Home PI3K/Akt/mTOR GSK-3 Remmer SB415286

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

SB415286 GSK-3 Remmer

Cat.Nr.: S2729

SB415286 is een potente GSK3α-remmer met een IC50/Ki van 78 nM/31 nM en een even effectieve remming van GSK-3β. Deze verbinding veroorzaakt groeistilstand en apoptose van MM-cellen.
SB415286 GSK-3 Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 359.72

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: S272901 DMSO]72 mg/mL]false]Ethanol]72 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Zuiverheid: 99.74%
99.74

Celkweek, behandeling & werkconcentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
CHO cells Function assay Stimulation of glycogen synthase in CHO cells expressing human insulin receptor, EC50=45.6 μM
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 359.72 Formule

C16H10ClN3O5

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 264218-23-7 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1=CC=C(C(=C1)C2=C(C(=O)NC2=O)NC3=CC(=C(C=C3)O)Cl)[N+](=O)[O-]

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 72 mg/mL (200.15 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 72 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
GSK-3α
(Cell-free assay)
78 nM
GSK-3β
(Cell-free assay)
~78 nM
In vitro

SB 415286 inhibits GSK3α in an ATP competitive manner with Ki of 31 nM and shows similar potency against GSK3β. This compound has little or no activity against 24 other protein kinases with IC50 > 10 μ M. It stimulates glycogen synthesis in the Chang human liver cell line with EC50 of 2.9 μM, and induces expression of a β-catenin-LEF/TCF regulated reporter gene in HEK293 cells. It protects both central and peripheral nervous system neurones in culture from death induced by reduced PI3-kinase pathway activity in a concentration-dependent manner, which is correlated with inhibition of GSK-3 activity and modulation of GSK-3 substrates tau and β-catenin. In L6 myotubes, this chemical induces a much greater activation of GS (6.8-fold) compared to that elicited by insulin (4.2-fold) or Li (4-fold). This compound (10 μM) inhibits rapamycin-induced down-regulation of cyclin D1, and blocks rapamycin and -induced apoptosis, suggesting a critical role for GSK3β in rapamycin-mediated -sensitization. It prevents coxsackievirus-induced cell death in a dose-dependent manner via stabilization of β-catenin. This chemical exerts a protective effect on hydrogen peroxide-induced cell death in B65 rat neuroblastoma cells and neurons, while lithium does not attenuate the toxic effects of hydrogen peroxide. Its treatment potentiates TRAIL- and CH-11-induced apoptosis in HepG2 cells. Inhibition of GSK-3 by this compound causes multiple myeloma (MM) cell growth arrest and apoptosis through the activation of the intrinsic pathway. It decreases the viability of Neuro-2A cells, and induces the accumulation of cells in the G2/M phase of the cell cycle and subsequent apoptosis.

Kinase Assay
GSK-3 activiteitsbepaling
GSK-3 kinase activiteit wordt gemeten, in aanwezigheid van verschillende concentraties van SB 415286, in een reactiemengsel dat eindconcentraties bevat van: 1 nM humaan GSK3α of konijn GSK3α; 50 mM MOPS pH 7.0; 0.2 mM EDTA; 10 mM Mg-acetaat; 7.5 mM L-mercaptoethanol; 5% (w/v) glycerol; 0.01% (w/v) Tween-20; 10% (v/v) DMSO; 28 μM GS-2 peptide substraat. De GS-2 peptide sequentie komt overeen met een regio van glycogeen synthase dat gefosforyleerd wordt door GSK-3. De test wordt geïnitieerd door de toevoeging van 0.34 μCi [33P]γ-ATP (IC50 bepalingen) of 2.7 μCi [33P]γ-ATP (Ki bepalingen). De totale ATP concentratie is 10 μM (IC50 bepalingen) of varieerde van 0 tot 45 μM (Ki bepalingen). Na 30 minuten incubatie bij kamertemperatuur wordt de test gestopt door de toevoeging van een derde van het testvolume van 2.5% (v/v) H3PO4 dat 21 mM ATP bevat. Monsters worden gespot op P30 fosfocellulose matjes en deze worden zes keer gewassen in 0.5% (v/v) H3PO4. De filtermatjes worden verzegeld in monsternamen met Wallac betaplate scintillatievloeistof. 33P-incorporatie in het substraatpeptide wordt bepaald door de matjes te tellen in een Wallac microbeta scintillatieteller.
In vivo

Administration of SB 415286 (~10 mg/kg twice daily) reduces the extent and degree of the trinitrobenzene sulphonic acid (TNBS)-provoked colonic inflammation in the rat, and reduces the fall in body weight, which is related to downregulation of NF-κB activity, involved in the generation of proinflammatory mediators. Treatment with this compound at 1 mg/kg significantly delays the growth of Neuro-2A cells in vivo in nude mice.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15753396/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15905881/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16314851/
  • [7] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18342477/
  • [8] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18938143/
  • [9] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20920357/
  • [10] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21161565/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot β-catenin / XIAP / Bcl-2 GSK-3β / p53
S2729-WB1
21161565