Clemastine (HS-592) Fumarate

Le fumarate de Clemastine inhibe l'augmentation de [Ca²⁺]_i induite par l'histamine dans les cellules HL-60 avec une IC50 de 3 nM, comparé à la chlorphéniramine ou la diphenhydramine avec des valeurs d'IC50 de 20 nM et 100 nM, respectivement. [1]

À des concentrations ≥25 μM, le fumarate de Clemastine bloque significativement les réactions NK et ADCC des lymphocytes contre la lignée cellulaire d'érythroleucémie humaine K562 et la lignée cellulaire de lymphoblastes B humains SB, respectivement. [2]

Le fumarate de Clemastine inhibe la contraction de l'iléon de cobaye induite par l'histamine avec une IC50 de 231 nM. [3]

Le fumarate de Clemastine inhibe puissamment le canal HERG K⁺ de manière concentration-dépendante dans les cellules HEK 293 exprimant stablement les canaux HERG avec une IC50 de 12 nM, ce qui peut être atténué par la mutation Y652A ou F656A de HERG. [4]

Le fumarate de Clemastine potentialise significativement l'augmentation de [Ca²⁺]_i induite par l'ATP dans les cellules HEKhP2X7, ne dépendant pas du blocage du Histamine Receptor mais de la sensibilisation du récepteur P2X7 de manière concentration-dépendante avec une EC50 de 10 μM, et augmente la libération d'IL-1β par les macrophages humains induits par le LPS. [5]

L'administration de fumarate de Clemastine (5-20 mg/kg) présente un effet inhibiteur significatif sur l'œdème de la patte au zymosan et l'œdème de l'oreille à l'huile de croton induits simultanément chez les rats de manière dose-dépendante, avec une inhibition de 53,6% et 46,8% respectivement à la dose de 20 mg/kg, et avec des valeurs ID50 de 18,0 mg/kg et 20,5 mg/kg respectivement. [6]

Le traitement au fumarate de Clemastine réduit fortement les réponses immunitaires innées à Listeria monocytogenes chez la souris en interférant avec la production de cytokines pro-inflammatoires telles que le TNF-α et l'IL-6 médiée par la kinase régulée par le signal extracellulaire (ERK), étonnamment non dépendante du blocage du Histamine Receptor, conduisant à une mortalité significativement plus élevée. [7]

• Inhibition de [Ca²⁺]_i

  Les cellules HL-60 sont suspendues à 1×10⁷ cellules/mL dans un tampon composé de 138 mM NaCl, 6 mM KC1, 1 mM MgSO4, 1 mM Na₂HPO₄, 5 mM NaHCO₃, 5,5 mM glucose, et 20 mM HEPES-NaOH, pH 7,4, complété par 0,1% (p/v) d'albumine sérique bovine. Le colorant fura-2/AM est ajouté à une concentration de 4 μM, et les cellules sont incubées pendant 10 minutes à 37 °C. Ensuite, les cellules sont diluées avec le tampon susmentionné à une concentration de 5×10⁶ cellules/mL et incubées pendant 45 minutes à 37 °C. Par la suite, les cellules sont diluées avec le tampon susmentionné à une concentration finale de 0,5 × 10⁶ cellules/mL et centrifugées à 250 g pendant 10 minutes à 20 °C. Les cellules sont suspendues à 1,0 × 10⁶ cellules/mL dans le tampon susmentionné et conservées à 20 °C jusqu'à la mesure. Les cellules HL-60 sont utilisées jusqu'à 4 heures après le chargement avec fura-2/AM, et suspendues dans 2 mL du tampon susmentionné, en utilisant des cuvettes de fluorescence en acrylique. Les cellules HL-60 sont incubées pendant 3 minutes à 37 °C, en présence de 1 mM Ca²⁺ et de diverses concentrations de fumarate de Clemastine, avant l'ajout d'histamine (100 μM). La fluorescence est déterminée à 37 °C, avec une agitation constante des cellules à 1×10³ tr/min, à l'aide d'un spectrofluoromètre Ratio II. La fluorescence basale ([Ca²⁺]_i basale) est mesurée pendant 1 minute. Les valeurs de [Ca²⁺]_i basales sont soustraites des valeurs de [Ca²⁺]_i maximales correspondantes, pour calculer l'augmentation de [Ca²⁺]_i. Les longueurs d'onde d'excitation et d'émission sont respectivement de 340 et 500 nm. La valeur IC50 est évaluée à partir de la courbe compétitive.

• Modèles animaux

  Male Wistar rats with paw oedema induced by subplantar injection of zymosan and ear oedema induced by croton oil

• Dosages

  5-20 mg/kg

• Administration

  Intraperitoneally