PIK-75 HCl

N° de catalogueS1205 Lot:S120501

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Données techniques

Formule

C16H14BrN5O4S.HCl
Poids moléculaire 488.74 N° CAS 372196-77-5
Solubilité (25°C)* In vitro DMSO 98 mg/mL (200.51 mM)
Ethanol 9 mg/mL (18.41 mM)
Water Insoluble
In Vivo (Ajoutez les solvants au produit individuellement et dans lordre.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml signifie légèrement soluble ou insoluble.
* Veuillez noter que Selleck teste la solubilité de tous les composés en interne, et la solubilité réelle peut différer légèrement des valeurs publiées. Ceci est normal et est dû à de légères variations dun lot à lautre.
* Expédition à température ambiante (les tests de stabilité montrent que ce produit peut être expédié sans aucune mesure de refroidissement.)

Préparation des solutions mères

Activité biologique

Description Le PIK-75 HCl est un inhibiteur de p110α avec une IC50 de 5,8 nM (200 fois plus puissant que p110β), des mutants spécifiques d'isoforme au niveau de Ser773, et inhibe également puissamment DNA-PK avec une IC50 de 2 nM dans les tests sans cellules.
Cibles
DNA-PK
(Cell-free assay)		 p110α
(Cell-free assay)		 p110γ
(Cell-free assay)		 p110δ
(Cell-free assay)
2 nM 5.8 nM 76 nM 0.51 μM
In vitro Le PIK-75 montre une puissance et une sélectivité d'isoforme impressionnantes pour p110α, tandis que les valeurs d'IC50 correspondantes sont de 1300 nM, 76 nM et 510 nM pour les autres isoformes de PI3K, p110β, -γ et -δ, respectivement. De plus, lors de la liaison à la p110α purifiée, le PIK-75 est un inhibiteur non compétitif vis-à-vis de l'ATP avec un Ki de 36 nM et compétitif vis-à-vis du substrat PI avec un Ki de 2,3 nM. Le PIK-75 montre également une puissante inhibition de DNA-PK. Le PIK-75 (1 μM) réduit la survie cellulaire en diminuant significativement l'activité mitochondriale dans les cellules musculaires lisses des voies respiratoires non asthmatiques non stimulées (ASM), les cellules ASM asthmatiques et les fibroblastes pulmonaires. Tandis que dans les cellules ASM stimulées par le TGFβ, le PIK75 ne diminue l'activité mitochondriale que dans les cellules asthmatiques, sans effets dans les cellules non asthmatiques. Une étude récente montre que le PIK-75 (10 nM) inhibe l'expression de l'ARNm de CD38 induite par le TNF-α et atténue significativement l'activité de l'ADP-ribosyl cyclase induite par le TNF-α dans les cellules musculaires lisses des voies respiratoires humaines.
In Vivo Dans le modèle tumoral ErbB3WT, le PIK-75 réduit la réponse chimiotactique in vitro à HRGβ1 et diminue les niveaux de pAkt de 40%. De plus, le PIK-75 réduit significativement la motilité des cellules tumorales et l'invasion in vivo dans les tumeurs primaires ErbB3WT. Chez les souris mâles CD1, le PIK-75 entraîne de graves altérations dans le test de tolérance à l'insuline (ITT) et le test de tolérance au glucose (GTT), ainsi qu'une augmentation de la production de glucose lors d'un test de tolérance au pyruvate (PTT).
Caractéristiques Inhibiteur de PI3K et DNA-PK.

Protocole (de référence)

Test kinase :[1]
  • Tests d'inhibition

    L'inhibiteur de PI3K PIK-75 est dissous à 10 mM dans du diméthylsulfoxyde et stocké à −20°C jusqu'à utilisation. L'activité enzymatique de PI3K est déterminée dans 50 μL de 20 mM HEPES, pH 7,5, et 5 mM MgCl2 contenant 180 μM de phosphatidylinositol, la réaction étant démarrée par l'ajout de 100 μM d'ATP (contenant 2,5 μCi de [γ-32P]ATP). Après une incubation de 30 minutes à température ambiante, la réaction enzymatique est arrêtée par l'ajout de 50 μL de HCl 1 M. Les phospholipides sont ensuite extraits avec 100 μL de chloroforme/méthanol [1:1 (v/v)] et 250 μL de KCl 2 M, suivis d'un comptage par scintillation liquide. Les inhibiteurs sont dilués dans 20 % (v/v) de diméthylsulfoxyde pour générer une courbe de concentration en fonction de l'inhibition de l'activité enzymatique, qui est ensuite analysée à l'aide de Prism version 5.00 pour Windows afin de calculer l'IC50. Pour l'analyse cinétique, un essai luminescent mesurant la consommation d'ATP est utilisé. L'activité enzymatique de PI3K est déterminée dans 50 μL de 20 mM HEPES, pH 7,5, et 5 mM MgCl2 avec PI et ATP à diverses concentrations. Après une incubation de 60 minutes à température ambiante, la réaction est arrêtée par l'ajout de 50 μL de Kinase-Glo, suivi d'une incubation supplémentaire de 15 minutes. La luminescence est ensuite lue à l'aide d'un lecteur de plaques Fluostar. Les résultats sont analysés à l'aide de Prism.
Test cellulaire :[3]
  • Lignées cellulaires

