Mubritinib (TAK 165)

Le Mubritinib (TAK 165) présente une sélectivité > 4000 fois supérieure à celle des autres tyrosine kinases, telles que EGFR, FGFR, PDGFR, Jak1, Src et Blk. Même à une faible concentration de 0,1 µM, il bloque significativement la phosphorylation de HER2, entraînant une régulation négative de la voie PI3K-Akt et MAPK dans la lignée cellulaire BT474 avec un niveau élevé de HER2. Ce composé présente non seulement un effet antiprolifératif très puissant dans la lignée cellulaire cancéreuse BT474 surexprimant ErbB2 avec une IC50 de 5 nM, mais aussi des effets antiprolifératifs marqués dans les lignées cellulaires exprimant faiblement HER2 avec une IC50 de 53 nM, 90 nM et 91 nM pour LNCaP, LN-REC4 et T24, respectivement. Il ne présente aucune activité inhibitrice contre les cellules PC-3 exprimant très faiblement HER2 avec une IC50 de 4,62 µM, ainsi que les lignées cellulaires HT1376 et ACHN surexprimant EGFR avec une IC50 de >25 µM. [1]

Mubritinib (TAK 165) inhibe significativement la xénogreffe LN-REC4 avec un rapport volume tumoral traité/contrôle de 26,5%. Bien qu'inefficace pour inhiber la croissance des cellules UMUC-3 et ACHN in vitro (IC50 de 1,812 et >25 µM, respectivement), l'administration orale de ce composé (10 ou 20 mg/kg par jour) inhibe significativement la croissance des xénogreffes UMUC-3 et ACHN avec un rapport volume tumoral traité/contrôle de 22,9% et 26%, respectivement, par rapport à 20 mg/kg qui est inefficace pour la croissance tumorale UMUC-3. [1]

• Inhibition de l'activité tyrosine kinase de HER2/erbB2

  Les cellules BT-474 sont ensemencées dans des plaques à 24 puits et cultivées pendant une nuit. Mubritinib (TAK 165) est ensuite ajouté à diverses concentrations. Après une incubation de 2 heures, les cellules sont récoltées directement dans un tampon d'échantillon de dodécylsulfate de sodium (SDS) (200 μL). Des aliquotes contenant des quantités égales d'extrait cellulaire total sont exécutées sur une électrophorèse sur gel de polyacrylamide (PAGE) à gradient de 7,5% à 15% SDS. Après électrophorèse, les protéines sont transférées sur une membrane de fluorure de polyvinylidène (PVDF) pour une analyse par Western Blot à l'aide d'un anticorps primaire pertinent. La détection des protéines est réalisée par une méthode de détection par chimioluminescence améliorée (ECL). L'étendue de la phosphorylation de la tyrosine de HER2/erbB2 est mesurée par l'analyseur d'images lumino LAS-1000 plus. La concentration de ce composé qui inhibe la phosphorylation de HER2/erbB2 de 50% (IC50) est calculée à partir d'une courbe dose-réponse générée par régression linéaire des moindres carrés de la réponse à l'aide du logiciel SAS.

• Lignées cellulaires

  BT474, HT1376, UMUC-3, T24, ACHN, DU-145, PC-3, LN-REC4, and LNCaP cells

• Concentrations

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~50 mM

• Temps dincubation

  72 hours

• Méthode

  Mubritinib (TAK 165) is added at various concentrations after cells are seeded into 6-well plates and cultured overnight, and the cells are treated continuously for 72 hours. After the incubation period, cells are counted for the measurement of antiproliferative activity.

• Modèles animaux

  Athymic nude mice (BALB/c nu/nμ) and SCID mice (C.B.-17 Scid/Scid) are implanted subcutaneously with UMUC-3, LN-REC4 or ACHN cells

• Dosages

  10 or 20 mg/kg/day

• Administration

  Orally twice daily