Home PI3K/Akt/mTOR mTOR Remmer WAY-600

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

WAY-600 mTOR Remmer

Cat.Nr.: S2689

WAY-600 is een krachtige, ATP-competitieve en selectieve remmer van mTOR met een IC50 van 9 nM; deze verbinding blokkeert mTORC1/P-S6K(T389) en mTORC2/P-AKT(S473) maar niet P-AKT(T308); het is selectief voor mTOR dan PI3Kα (>100-voudig) en PI3Kγ (>500-voudig).
WAY-600 mTOR Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 494.59

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: S268901 DMSO]22 mg/mL]false]Ethanol]2 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Zuiverheid: 99.34%
  • Genoemd in Nature Medicine voor zijn topkwaliteit
  • COA
  • NMR
  • HPLC
  • SDS
  • Datasheet
99.34

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 494.59 Formule

C28H30N8O

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 1062159-35-6 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1CN(CCC1N2C3=C(C=N2)C(=NC(=N3)C4=CC5=C(C=C4)NC=C5)N6CCOCC6)CC7=CN=CC=C7

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 22 mg/mL (44.48 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 2 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
mTOR
9 nM
In vitro
Immune-complex kinase assay shows mTORC2-specific substrate His6-AKT or the mTORC1 substrate His6-S6K is dose dependently inhibited by WAY-600. This compound globally inhibits mTOR signaling and AKT function in cellular models dose dependently. It profoundly inhibits cap-dependent and global protein synthesis in MDA361, human breast cancer cells. This chemical shows antiproliferative effects in various cancer cell lines involving G1 cell cycle arrest and selective apoptosis. It down-regulate angiogenic factors, VEGF and HIF-1α, in U87MG, MDA361 and LNCap cells.
Kinase Assay
DELFIA-formaat van gezuiverd FLAG-TOR
De routine assays met gezuiverd FLAG-TOR (FL en 3.5) worden uitgevoerd in 96-well platen als volgt. Enzymen worden eerst verdund in kinase assay buffer (10 mM Hepes (pH 7.4), 50 mM NaCl, 50 mM β-glycerofosfaat, 10 mM MnCl2, 0.5 mM DTT, 0.25 lM microcystine LR, en 100 lg/mL BSA). Aan elke well wordt 12 μL van het verdunde enzym kort gemengd met 0.5 μL testremmer of controlevehikel dimethylsulfoxide (DMSO). De kinasereactie wordt geïnitieerd door 12.5 μL kinase assay buffer met ATP en His6-S6K toe te voegen om een eindreactievolume van 25 μL te verkrijgen met 800 ng/mL FLAG-TOR, 100 μM ATP en 1.25 μM His6-S6K. De reactieplaat wordt gedurende 2 uur (lineair bij 1-6 uur) bij kamertemperatuur geïncubeerd met zacht schudden en daarna beëindigd door toevoeging van 25 μL Stop buffer (20 mM Hepes (pH 7.4), 20 mM EDTA en 20 mM EGTA). De DELFIA-detectie van de gefosforyleerde (Thr-389) His6-S6K wordt uitgevoerd bij kamertemperatuur met behulp van een monoklonaal anti-P(T389)-p70S6K antilichaam (1A5) gelabeld met Europium-N1-ITC (Eu) (10.4 Eu per antilichaam). Vijfenveertig microliter van het beëindigde kinase reactiemengsel wordt overgebracht naar een MaxiSorp-plaat met 55 μL PBS. De His6-S6K wordt gedurende 2 uur gehecht, waarna de wells worden geaspireerd en eenmaal gewassen met PBS. Honderd microliter DELFIA-buffer met 40 ng/mL Eu-P(T389)-S6K antilichaam wordt toegevoegd. De antilichaambinding wordt gedurende 1 uur voortgezet met zachte agitatie. De wells worden vervolgens geaspireerd en vier keer gewassen met PBS met 0.05% Tween 20 (PBST). Honderd microliter DELFIA Enhancement-oplossing wordt aan elke well toegevoegd en de platen worden afgelezen in een PerkinElmer Victor model platenlezer. Verkregen gegevens worden gebruikt om de enzymatische activiteit en enzymremming door potentiële remmers te berekenen.
Referenties