol, selon la source d'ER (espèce), la concentration en protéines et les conditions utilisées pour l'essai. La liaison de ce produit chimique à l'ER entraîne en outre une inhibition de l'expression des gènes régulés par les œstrogènes, y compris les facteurs de croissance et les facteurs angiogéniques sécrétés par la tumeur qui peuvent stimuler la croissance par des mécanismes autocrines ou paracrines. Il induit également directement la mort cellulaire programmée. [1] Ce composé produit un effet inhibiteur sur l'incorporation de [³H]thymidine et l'activité de l'ADN polymérase des cellules MCF-7, ainsi qu'une réduction du contenu en ADN des cultures et du nombre de cellules. Cet effet inhibiteur de ce produit chimique sur la croissance des cellules MCF-7 peut être facilement inversé par l'ajout d'œstradiol au milieu de culture. 2 et 6 μM de cet agent réduisent la proportion de cellules en phase S et augmentent le nombre de cellules en G1. À 10 μM, il provoque la mort cellulaire en 48 heures. [2] Ce composé inhibe la croissance de MCF-7 avec une IC50 d'environ 10 nM après 10 jours de traitement. Il inhibe l'activité activatrice du plasminogène de MCF-7 et supprime la stimulation de l'activité activatrice du plasminogène par l'œstradiol. Ce produit chimique provoque également des augmentations minimales des niveaux de récepteur de la progestérone cellulaire. [3] Il est capable d'inhiber la croissance des cellules cancéreuses de la prostate PC3, PC3-M et DU145 avec une IC50 allant de 5,5 à 10 μM, ce qui est lié à son inhibition de la protéine kinase C et à l'induction de p21(waf1/cip1). [4]

L'administration de Tamoxifen Citrate à des xénogreffes de MCF-7 à croissance rapide, stimulées par l'œstradiol, entraîne un retard ou un arrêt de la croissance tumorale dépendant de la dose en diminuant significativement la prolifération des cellules tumorales dans la tumeur. Le traitement par ce composé entraîne un ralentissement de la croissance tumorale (temps de doublement tumoral, 12 jours), une augmentation significative du temps de doublement potentiel de la tumeur (T_pot) (6,6 jours) et une diminution de l'indice de marquage (%LI) (à 8%) 23 jours après le traitement, par rapport aux souris non traitées qui montrent un temps de doublement du volume de 5 jours, un T_pot de 2,3 jours et un %LI de 23%. [5] Il possède non seulement des propriétés anti-œstrogéniques mais aussi œstrogéniques selon l'espèce, le tissu et le gène. Ce produit chimique présente des effets favorables sur les concentrations osseuses et lipidiques sériques et stimule l'endomètre. [1]

• Tests de liaison compétitive

  Les cellules sont récoltées à partir de flacons T de 150 cm², et le cytosol est préparé à une concentration en protéines d'environ 2 mg/mL dans un tampon phosphate. Des aliquotes de ce surnageant de 180 000 ×g sont ensuite incubées avec différentes concentrations de ce composé et 2,5 nM de [³H]œstradiol pendant 16 heures à 0-4 ℃. Les stéroïdes libres sont absorbés par du dextran-charbon [10 μL de 0,5% de Dextran C-5% de Norite A dans un tampon TE] pendant 1 heure à 0 ℃, et les aliquotes sont comptées après centrifugation à 800 ×g, 30 min. La capacité de liaison relative de chaque compétiteur est prise comme le rapport de la concentration d'œstradiol radio-inerte/compétiteur requise pour inhiber la moitié de la liaison spécifique de [³H]œstradiol, l'affinité de l'œstradiol étant fixée à 100%.

• Lignées cellulaires

  Human breast cancer cells MCF-7

• Concentrations

  ~1 μM

• Temps dincubation

  10 days

• Méthode

  MCF-7 cells are seeded into T-25 flasks (1.5×10⁵ cells/flask) and grown for 2 days in the MEM supplemented with 10 mM HEPES buffer, gentamicin (50 μg/mL), penicillin (100 units/mL), streptomycin (0.1 mg/mL), bovine insulin (6 ng/mL), hydrocortisone (3.75 ng/mL), and 5% calf serum that has been treated with dextran-coated charcoal for 45 min at 55 ℃ to remove endogenous hormones. The medium is then changed to MEM supplemented as described above, except that it contains 2% charcoal dextran-treated calf serum and various concentrations of this compound. At the end of incubation, cell numbers are counted.

• Modèles animaux

  Human breast carcinoma xenografts MCF-7

• Dosages

  2 cm Tamoxifen capsules

• Administration

  Subcutaneous implantation