uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

Wortmannin (SL-2052) PI3K Remmer

Name: Wortmannin (SL-2052)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2758
Rating: 5 (340 reviews)

Cat.Nr.: S2758

Wortmannin is de eerst beschreven PI3K-remmer met een IC50 van 3 nM in een celvrije test, met weinig selectiviteit binnen de PI3K-familie. Wortmannin blokkeert de vorming van autofagosomen en remt DNA-PK/ATM potent met een IC50 van 16 nM en 150 nM in celvrije tests. Wortmannin remt ook de PLK1-activiteit.

Wortmannin (SL-2052) PI3K Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 428.43

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.97%

99.97

Gerelateerde doelwitten	Akt mTOR GSK-3 ATM/ATR DNA-PK AMPK PDPK1 PTEN PP2A PDK
Overige PI3K Inhibitoren	GDC-0077 (Inavolisib) SAR405 Quercetin (Sophoretin) LY294002 XL147 analogue Tersolisib (STX-478) Buparlisib (BKM120) 740 Y-P (PDGFR 740Y-P) GO-203 TFA Eganelisib (IPI-549)

Celkweek, behandeling & werkconcentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Formulering	Activiteitsbeschrijving	PMID
Mel-HO	Apoptosis Assay	4/8 μM	24 h		enhances TRAIL-induced apoptosis	24113173
A-375-TS	Apoptosis Assay	4/8 μM	24 h		enhances TRAIL-induced apoptosis	24113173
A-375	Apoptosis Assay	4/8 μM	24 h		enhances TRAIL-induced apoptosis	24113173
Huh7	Function Assay	3 μM	1 h		reduces the virus entry into the cells	24184196
BEL/FU	Function Assay	1 mM	24 h		decreases protein levels of the PI3K/Akt pathway	24232099
HCT 116	Function Assay	100 nM	24 h		attenuates the colonies of the tumor cells with upregulation of Akt1	24297510
HepG2	Function Assay	100 nM	24 h		attenuates the colonies of the tumor cells with upregulation of Akt1	24297510
SW480	Function Assay	150nM	20 h	DMSO	reduces cellular accumulation of β-catenin	24324366
HEK-293	Function Assay	150nM	16 h	DMSO	decreases CRT activity	24324366
5637	Apoptosis Assay	10 μM	40 min		reverses p21WAF1 expression, CDK expression, and cell inhibition induced by fucoidan	24333868
MG-63	Apoptosis Assay	10 µM	12 h		enhances DP-induced apoptosis	24358301
H1975	Function Assay	10 μM	1 h	DMSO	decreases cellular phospho-AKT protein levels	24447935
H520	Function Assay	10 μM	1 h	DMSO	decreases cellular phospho-AKT protein levels	24447935
HepG2	Function Assay	200 nM	0.5 h		attenuates FoxO phosphorylation	24535192
HL-60	Function Assay	0.1 μM	72 h		blocks cell differentiation	24607273
SK-N-LO	Function Assay	100 nM	0.5 h		decreases the stimulant effects of on Akt phosphorylation	24654606
A549	Function Assay	10 μm	16 h	DMSO	modulates the IAV replication and causes retention of NP in the nucleus.	24802111
A549	Growth Inhibition Assay	3 µM	2 h		suppresses Akt and GSK3β activation, S-phase arrest, cell apoptosis and caspase-3 activation	24847863
HepG2	Function Assay	100 nM	0.5 h	DMSO	blocks MA-induced Akt phosphorylation	24863350
MO59J	Apoptosis Assay	10 μM	24 h	DMSO	increases the DSB level induced by or	24953561
MO59K	Apoptosis Assay	10 μM	24 h	DMSO	increases the DSB level induced by or	24953561
MO59J	Cytotoxicity Assay	5 μM	7 d	DMSO	enhances the cytotoxicity of or	24953561
MO59K	Cytotoxicity Assay	5 μM	7 d	DMSO	enhances the cytotoxicity of or	24953561
HT-29	Growth Inhibition Assay	1.5 µM	96 h		decreases cell growth which can be inhibited by KYNA	25012123
MCF7	Function Assay	100 nM	24 h		eliminates E2-induced ARE-Luc activity	25172557
MDA-MB-231	Apoptosis Assay	1 μM	48 h	DMSO	decreases the cell survival treated with 25 μM of F1 or F2	25300932
APRE-19	Apoptosis Assay	5 μM	24 h		abolishes FLZ-mediated pro-survival/anti-apoptosis activity	25329617
HUVECs	Cytotoxicity Assay	100 nM	24 h		attenuates the abrogative effects of calycosin on VRI-induced cytotoxicity	25450186
H1703	Growth Inhibition Assay	2.5 μM	1-4 d	DMSO	enhances cell growth inhibition treatment with	25490383
A459	Growth Inhibition Assay	2.5 μM	1-4 d	DMSO	enhances cell growth inhibition treatment with	25490383
Mel-HO-TS	Apoptosis Assay	4/8 μM	24 h		enhances TRAIL-induced apoptosis	24113173
MeWo	Apoptosis Assay	4/8 μM	24 h		enhances TRAIL-induced apoptosis	24113173
