Mycophenolate mofetil

Mycophenolate mofetil est un promédicament ester de l'acide mycophénolique (MPA), un immunosuppresseur actif. Ce dernier présente une activité inhibitrice non compétitive, sélective et réversible contre l'inosine monophosphate déshydrogénase de type I/II avec des IC50 de 39 nM et 27 nM, respectivement. De plus, le MPA produit également une inhibition concentration-dépendante de la prolifération des lymphocytes T stimulés par la ConA, des lymphocytes B stimulés par le LPS et des lymphocytes T spécifiques aux alloantigènes avec des IC50 de 100 nM, 120 nM et 51 nM, respectivement. [1] Ce composé à une concentration élevée de 10 μg/mL induit une forte Apoptosis dans les cultures de cellules microgliales et augmente le nombre de cellules apoptotiques immunoreactives à la caspase-3 activée. De plus, il (1 μg/mL) inhibe fortement la prolifération des cellules microgliales et des astrocytes. [2] Une étude récente montre que cette substance chimique atténue significativement l'étendue de la mort des cellules neuronales des cultures de tranches hippocampiques organotypiques après une lésion neuronale de manière dépendante du temps. [4]

Dans un modèle de transplantation cardiaque hétérotopique de rat ACI-à-Lewis, le traitement avec Mycophenolate mofetil à des doses de 20 mg/kg et 40 mg/kg conduit à une prolongation de la survie du greffon, avec un temps de survie médian (MST) de 14,5 jours et 18,5 jours, respectivement. [1] Dans un modèle murin de sclérodermie induite par la bléomycine (BLM), ce composé réduit l'infiltration de cellules inflammatoires, la teneur en hydroxyproline tissulaire et l'épaisseur dermique. [3]

• Activité enzymatique des IMP dehydrogenase de type I et II

  Les IMP dehydrogenase de type I et II sont purifiées à partir d'E. coli exprimant les enzymes humaines. Le test est effectué à l'aide d'une plaque à 96 puits à fond plat, transparente aux UV. Le mélange réactionnel final de 200 μL contenait 0,1 M Tris, 0,1 M KCl, 3 mM EDTA pH 8,0, 2 mM DTT et 40 nM d'IMP dehydrogenase de type I ou de type II. La réaction est initiée par l'ajout de 400 μM NAD et 400 μM IMP, suivi d'une incubation à 37 °C pendant 2,5 heures. La vitesse de réaction de la conversion du NAD en NADH est ensuite mesurée en fonction de l'augmentation de l'absorbance à 340 nm. Les tests sont également effectués en présence de 50 % de sérum humain pour estimer la liaison aux protéines sériques par différents inhibiteurs d'IMP dehydrogenase.

• Lignées cellulaires

  ConA-stimulated T cells and LPS-stimulated B cells

• Concentrations

  0 to 10 μM

• Temps dincubation

  48 hours

• Méthode

  The spleens of male Lewis rats aged 8 weeks are aseptically removed and teased into single-cell suspensions, and the resulting splenocytes are suspended in RPMI1640 medium containing 10% fetal calf serum, 100 U/mL penicillin, and 100 μg/mL streptomycin. Assays are performed in flat-bottomed microtiter plates, with each well containing 150000 splenocytes in a total volume of 100 μL. Splenocytes are incubated in medium containing either 1 μg/mL Concanavalin A (ConA) or lipopolysaccharide (LPS) as T or B cell mitogen, respectively, along with various concentrations of this compound at 37 °C for 48 hours in a humidified atmosphere of 5% CO₂-95% air. During the final 6 hours of incubation, cells are pulsed with 1 μCi of ³H-thymidine/well, and harvested onto pressed fiberglass in a cell harvester. The uptake of ³H-thymidine by proliferating cells is measured using a liquid scintillation counter. The in vitro immune response of alloantigen-specific T cells is evaluated as a proliferation response using one-way mixed lymphocyte reaction assay. Mesenteric lymph nodes cells from male Lewis rats aged 8 weeks and splenocytes from male ACI rats aged 8 weeks are used as responder and stimulator cells, respectively. Single-cell suspensions are prepared, and the responder cells are cultured with irradiated (20 Gy) stimulator cells in RPMI1640 supplemented with 10% fetal calf serum, 100 U/mL penicillin and 100 μg/mL streptomycin, in 96-well plates (U-bottom) and in the presence of various concentrations of this compound (total volume: 200 μL, 37 °C, 5% CO₂ humidified atmosphere, 72 hours). As a negative control, responder cells are cultured with irradiated splenocytes of Lewis rats. The cell proliferation is quantified by the uptake of ³H-thymidine.

• Modèles animaux

  Lewis rats with abdominal vascularized heterotopic cardiac transplantation.

• Dosages

  ≤40 mg/kg

• Administration

  oral administration