    A2780, A2780/cp70, 2780AD, HCT116, HT29, WIL, CALU-3, MCF7, PC3 and HS852 cells

  • Concentrations

    0-10 μM

  • Temps dincubation

    48 hours

  • Méthode

    Mitochondrial activity is assessed after stimulation with TGFβ with or without inhibitors for 48 hours using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium (MTT) assay. Harvested washed cells are resuspended in DMEM-lO% FCS and aliquoted (500 μL) into 24-well cluster plates prior to serial dilution (1:2) in duplicates. To each well, 100 μL of an appropriate MTT concentration (dissolved in PBS and filtered through a 0.2 μm filter before use to remove any blue formazan product) is added immediately after diluting the cells, which are then incubated for 3.5 hours at 37 °C. The resulting blue formazan product is solubilized overnight (16 hours) at 37 °C by the addition of 500 μL of 10% sodium dodecyl sulfate　(SDS) in 0.01 M HCl to each well. A sample (150　μL)　from each duplicate well is transferred to a 96-well　microplate, and the optical density determinedby automated spectrophotometry against a reagent blank (no　cells).　Absorbance is measured at a test wavelength of 570 nm and a reference wavelength of 690 nm. For each primary cell culture, results from three to six wells from each treatment are averaged, and data are expressed as absorbance 570 to 690 nm.
Étude animale :[5]
  • Modèles animaux

    MTLn3 cells are injected into the right fourth mammary fat pad from the head of female severe-combined immunodeficient/NCr mice.

  • Dosages

    ≤1 μM

  • Administration

    Administered via i.p.

Références

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21778304/
  • #
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21349933/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22556157/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21725367/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22142257/

Validation du produit par le client

A549 cells were treated with DMSO or PIK-75 (200 nM) for 1 h and subsequently stimulated with izTRAIL for 24 h. Long-term survival was visualized after 7 days by crystal violet staining. One of two independent experiments is shown.

Données de [ Cell Death Differ , 2014 , 21(3), 491-502 ]

A549 cells were treated with PIK-75 (100 nM) or SNS-032 (300 nM) for the indicated times. Cells were lysed and subjected to western blotting. One representative of two independent experiments is shown.

Données de [ Cell Death Differ , 2014 , 21(3), 491-502 ]

DW compounds dose-dependently and persistently blocked the PI3K/mTOR signaling pathway in RH30 cells. DW09849 persistently inhibited PI3K signaling. RH30 cells treated with 0.1 uM DW09849 or PIK-75 were harvested at indicated times (0, 0.25, 0.75, 1.5, 3, 6, 12, and 24 hours). Western blot analyses were conducted to detect the indicated proteins. Data shown are representative of three independent experiments. Con, concentration.

Données de [ J Pharmacol Exp Ther , 2014 , 348(3), 432-41 ]

<p>Knockdown of BRCA1 sensitizes cells to PI3K/AKT pathway inhibitors. MCF7 cells transfected with either BRCA1-siRNA or control-siRNA were treated with increasing amounts of inhibitors targeting the PI3K/AKT pathway for 48 h in triplicate. Viable cells were measured by MTT assay.</p>

Données de [ Mol Carcinog , 2012 , 52, 667-75 ]

De Selleck PIK-75 HCl A été cité par 46 Publications

Lysosomal PIP3 revealed by genetically encoded lipid biosensors [ Proc Natl Acad Sci U S A, 2025, 122(13):e2426929122] PubMed: 40127277
The mevalonate pathway contributes to breast primary tumorigenesis and lung metastasis [ Mol Oncol, 2024, 10.1002/1878-0261.13716] PubMed: 39119789
PIK Your Poison: The Effects of Combining PI3K and CDK Inhibitors against Metastatic Cutaneous Squamous Cell Carcinoma In Vitro [ Cancers (Basel), 2024, 16(2)370] PubMed: 38254859
Pharmacological Targeting of Androgen Receptor Elicits Context-Specific Effects in Estrogen Receptor-Positive Breast Cancer [ Cancer Res, 2023, 83(3):456-470] PubMed: 36469363
MDM2 antagonists promote CRISPR/Cas9-mediated precise genome editing in sheep primary cells [ Mol Ther Nucleic Acids, 2023, 31:309-323] PubMed: 36726409
Reciprocal regulation of Daxx and PIK3CA promotes colorectal cancer cell growth [ Cell Mol Life Sci, 2022, 79(7):367] PubMed: 35718818
The Lectin LecB Induces Patches with Basolateral Characteristics at the Apical Membrane to Promote Pseudomonas aeruginosa Host Cell Invasion [ mBio, 2022, 13(3):e0081922] PubMed: 35491830
PIK-75 overcomes venetoclax resistance via blocking PI3K-AKT signaling and MCL-1 expression in mantle cell lymphoma [ Am J Cancer Res, 2022, 12(3):1102-1115] PubMed: 35411248
Identification of New Vulnerabilities in Conjunctival Melanoma Using Image-Based High Content Drug Screening [ Cancers (Basel), 2022, 14(6)1575] PubMed: 35326726
Isthmin-1 is an adipokine that promotes glucose uptake and improves glucose tolerance and hepatic steatosis [ Cell Metab, 2021, S1550-4131(21)00326-0] PubMed: 34348115

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