Mel-2a	Apoptosis Assay	4/8 μM	24 h		enhances TRAIL-induced apoptosis	24113173
MDA-MB-231	Function Assay	0–400 nM	4 h		suppresses Akt phosphorylation in a dose-dependent manner	22906259
MDA-MB-231	Function Assay	400 nM	4 h		decreases MMP-9 and IL-8 protein in a dose-dependent manner	22906259
Jurkat	Growth Inhibition Assay	0.25-1.25 μM	24/48 h	DMSO	inhibits cell proliferation in both time- and dose- dependent manner	19757185
Namalwa	Growth Inhibition Assay	0.25-1.25 μM	24/48 h	DMSO	inhibits cell proliferation in both time- and dose- dependent manner	19757185
Jurkat	Apoptosis Assay	0.25-1.25 μM	24/48 h	DMSO	induces cell apoptosis in both time- and dose- dependent manner	19757185
Namalwa	Apoptosis Assay	0.25-1.25 μM	24/48 h	DMSO	induces cell apoptosis in both time- and dose- dependent manner	19757185
K562	Growth Inhibition Assay		24 h		IC50=25±0.14 nM	19662361
SW1990	Function Assay	0.01-1 μM	1 h		inhibits HA-induced Akt phosphorylation	19469020
RT112	Growth Inhibition Assay	10 μM	24 h	DMSO	decreases the proportion of G2/M cells	18787832
MHG-U1	Growth Inhibition Assay	10 μM	24 h	DMSO	decreases the proportion of G2/M cells	18787832
SMMC-7721	Apoptosis Assay	200 nM	24 h		increases CHX-induced apoptosis	17557191
SMMC-7721	Function Assay	200 nM	24 h		up-regulates β1,4GT1 expression	17557191
HeLa	Function Assay	100 nM	1 h		alters the morphology of the transferrin recycling compartment	16890915
MRC5VI	Function Assay	12.5 mM	0.5 h	DMSO	abolishes the Ser473/Thr308 phosphorylation of AktPKB	16227394
AT5BIVA	Function Assay	12.5 mM	0.5 h	DMSO	abolishes the Ser473/Thr308 phosphorylation of AktPKB	16227394
M059J	Function Assay	12.5 mM	0.5 h	DMSO	abolishes the Ser473/Thr308 phosphorylation of AktPKB	16227394
HeLa	Function Assay	12.5 mM	0.5 h	DMSO	abolishes the Ser473/Thr308 phosphorylation of AktPKB	16227394
N2a	Apoptosis Assay	0.1-10 μM	2 h		induces decreased cell viability in a concentration-dependent manner	15842767
Jurkat	Kinase Assay				IC50 of 24 nM	15664519
Sf9	Function assay				Inhibition of human PI3Kalpha expressed in Sf9 cells by fluorescent polarization assay, IC50 = 0.012 μM.	21121631
HeLa	Function assay				Inhibition of AX-7503 binding to recombinant Plk3 expressed in HeLa cells by Western blot, IC50 = 0.049 μM.	17135248
HeLa	Function assay				Binding affinity for DNA dependent protein kinase isolated from HeLa cells; Range is 20-120, Ki = 0.12 μM.	15658870
HeLa	Function assay				Binding affinity for Phosphatidylinositol 3-kinase isolated from HeLa cells; Range is 20-120, Ki = 0.12 μM.	15658870
A549	Function assay				Inhibition of Plk3 in human A549 cells assessed as casein substrate phosphorylation by Western blot, IC50 = 0.22 μM.	17135248
A549	Antiproliferative assay		48 hrs		Antiproliferative activity against human A549 cells after 48 hrs by SRB method, IC50 = 11.4 μM.	18630894
GM00637	Function assay	1 uM			Inhibition of recombinant Plk3 expressed in human GM00637 cells at 1 uM assessed as decrease in p53 serine-20 phosphorylation	17135248
MDA-MB-231	Function assay	1 to 10 uM	24 hrs		Inhibition of PI3K in human MDA-MB-231 cells assessed as inhibition of AKT phosphorylation at 1 to 10 uM after 24 hrs by Western blot analysis	24828286
HeLa	Function assay	100 nM	10 mins		Inhibition of PI3K in human HeLa cells assessed as reduction in EGF-stimulated AKT phosphorylation at S473 at 100 nM preincubated for 10 mins followed by EGF stimulation measured after 5 mins by Western blot analysis	30380865
HeLa	Function assay	100 nM	10 mins		Inhibition of PI3K in human HeLa cells assessed as reduction in EGF-stimulated AKT phosphorylation at T308 at 100 nM preincubated for 10 mins followed by EGF stimulation measured after 5 mins by Western blot analysis	30380865
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht	428.43	Formule	C₂₃H₂₄O₈	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	19545-26-7	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	KY 12420, SL-2052, BRN 0067676, NSC 627609			Smiles	CC(=O)OC1CC2(C(CCC2=O)C3=C1C4(C(OC(=O)C5=COC(=C54)C3=O)COC)C)C

