PHA-665752

N° de catalogueS1070 Lot:S107005

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Données techniques

Formule

C32H34Cl2N4O4S
Poids moléculaire 641.61 N° CAS 477575-56-7
Solubilité (25°C)* In vitro DMSO 128 mg/mL (199.49 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In Vivo (Ajoutez les solvants au produit individuellement et dans lordre.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml signifie légèrement soluble ou insoluble.
* Veuillez noter que Selleck teste la solubilité de tous les composés en interne, et la solubilité réelle peut différer légèrement des valeurs publiées. Ceci est normal et est dû à de légères variations dun lot à lautre.
* Expédition à température ambiante (les tests de stabilité montrent que ce produit peut être expédié sans aucune mesure de refroidissement.)

Préparation des solutions mères

Activité biologique

Description Le PHA-665752 est un inhibiteur de c-Met puissant, sélectif et ATP-compétitif avec une IC50 de 9 nM dans les tests sans cellules, avec une sélectivité >50 fois supérieure pour c-Met que pour les RTK ou les STK.
Cibles
c-Met
(Cell-free assay)		 RON
(Cell-free assay)		 Flk1
(Cell-free assay)
9 nM 68 nM 200 nM
In vitro Le PHA-665752 inhibe significativement l'activité de la kinase c-Met avec un Ki de 4 nM, et présente une sélectivité >50 fois supérieure pour c-Met par rapport à diverses kinases tyrosine et sérine-thréonine. Ce composé inhibe puissamment l'autophosphorylation de c-Met stimulée par le HGF avec une IC50 de 25-50 nM. Il bloque également significativement les fonctions dépendantes du HGF et de c-Met telles que la motilité et la prolifération cellulaires avec des IC50 de 40-50 nM et 18-42 nM, respectivement. De plus, cette substance chimique inhibe puissamment la phosphorylation stimulée par le HGF ou constitutive des médiateurs en aval de c-Met tels que Gab-1, ERK, Akt, STAT3, PLC-γ et FAK dans de multiples lignées de cellules tumorales. Il inhibe la croissance cellulaire dans les cellules BaF3 transformées par TPR-MET avec une IC50 de <60 nM, et inhibe la motilité et la migration cellulaires constitutives de 92,5% à 0,2 μM. L'inhibition de c-Met par ce composé (0,2 μM) induit également une apoptose cellulaire de 33,1% et un arrêt du cycle cellulaire en G1 avec une augmentation des cellules en phase G1 de 42,4% à 77,0%. Il peut coopérer avec la rapamycine pour inhiber la croissance cellulaire des cellules BaF3 transformées par TPR-MET et des cellules H441 de cancer du poumon non à petites cellules.
In Vivo L'administration de PHA-665752 induit une inhibition dose-dépendante de la croissance tumorale des xénogreffes S114 de 20%, 39% et 68%, à des doses de 7,5, 15 et 30 mg/kg/jour, respectivement. Le traitement par ce composé réduit significativement la croissance tumorale des NCI-H69, NCI-H441 et A549 dans les xénogreffes de souris de 99%, 75% et 59%, respectivement. Il inhibe également significativement l'angiogenèse de >85%, en diminuant la production de facteur de croissance endothélial vasculaire et en augmentant la production de l'inhibiteur de l'angiogenèse thrombospondine-1.

Protocole (de référence)

Test kinase :[1]
  • Essai enzymatique in vitro

    La protéine de fusion GST du domaine kinase de c-Met est utilisée pour l'essai c-Met. La valeur IC50 de PHA-665752 pour l'inhibition de c-Met est basée sur la phosphorylation de substrats peptidiques kinase ou de poly-glu-tyr en présence d'ATP et de cations divalents (MgCl2 ou MnCl2 10-20 mM). La plage linéaire (c'est-à-dire la période de temps pendant laquelle le taux reste équivalent au taux initial) est déterminée pour c-Met, et la mesure cinétique et la détermination de l'IC50 sont effectuées dans cette plage.
Test cellulaire :[1]
  • Lignées cellulaires

    S114, GTL-16, NCI-H441, and BxPC-3

  • Concentrations

    Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM

  • Temps dincubation

    18, or 72 hours

  • Méthode

    For proliferation assays, cells are grown in medium with 0.1% FBS for 48 hours after which they are treated with various concentrations of PHA-665752 in HGF (50 ng/mL) in a medium containing 2% FBS. After 18 hours, cells are incubated with BrdUrd for 1 hour, fixed, and stained with anti-BrdUrd peroxidase-conjugated antibody, and plates are read at 630 nm. For apoptosis assays, cells are grown in medium with 2% FBS in presence and absence of HGF (50 ng/mL) and various concentrations of this compound for 72 hours. After 72 hours, a mixture containing ethidium bromide and acridine orange is added, and apoptotic cells (bright orange cells or cell fragments) are counted by fluorescence microscopy.
Étude animale :[1]
  • Modèles animaux

    Female athymic mice (nu/nu) bearing S114 or GTL-16 tumor xenografts

  • Dosages

    ~30 mg/kg/day

  • Administration

    Injection via bolus i.v.

