BMS-754807

Le BMS-754807 inhibe efficacement la croissance d'un large éventail de lignées cellulaires tumorales humaines d'origines histologiques différentes, y compris mésenchymateuses (Ewing, rhabdomyosarcome, neuroblastome et liposarcome), épithéliales (sein, poumon, pancréas, côlon et estomac) et hématopoïétiques (myélome multiple et leucémie), les valeurs IC50 variant de 5 nM à 365 nM pour les lignées cellulaires les plus sensibles. Ce composé inhibe la prolifération des cellules IGF-1R-Sal et des cellules RH41 avec un IC50 de 7 nM et 5 nM. Il inhibe la phosphorylation de l'IGF-1R dans les cellules IGF-1R-Sal, Rh41 et Geo avec un IC50 de 13 nM, 6 nM et 21 nM. Ce produit chimique inhibe la phosphorylation d'Akt dans les cellules IGF-1R-Sal, Rh41 et Geo avec un IC50 de 22 nM, 13 nM et 16 nM. Il induit une apoptose plus importante dans les cellules Rh41 après 24 heures, comme l'indique un pic sub-G1 accru (23,1%), par rapport au contrôle (2,4%). [1] Ce composé inhibe la phosphorylation de l'IGF-1R (IC50 = 13nM) et des cibles en aval Akt (IC50 = 22nM) et MAPK (IC50 = 13nM) dans la lignée cellulaire IGF-Sal avec un IC50 cohérent avec l'IC50 antiprolifératif (7 nM) dans cette lignée cellulaire. La structure cristalline de ce composé co-cristallisé avec le domaine kinase de l'IGF-1R montre que la triade de liaisons hydrogène donneur/accepteur/donneur avec Met1052 et Glu1050 se trouve dans la région charnière de la kinase. [2] Il présente une valeur EC50 médiane de 0,62 μM contre 23 lignées cellulaires dans le programme de tests précliniques pédiatriques (PPTP). [3]

BMS-754807 (12,5 mg/kg, par voie orale) inhibe la phosphorylation de l'IGF-1R dans les tumeurs et le sérum chez les souris nues porteuses de tumeurs IGF-1R-Sal. Ce composé inhibe la croissance tumorale dans un groupe sélectionné de modèles de xénogreffes tumorales épithéliales (IGF-1R-Sal, GEO et Colo205), hématopoïétiques (JJN3) et mésenchymateuses (RD1 et Rh41) avec un TGI allant de 53% à 115%. [1] Il (6,25 mg/kg) atteint une inhibition complète de la croissance tumorale dans le modèle de souris tumorale IGF-Sal dérivé de transgénique avec une inhibition corrélée de pIGF-1R et pAKT. La liaison aux protéines pour ce produit chimique varie de 98,5% dans le plasma de souris à 95,9% dans le plasma humain. Il en résulte une clairance de 113 (mL/min)/kg, 20 (mL/min)/kg, 3,5 (mL/min)/kg et 41 (mL/min)/kg. [2] Ce composé (25 mg/kg) inhibe significativement la tumeur dans les modèles de souris xénogreffées KT-5 (Wilms), KT-14 (rhabdoïde), Rh28 (rhabdomyosarcome) et OS-1. [3]

• Essais d'inhibition de la kinase

  Le premier criblage de BMS-754807 est un essai kinase in vitro utilisant l'enzyme recombinante du récepteur IGF-1 humain dans des essais biochimiques utilisant le peptide synthétique KKSRGDYMTMQIG comme substrat phosphoaccepteur. Le profil de sélectivité est évalué par rapport à de multiples enzymes recombinantes qui sont générées chez BMS ou achetées à l'extérieur. Les essais enzymatiques sont réalisés dans des plaques à 384 puits à fond en U avec un volume de réaction de 30 μL dans un tampon d'essai (100 mM Hepes pH 7,4, 10 mM MgCl₂, 0,015% Brij35 et 4 mM DTT). Les réactions de 60 minutes sont initiées en combinant l'ATP (concentration équivalente à K_m ATP), 1,5 μM de substrat peptidique marqué, l'enzyme et ce composé. Les réactions sont terminées avec l'EDTA. Les mélanges réactionnels sont analysés sur le Caliper LabChip 3000 par séparation électrophorétique du substrat fluorescent et du produit phosphorylé. Les données d'inhibition sont calculées par comparaison aux réactions de contrôle sans enzyme pour 100% d'inhibition et aux réactions avec véhicule uniquement pour 0% d'inhibition. Les composés sont dissous dans du DMSO, un stock de 10mM et évalués à onze concentrations. Les valeurs IC50 sont dérivées par analyse de régression non linéaire des courbes de dose-réponse.

• Lignées cellulaires

  IGF-1R-Sal, RH41 and Geo cell lines

• Concentrations

  365 nM

• Temps dincubation

  72 hours

• Méthode

  Cells are grown at their optimal density in RPMI +GlutaMax supplemented with 10% heat-inactivated fetal bovine serum (FBS). Cell proliferation is evaluated by incorporation of ³H-thymidine into DNA after exposure of cells to this compound for 72 hours. Results are expressed as an IC50, which is the drug concentration required to inhibit cell proliferation by 50% compared with untreated control cells.

• Modèles animaux

  IGF-1R-Sal, GEO, Colo205, JJN3, RD1 or Rh41 tumor–bearing nude mice

• Dosages

  150 mg/kg

• Administration

  Orally