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 85 mg/mL (198.39 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	5.000mg/ml (11.67mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC₅₀/Ki	PI3K (Cell-free assay) 3 nM DNA-PK (Cell-free assay) 16 nM ATM (Cell-free assay) 150 nM MLCK (Cell-free assay) 170 nM
In vitro	De remming van MLCK door Wortmannin wordt niet beïnvloed door calmoduline of peptidesubstraat, terwijl het wordt verminderd door een hoge ATP-concentratie. Deze verbinding interageert direct met het katalytische domein van MLCK en leidt tot een onomkeerbaar verlies van de enzymactiviteit. Het heeft geen remmende werking op cAMP-afhankelijke proteïnekinase, cGMP-afhankelijke proteïnekinase en calmoduline-afhankelijke proteïnekinase II, en heeft weinig effect op de proteïnekinase C-activiteit. Deze remmer remt N-formylmethionyl-leucylfenylalanine (fMLP)-gestimuleerde PtdInsP3 (fosfatidylinositol 3,4,5-trifosfaat) vorming met een IC50 van 5 nM en deze remming wordt volledig opgeheven wanneer voorbehandeld met 100 nM van deze verbinding in menselijke neutrofielen, met verhoogde PtdInsP2-niveaus en geen effecten op cellulaire PtdInsP- en PtdIns-gehaltes. Het zou oscillerende veranderingen in F-actinegehalte kunnen ontwikkelen en remt fMLP-gestimuleerde actinepolymerisatie in neutrofielen niet. Deze chemische stof remt onomkeerbaar de fosfatidylinositol 3-kinase (PI3-kinase) activiteit door binding aan het 110-kDa eiwit (IC50 van 3 nM) en heeft geen effect op PI4-kinase in RBL-2H3 cellen. Het remt ook de leukotrieenafgifte, zonder effect op de activering van de tyrosinekinase Lyn. Deze verbinding heft de geïnduceerde hexose-opname in geïsoleerde ratadipocyten volledig op bij 0,1 μM, zonder de gestimuleerde lipolytische activiteit te belemmeren. Het onderdrukt de geïnduceerde productie van stikstofmonoxide met 50% bij 500 nM in menselijke navelstrengendotheelcellen, wat een reactie is op IGF-1. Deze chemische stof onderdrukt DNA-dubbelstrengsbreuk (DSB)-herstel en heeft geen effect op DSB-niveaus of de kinetiek van enkelstrengsbreuk (SSB)-herstel in Chinese hamsterovariumcellen bij 50 μM. Het zou de door ioniserende straling (IR) geïnduceerde cytotoxiciteit kunnen potentiëren zonder zelf toxiciteit te vertonen. Deze remmer remt de polo-like kinase (PLK1) activiteit met een IC50 van 24 nM in intacte G2/M-gearresteerde cellen. Het verhoogt de Toll-like receptor (TLR)-gemedieerde accumulatie van IL-6 in menselijke macrofagen met een EC50 van 50 nM. Ondertussen verhoogt deze verbinding significant de TLR-gemedieerde induceerbare stikstofoxidesynthase (iNOS)-expressie en nitrietaccumulatie in muizenmacrofagen. Het activeert de nucleaire factor-κB en reguleert de cytokine-mRNA-productie omhoog. Deze chemische stof remt ook Polo-like kinase (PlK) 1 en PlK3, die belangrijke rollen spelen in de mitose. De behandeling ervan zou kunnen leiden tot een vermindering van de fosforylering van p53 op serine 20 geïnduceerd door DNA-schade. Het onderdrukt hyaluronan-geïnduceerde Akt-fosforylering en celmotiliteit/-migratie in SW1990-cellen.
Kinase Assay	MLCK-test
