Abiraterone Acetate

L'Abiraterone montre une bonne complexation avec le fer héminique uniquement dans le SM1. [1] L'Abiraterone bloque la synthèse des androgènes en inhibant le CYP17A1. L'Abiraterone bloque également la 3β-hydroxystéroïde déshydrogénase (3βHSD), une enzyme absolument nécessaire à la synthèse des androgènes biologiquement actifs. L'Abiraterone inhibe la conversion du DHEA en Δ⁴-androstènedione. L'inhibition de la 3βHSD par l'Abiraterone bloque la synthèse de la DHT et la réponse du Androgen Receptor. L'Abiraterone inhibe la conversion du Δ⁵-androstènediol en testostérone. [2] L'Abiraterone inhibe la C_17,20-lyase, avec un IC50 de 5,8 nM, dans les microsomes testiculaires de rat. L'Abiraterone inhibe significativement la sécrétion de testostérone (−48%) et augmente en retour la concentration de LH (192%). [3] L'Abiraterone inhibe la prolifération in vitro et l'expression génique régulée par les récepteurs aux androgènes des cellules cancéreuses de la prostate AR-positives, ce qui pourrait s'expliquer par un antagonisme des récepteurs aux androgènes en plus de l'inhibition de la stéroïdogenèse. [4]

Suite à une administration intrapéritonéale chez un modèle rongeur, l'abiraterone a montré une désacétylation rapide. Lorsqu'elle était administrée sous forme de son pro-médicament acétate (CB 7630), elle a supprimé les niveaux circulants de testostérone à des niveaux indétectables et a significativement diminué les poids des organes sensibles aux androgènes. L'abiraterone est bien tolérée et la demi-vie d'élimination moyenne de l'abiraterone dans ces études était de 27,6 h (ce qui soutient l'utilisation d'une dose quotidienne)[5]. Des études précliniques avec l'abiraterone ont démontré une réduction de la production d'androgènes en aval du CYP17, ce qui a entraîné une diminution du poids de la prostate ventrale, des testicules et des vésicules séminales chez les souris[6].

• dosage de l'activité C_17,20-lyase

  Les microsomes sont dilués à une concentration protéique finale de 50 μg/mL dans le mélange réactionnel qui contient 0,25 M de saccharose, 20 mM de Tris-HCl (pH 7,4), 10 mM de G6P et 1,2 UI/mL de G6PDH. Après équilibration à 37 °C pendant 10 minutes, la réaction est initiée par l'ajout de βNADP pour obtenir une concentration finale de 0,6 mM. Avant la répartition de 600 μL du mélange réactionnel dans chaque tube, les composés testés sont évaporés à sec sous un courant d'azote, puis incubés à 37 °C pendant 10 minutes. Après incubation avec l'Abiraterone, 500 μL du mélange réactionnel sont transférés dans des tubes contenant 1 μM du substrat enzymatique, le 17OHP. Après 10 minutes d'incubation supplémentaires, les tubes sont placés sur de la glace et la réaction est arrêtée par l'ajout de 0,1 ml de NaOH 1N. Les tubes sont congelés et conservés à -20 °C jusqu'à l'analyse des niveaux de Δ4A. Un RIA Δ4A est développé et automatisé sur un format de microplaques dans notre laboratoire en utilisant un anticorps spécifique contre le Δ4A et les instructions fournies par Biogenesis. La séparation de l'antigène libre et lié est obtenue avec une suspension de charbon de bois enrobé de dextrane. Après centrifugation, des aliquots du surnageant clair sont comptés en double dans un compteur à scintillation liquide. Les concentrations de Δ4A des échantillons inconnus sont déterminées à partir de la courbe standard. La limite de détection est de 0,5 ng/mL et les coefficients de variation intra- et inter-essai sont respectivement de 10,7 et 17,6 % pour une valeur d'essai de 13 ng/mL. Le taux de réaction enzymatique est exprimé en pmol de Δ4A formé par 10 minutes et par mg de protéine. La valeur de l'activité maximale sans inhibiteur (contrôle) est fixée à 100 %. Les valeurs d'IC50 sont calculées par analyse non linéaire à partir du graphique de l'activité enzymatique (%) en fonction du log de la concentration de l'inhibiteur.

• Lignées cellulaires

  LNCaP and VCaP cells

• Concentrations

  0 μM -10 μM

• Temps dincubation

  24 hours and 96 hours

• Méthode

  LNCaP and VCaP cells are seeded in 96-well plates and grown in CSS-supplemented phenol red-free or FBS-supplemented media for 7 days. Cells are treated with Abiraterone at 24 hours and 96 hours after plating and cell viability is determined on day 7 by adding CellTiter Glo and measuring luminescence.

• Modèles animaux

  Male NOD/SCID mice with LAPC4 cells

• Dosages

  0.5 mmol/kg/d

• Administration

  Administered via s.c.