NVP-ADW742

Le NVP-ADW742 présente une sélectivité 6 fois supérieure pour l'IGF-1R par rapport à l'InsR avec une IC50 de 2,8 μM ; une activité inhibitrice minimale contre c-Kit, HER1, PDGFR, VEGFR2 ou Bcr-Abl p210 avec une IC50 supérieure à 5 μM. Ce composé inhibe significativement la prolifération cellulaire stimulée par le sérum dans une variété de lignées de cellules tumorales de manière dose-dépendante, avec des valeurs d'IC50 de 0,1-0,5 μM pour les lignées de cellules de myélome multiple (MM), et les effets antitumoraux sur les cellules MM ne peuvent pas être surmontés par la coculture avec des cellules souches de la moelle osseuse. Il annule également la réactivité des cellules tumorales à l'IL-6 en présence de sérum. De plus, cette substance chimique est active contre les lignées cellulaires de MM résistantes aux agents anticancéreux conventionnels (chimiothérapie cytotoxique) ou expérimentaux (CC-5013, TRAIL/Apo2L, PS-341), ainsi que contre les cellules tumorales primaires de patients atteints de MM avec une maladie multirésistante. Ce composé diminue la production de VEGF par les cellules tumorales et les cellules stromales de la moelle osseuse, et supprime la sécrétion de VEGF induite par l'IGF-1 par divers types de tumeurs tels que les cellules de cancer de la thyroïde ou les cellules de MM. L'inhibition de l'IGF-1R par ce composé (0,75 μM) sensibilise les cellules de MM ou les cellules de cancer de la prostate à d'autres agents anticancéreux tels que la doxorubicine, le TRAIL/Apo2L ou le PS-341. [1]

L'administration de NVP-ADW742 à 10 mg/kg deux fois par jour inhibe significativement la croissance tumorale, prolonge la survie et améliore l'effet antitumoral de la chimiothérapie cytotoxique dans le modèle murin de MM diffus. [1]

• Essai d'activité de la kinase cellulaire

  La valeur IC50 de l'effet de NVP-ADW742 sur l'autophosphorylation de l'IGF-1R est déterminée au niveau cellulaire en présence de concentrations croissantes de ce composé, en utilisant des tests « Capture ELISAs » à 96 puits. Brièvement, les cellules NWT-21 sont ensemencées dans des plaques de culture tissulaire à 96 puits dans un milieu de croissance complet et cultivées jusqu'à 70-80% de confluence, puis privées de sérum pendant 24 heures dans un milieu à 0,5% de FCS. Par la suite, les cellules sont incubées pendant 90 minutes en présence de cet inhibiteur, suivies d'une stimulation par l'IGF-I (10 ng/mL) pendant 10 minutes à 37 °C. Ensuite, les cellules sont lavées deux fois avec du PBS glacé et lysées à 4 °C avec 50 μL/puits de tampon RIPA (50 mM Tris-HCl, pH 7,2, 120 mM NaCl, 1 mM EDTA, 6 mM EGTA, 1% NP-40, 20 mM NaF, 1 mM benzamidine, 15 mM pyrophosphate de sodium, 1 mM PMSF et 0,5 mM Na₃VO₄). Les lysats de chaque expérience sont ensuite transférés dans des plaques ELISA noires pré-enduites d'anticorps de capture spécifiques de l'IGF-1R. Après capture par les anticorps, les lysats sont mélangés avec 40 μL d'un anticorps anti-phosphotyrosine marqué à la phosphatase alcaline (AP) (PY20(AP) dilué à 0,2 μg/mL dans du tampon RIPA, et incubés une nuit à 4 °C. Après lavage (PBST) et incubation pendant 45 minutes à température ambiante avec le substrat AP luminescent CDPStar RTU avec Emerald II (90 μL/puits), la luminescence est mesurée à l'aide d'un compteur de scintillation Packard Top Count.

• Lignées cellulaires

  MM-1S, MM-1R, RPMI-8226/S, OPM-1, OCI-My5, SKMM2, KMS-12-BM, XG-1, L363, S6B45 cells and et al.

• Concentrations

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~ 10 μM

• Temps dincubation

  48 hours

• Méthode

  Cells are exposed to various concentrations of NVP-ADW742 for 48 hours in the presence or absence of serum. Cell survival is examined using MTT assay.

• Modèles animaux

  Male SCID/NOD mice injected i.v. with MM-1S-Luc⁺ human MM cells

• Dosages

  10 mg/kg twice daily

• Administration

  Injection i.p. or oral gavage