Kinase Assay	MLCK-activiteit wordt bepaald met peptidesubstraat (KKRPQRATSNVFS-NH₂) of myosine lichte keten. Het peptidesubstraat (24 μM) wordt gefosforyleerd in een reactiemengsel dat 25 mM Tris-HCl (pH 7,5), 0,5 mg/mL bovien serumalbumine, 4 mM MgCl₂, 0,5 mM CaCl₂, 2,6 nM calmoduline, 1,5 nM MLCK en 400 μM ATP bevat in een eindvolume van 0,25 mL. Na een pre-incubatie van 10 minuten bij 28 °C zonder ATP, wordt de reactie gestart door toevoeging van ATP bij 28 °C en beëindigd door toevoeging van 0,1 mL 10% (v/v) azijnzuur na 30 minuten. Het mengsel wordt geanalyseerd door hogedrukvloeistofchromatografie: kolom, Unisil Pack 5C18 4,6 X 150 mm; oplosmiddel, 18% (v/v) acetonitril, 0,1% (v/v) trifluorazijnzuur in water; stroomsnelheid, 1,0 mL/min; temperatuur, 40 °C; detectie, absorptie bij 220 nm. Het percentage reactie wordt berekend uit de verhouding van piekgebieden van de gefosforyleerde vorm tot die van de niet-gefosforyleerde vorm. De specifieke activiteit gemeten onder de hierboven beschreven omstandigheden is 0,81 μmol/min/mg. Myosine lichte keten (108 μg/mL) wordt gefosforyleerd in een reactiemengsel dat 25 mM Tris-HCl (pH 7,5), 0,5 mg/mL bovien serumalbumine, 4 mM MgCl₂, 0,5 mM CaCl₂, 4,2 nM calmoduline, 0,92 nM enzym en 10 μM[γ-³²P]ATP (100-900 cpm/pmol) bevat in een eindvolume van 0,25 mL. Na een pre-incubatie van 3 minuten bij 30 °C zonder ATP, wordt de reactie gestart door toevoeging van [γ-32P]ATP bij 30 °C en gestopt door toevoeging van 0,125 mL trichloorazijnzuur na 5 minuten. De zuur-precipiteerbare materialen worden verzameld op een nitrocellulosemembraanfilter en gewassen met vier aliquots van 1 mL 5% (v/v) trichloorazijnzuur. De radioactiviteit op de filter wordt gemeten in een tolueenscintillatievloeistof, met behulp van een Packard Tri-Carb vloeistofscintillatiespectrometer Model 4530. De specifieke activiteit gemeten onder de omstandigheden is 1,23 μmol/min/mg.
In vivo	Wortmannin remt peritoneale metastase van SW1990 in muizen bij 1 mg/kg, zonder enig gewichtsverlies. Deze verbinding remt fosfatidylinositide 3-kinase-proteïnekinase B (PKB)/Akt-fosforylering in zowel normale weefsels (long-, hart- en hersenhomogenaten) als tumorweefsel in muizen, zonder mortaliteit of acute toxiciteit bij 0,7 mg/kg. In combinatie met LY188011 verhoogt deze chemische stof significant de apoptose en remt het de tumorgroei in orthotopische tumoren, terwijl beide monotherapieën dat niet konden.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1733924/ [2] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1137693/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7503989/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8106400/ [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8770859/ [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8968039/ [7] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15664519/ [8] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16474002/ [9] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17135248/ [10] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19469020/ [11] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19469020/ [12] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9766667/ [13] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35027451/

Toepassingen (Applications)

Methoden	Biomarkers	PMID
Western blot	p-AKT / AKT / p-GSK3β / GSK3β / Bcl-xl / Bax / Caspase-3 / Cleaved caspase-3	25344912
Immunofluorescence	DNMT1	24001151
Growth inhibition assay	Cell viability	25344912

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):