Références

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14612533/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15788682/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17440059/

Validation du produit par le client

A, representative Western blot analyses of samples obtained from NSCLC cells exposed to 1 umol/L erlotinib or PHA-665,752 for 6 hours. Levels of total and phosphorylated forms of EGFR, MET, and HER3. B, representative Western blot analyses of samples obtained as described in A showing the levels of EGFR downstream signaling mediators. Protein samples obtained from untreated and treated cells were separated by SDS-PAGE and immunoblotted with each antibody. Tubulin served to ensure equal loading.

Données de [ Clin Cancer Res , 2014 , 20, 4806-15 ]

A, SCID mice bearing established HCC827/GR tumor cell xenografts were treated with each drug. The length and width of the tumors were measured at the days indicated and tumor volumes were calculated. The bars represent mean tumor volume ?SD. B, immunohistochemical staining for Ki-67 and TUNEL, as described in Materials and Methods. Quantitative data for proliferation and apoptotic indices are shown as Ki-67+ cells (left) and TUNEL+ cells (right). *, P < 0.01 and **, P < 0.001 for the combination of gefitinib plus NPS-1034 or gefitinib plus PHA-665752 versus either the control or drug alone.

Données de [ Cancer Res , 2014 , 74, 253-62 ]

PHA-665752 increases the radiosensitivity and reverses the radioresistance induced by HGF in NPC cells. Radiosensitization induced by PHA-665752 is accompanied by the persistence of the c-H2AX foci. Representative immunofluorescence micrographs of the c-H2AX foci formation in PHA-665752 (1 uM), HGF (20 ng/ml), IR and their combination groups. The micrographs were taken at x 400 magnification.

Données de [ Biochem Biophys Res Commun , 2014 , 449(1), 49-54 ]

Radiosensitization induced by PHA-665752 is accompanied by the persistence of the γ-H2AX foci. (Top) Representative immunofluorescence micrographs of the γ-H2AX foci formation in PHA-665752 (1 uM), HGF (20 ng/ml), IR and their combination groups. The micrographs were taken at x400 magnification. (Bottom) The median number of the γ-H2AX foci per cell. The bars indicate the SD. ∗P < 0.01 compared with the IR alone group.

Données de [ Biochem Biophys Res Commun , 2014 , 449, 49-54 ]

De Selleck PHA-665752 A été cité par 100 Publications

Inhibition of TFF3 synergizes with c-MET inhibitors to decrease the CSC-like phenotype and metastatic burden in ER+HER2+ mammary carcinoma [ Cell Death Dis, 2025, 16(1):76] PubMed: 39920140
Macrophage Subpopulation Promotes Skeletal Muscle Regeneration Through HGF/MET Signaling-Mediated Skeletal Muscle Stem Cell Proliferation [ Aging Cell, 2025, e70042.] PubMed: 40132988
Overcoming MET-targeted drug resistance in MET-amplified lung cancer by aurora kinase B inhibition [ Biochim Biophys Acta Mol Cell Res, 2025, 1872(7):120001] PubMed: 40499687
MET receptor serves as a promising target in melanoma brain metastases [ Acta Neuropathol, 2024, 147(1):44] PubMed: 38386085
LncRNA CHROMR/miR-27b-3p/MET axis promotes the proliferation, invasion, and contributes to rituximab resistance in diffuse large B-cell lymphoma [ J Biol Chem, 2024, 300(3):105762] PubMed: 38367665
Single targeting of MET in EGFR-mutated and MET-amplified non-small cell lung cancer [ Br J Cancer, 2023, 128(12):2186-2196] PubMed: 37059804
Cancer-Associated Fibroblasts Promote Radioresistance of Breast Cancer Cells via the HGF/c-Met Signaling Pathway [ Int J Radiat Oncol Biol Phys, 2023, 116(3):640-654] PubMed: 36586496
MET Receptor Tyrosine Kinase Inhibition Reduces Interferon-Gamma (IFN-γ)-Stimulated PD-L1 Expression through the STAT3 Pathway in Melanoma Cells [ Cancers (Basel), 2023, 15(13)3408] PubMed: 37444518
Cabozantinib inhibits HBV-RNA transcription by decreasing STAT3 binding to the enhancer region of cccDNA [ Hepatol Commun, 2023, 10.1097/HC9.0000000000000313] PubMed: 37938099
Dual-targeting therapy against HER3/MET in human colorectal cancers [ Cancer Med, 2023, 10.1002/cam4.5673] PubMed: 36751113

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