Home Metabolism HMG-CoA Reductase Remmer Simvastatin (MK-733)

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

Simvastatin (MK-733) HMG-CoA Reductase Remmer

Cat.Nr.: S1792

Simvastatin is een competitieve remmer van HMG-CoA reductase met een Ki van 0,1-0,2 nM in celvrije assays. Simvastatin induceert ferroptosis, mitophagy, autophagy en apoptosis.
Simvastatin (MK-733) HMG-CoA Reductase Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 418.57

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.92%
99.92

Celkweek, behandeling & werkconcentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
rat liver hepatocytes Function assay 4 h Inhibition of cholesterol synthesis in rat liver hepatocytes after 4 hrs, IC50=1.3 nM
rat L6 cells Function assay Inhibition of cholesterol synthesis in rat L6 cells assessed as incorporation of [14C]acetate into cholesterol, IC50=0.027 μM
HepG2 cells Function assay In vitro inhibitory activity was evaluated on cholesterol biosynthesis in HepG2 cells, IC50=0.04 μM
HEK293 cells Function assay Inhibition of OATP1B1 (unknown origin) expressed in HEK293 cells using estradiol-17beta-glucuronide substrate, IC50=4.4 μM
human A549 cells Cytotoxic assay 72 h Cytotoxicity against human A549 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50=16.3 μM
human HS68 cells Cytotoxic assay Cytotoxicity against human HS68 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50=26.4 μM
mouse MEF cells Cytotoxic assay Cytotoxicity against mouse MEF cells after 72 hrs by MTT assay, IC50=36.7 μM
RASMC cells Function assay 2 μM 72 h Inhibition of rat Ftase in RASMC cells assessed as reduction in Ras prenylation at 2 uM after 72 hrs by Western blot analysis
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 418.57 Formule

C25H38O5

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 79902-63-9 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen MK 733 Smiles CCC(C)(C)C(=O)OC1CC(C=C2C1C(C(C=C2)C)CCC3CC(CC(=O)O3)O)C

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 83 mg/mL (198.29 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 83 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
HMG-CoA reductase
(Cell-free assay)
0.1-0.2 nM(Ki)
In vitro

Voorafgaand aan gebruik in celassays moet Simvastatin (MK-733) worden geactiveerd door NaOH in EtOH-behandeling. Deze verbinding remt de cholesterolsynthese in muis L-M-cellen (fibroblasten), rat H4II E-cellen (lever) en humane Hep G2-cellen (lever) met een IC50 van respectievelijk 19,3 nM, 13,3 nM en 15,6 nM.

Behandeling met deze verbinding leidt binnen 30 minuten tot een dosisafhankelijke toename in serine 473-fosforylering van Akt, met maximale fosforylering bij 1,0 µM. Het (1,0 μM) versterkt de fosforylering van het endogene Akt-substraat endothelial nitric oxide synthase (eNOS), remt Apoptosis related in serumvrije media en versnelt de vorming van vasculaire structuren.

Deze chemische stof vertoont in vitro ontstekingsremmende effecten. Het (10 μM) vermindert de door anti-CD3/anti-CD28-antilichamen gestimuleerde proliferatie van uit perifeer bloed afkomstige mononucleaire cellen en synoviaal vloeistofcellen uit bloed van reumatoïde artritis, evenals de IFN-γ-afgifte. Deze verbinding (10 μM) onderdrukt de door cellen gemedieerde macrofaag TNF-γ-afgifte, geïnduceerd via cognate interacties, met ~30%.

Kinase Assay
HMG-CoA Reductase activiteitsbepaling
Het totale volume van elke assay is 95 μL en het reactiemengsel bevatte 10 μL van de te testen remmende verbinding en 85 μL incubatiebuffer met 2 mg/mL levermicrosomen, 0,1 M KH2PO4, pH 7,2, 5,7 mM dithiothreitol, 10 mM glucose-6-fosfaat, 2 U/mL glucose-6-fosfaat dehydrogenase, 1 mM NADP, 10 μM miconazol. Controle-experimenten worden uitgevoerd zonder NADPH-genererend systeem. Alle monsters worden 10 min bij 37 ℃ geïncubeerd vóór toevoeging van 5 μL substraat (ongelabeld en 14C-HMG-3-hydroxy-3-methyl glutaryl CoA, eindconcentratie 50 μM, 2,5 nCi/nmole). Na 30 min bij 37 ℃ wordt de reactie gestopt door toevoeging van 27 μL 1N HCl en 20 μL ongelabelde mevalonolacton (200 μg/assay). De omzetting van mevalonzuur naar lacton wordt uitgevoerd bij kamertemperatuur gedurende 60 min.
In vivo

Orale toediening van Simvastatin (MK-733) remt de omzetting van radioactief gelabeld acetaat in cholesterol met een IC50 van 0,2 mg/kg.

Orale toediening van deze verbinding (4 mg/dag) gedurende 13 weken aan konijnen die een atherogeen cholesterolrijk dieet kregen, brengt de door cholesterol veroorzaakte stijgingen in totaal cholesterol, LDL-cholesterol en HDL-cholesterol terug naar normale niveaus.

Deze verbinding (6 mg/kg) zorgt voor een toename in LDL-receptor-afhankelijke binding en verhoogt het aantal hepatische LDL-receptoren bij konijnen die een dieet kregen met 0,25% cholesterol.

Deze verbinding beïnvloedt ontsteking onafhankelijk van het effect op het plasmacolesterolgehalte. Bij cynomolgus-apen die een atherogeen dieet consumeerden, induceert deze verbinding (20 mg/kg/dag) een 1,3-keer lager macrofaag-gehalte in laesies, en een 2-keer lagere expressie van vasculaire celadhesiemolecuul-1, interleukine-1bèta en weefselfactor, vergezeld door een 2,1-keer toename in het gehalte aan gladde spiercellen en collageen in de laesies.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2724674/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2106347/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12231565/
  • [7] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10965989/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot Nrf2 p-RB / Cyclin D1 / p21 / p27 / PCNA / CDC45 AMPK / p-AMPK / P70S6 / p-P70S6 / LC3 / Atg7 Bcl-2 / PARP / Caspase-3 / Cleaved Caspase-3 HMGCR
S1792-WB1
27323826
Immunofluorescence Nrf2 LC3A/B
S1792-IF1
27323826
Growth inhibition assay Cell viability
S1792-viability1
26503475

Informatie klinische proef (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Rekrutering Aandoeningen Sponsor/Medewerkers Startdatum Fasen
NCT05771675 Not yet recruiting
Recurrent Acute Pancreatitis|Chronic Pancreatitis
Cedars-Sinai Medical Center|United States Department of Defense
 January 2024 Early Phase 1
NCT05542095 Withdrawn
Olfactory Disorder|COVID-19
Washington University School of Medicine|Duke University
 May 1 2023 Phase 1
NCT06207682 Completed
Healthy Volunteers
Amgen
 June 28 2022 Phase 1

Veelgestelde vragen (Frequently Asked Questions)

Vraag 1:
Can you please advise if it has been tested effectively for in vivo use in mice? What solvent can be used to deliver this compound in vivo?

Antwoord:
This compound is an oral drug and a lot of studies report its use in mice. According to this paper (http://atvb.ahajournals.org/content/21/1/115.full), 0.5% Methyl-cellulose can be used as the vehicle.

Vraag 2:
If any specific protocols exist for in vitro use, specifically any steps required to activate it?

Antwoord:
This compound is supplied in an inactive form and requires treatment with NaOH in EtOH followed by neutralization to pH 7.2 for activation. Please find the details from the following reference: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2739764/.