Home TGF-beta/Smad TGF-beta/Smad Remmer SB505124

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

SB505124 TGF-beta/Smad Remmer

Cat.Nr.: S2186

SB505124 is een selectieve remmer van TGFβR voor ALK4, ALK5 met een IC50 van respectievelijk 129 nM en 47 nM in celvrije testen, remt ook ALK7, maar remt ALK1, 2, 3 of 6 niet.
SB505124 TGF-beta/Smad Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 335.4

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.99%
99.99

Celkweek, behandeling & werkconcentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
Sf9 Function assay Inhibition of human recombinant GST-fused ALK5 expressed in Sf9 insect cells using casein as substrate by proprietary radioisotopic protein kinase assay, IC50=0.0349μM 26483198
HaCaT Function assay 24 hrs Inhibition of ALK5 in human HaCaT cells assessed as inhibition of TGFbeta1-induced luciferase activity after 24 hrs by luciferase reporter gene assay, IC50=0.0438μM 24786585
Sf9 Function assay Inhibition of human recombinant GST-fused ALK5 expressed in Sf9 cells, IC50=0.054μM 21435890
Sf9 Function assay Inhibition of GST-fused recombinant human ALK5 expressed in baculovirus-infected insect Sf9 cells using casein as substrate by radioisotope-based assay, IC50=0.054μM 24704197
Sf9 Function assay Inhibition of human recombinant ALK5 expressed in insect Sf9 cells using casein as substrate by radioisotopic assay, IC50=0.054μM 24786585
Sf9 Function assay Inhibition of human recombinant GST-fused ALK5 expressed in Sf9 cells using casein as a substrate by radioisotopic protein kinase assay, IC50=0.0544μM 23047226
4T1 Function assay 24 hrs Inhibition of ALK5 in mouse 4T1 cells assessed as inhibition of TGFbeta1-induced luciferase activity after 24 hrs by luciferase reporter gene assay, IC50=0.0766μM 24786585
Sf9 Function assay Inhibition of human recombinant GST-fused ALK5 expressed in Sf9 cells, IC50=0.169μM 20472445
NMuMG Function assay 0.1 to 0.5 uM 1 hr Inhibition of ALK5 activity in mouse NMuMG cells assessed as TGFbeta-induced phosphorylation of Smad2 at 0.1 to 0.5 uM after 1 hr by Western blot analysis 23047226
TC32 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
BT-37 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
Rh41 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for A673 cells) 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-MC cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for BT-12 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for LAN-5 cells 29435139
BT-37 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for BT-37 cells 29435139
TC32 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for TC32 cells 29435139
fibroblast cells qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for control Hh wild type fibroblast cells 29435139
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 335.4 Formule

C20H21N3O2

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 694433-59-5 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles CC1=NC(=CC=C1)C2=C(N=C(N2)C(C)(C)C)C3=CC4=C(C=C3)OCO4

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 67 mg/mL (199.76 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 67 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
ALK5
(Cell-free assay)
47 nM
ALK4
(Cell-free assay)
129 nM
In vitro

SB505124 is geïdentificeerd als een omkeerbare ATP-competitieve en selectieve ALK-remmer van ALK4 en ALK5. Deze verbinding vertoont geen toxiciteit voor renale epitheelcellen A498 bij concentraties tot 100 µM gedurende 48 uur, en blokkeert TGF-β–geïnduceerde apoptose van FaO-cellen en NRP 154-cellen op een concentratieafhankelijke manier. In humane navelstrengader-endotheelcellen (HUVEC) blokkeert deze chemische stof (500 nM) de veranderingen van TGF-β1 op de F-actine-assemblage en voorkomt ROS-productie geïnduceerd door TGF-β. Door TGF-beta1-signalering te remmen, leidt dit tot verminderde (DFO)-geïnduceerde neurogenese. Een recente studie toont aan dat deze remmer de migratie en invasie van borstkankercellen MCF-7-M5 onderdrukt.

Kinase Assay
In Vitro Proteïne Kinase Test
Kinaseassays worden uitgevoerd zoals beschreven door Laping et al., 2002 met behulp van het kinasegebied van ALK5 en full-length N-terminaal gefuseerd GST-Smad3. Kinaseassays worden uitgevoerd met 65 nM GST-ALK5 en 184 nM GST-Smad3 in 50 mM HEPES, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 1 mM dithiothreitol en 3 μM ATP. Reacties worden geïncubeerd met 0,5 μCi van [33P]γATP gedurende 3 uur bij 30 °C. Gefosforyleerd eiwit wordt op P-81 papier opgevangen, gewassen met 0,5% fosforzuur en geteld door vloeistofscintillatie. Als alternatief wordt Smad3- of Smad1-eiwit ook gecoat op FlashPlate Sterile Basic Microplates. Kinaseassays worden vervolgens uitgevoerd in FlashPlates onder dezelfde testcondities met behulp van het kinasegebied van ALK5 met Smad3 als substraat of het kinasegebied van ALK6 (BMP-receptor) met Smad1 als substraat. Platen worden driemaal gewassen met fosfaatbuffer en geteld door TopCount.
In vivo

In een konijn GFS-model verlaagde SB505124 de intraoculaire druk (IOP) niveaus en verminderde subconjunctivale celinfiltratie en littekenvorming op de chirurgische plaats in de GFS. Bij (TAC)-behandelde muizen en FK12EC KO-muizen voorkomt deze verbinding de activering van endotheel TGF-β-receptoren en inductie van renale arteriolaire hyalinose.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21564419/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21031133/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22495293/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot p-SMAD2 / SMAD2 / Cleaved PARP / ZEB1 / Snail
S2186-WB1
30401983