Home TGF-beta/Smad TGF-beta/Smad Remmer LY364947

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

LY364947 TGF-beta/Smad Remmer

Cat.Nr.: S2805

LY364947 (HTS 466284) is een potente ATP-competitieve remmer van TGFβR-I met een IC50 van 59 nM in een celvrije test, en toont een 7-voudige selectiviteit over TGFβR-II.
LY364947 TGF-beta/Smad Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 272.3

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.93%
99.93

Celkweek, behandeling & werkconcentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
mink Mv1Lu lung cells Function assay Inhibition of TGFbeta R1 induced transcriptional activation of p3TP-Lux in mink Mv1Lu lung cells, IC50=0.04 μM
Sf9 cells Function assay Inhibition of human Transforming growth factor (TGF) beta-1 receptor (T204D mutation) autophosphorylation in Sf9 cells, IC50=0.051 μM
Sf9 cells Function assay Inhibition of recombinant human TGFbeta R1 expressed in Sf9 cells, IC50=0.059 μM
HepG2 cells Function assay Inhibition of TGF-beta-induced expression of PAI-luciferase reporter in HepG2 cells, IC50=0.06 μM
NIH3T3 cells Function assay Inhibitory activity against TGF-beta-stimulated proliferation in NIH3T3 cells, IC50=0.081 μM
Sf9 cells Function assay Inhibition of recombinant human TGFbeta R2 expressed in Sf9 cells, IC50=0.4 μM
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 272.3 Formule

C17H12N4

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 396129-53-6 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen HTS 466284 Smiles C1=CC=C2C(=C1)C(=CC=N2)C3=C(NN=C3)C4=CC=CC=N4

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 4 mg/mL (14.68 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
TGFβRI
(Cell-free assay)
59 nM
RIPK2
(Cell-free assay)
0.11 μM
CK1δ
(Cell-free assay)
0.22 μM
TGFβRII
(Cell-free assay)
0.4 μM
MLK-7K
(Cell-free assay)
1.4 μM
In vitro
LY364947 is an ATP competitive and tight-binding inhibitor, inhibiting phosphorylation of P-Smad3 by TGFβR-I kinase with Ki of 28 nM. This compound inhibits in vivo Smad2 phosphorylation within the NMuMg cells with IC50 of 135 nM. It reverses TGF-β-mediated growth inhibition in NMuMg cells with IC50 of 0.218 μM. This chemical potentiates the xVent2-lux BMP4 response in NMuMg cells by 30% at concentrations as low as 0.25 μM. It (2 μM) prevents TGF-β-induced epithelial−mesenchymal transition in NMuMg cells. This compound (3 μM) induces expression of Prox1 and LYVE-1 in almost all HDLECs after 24 hours. It promotes nuclear export of Foxo3a, with low Smad2/3 and high Akt phosphorylation levels in leukaemia-initiating cells. This chemical (< 20 μM) suppresses leukaemia-initiating cells colony-forming ability after co-culture with OP-9 stromal cells.
Kinase Assay
Filterbindingstest
De IC50 van LY364947 bij verschillende enzymconcentraties wordt bepaald met behulp van de filterbindingstest. Typisch worden 40 μL reacties in 50 mM HEPES bij pH 7.5, 1 mM NaF, 200 μM pKSmad3(−3), en 50 mM ATP die een titratie van elke remmer bevatten met concentraties van 1600, 800, 400, 200, 100, 50, 25 en 0 nM, gedurende 30 min bij 30 °C geïncubeerd. De IC50 wordt berekend met behulp van een niet-lineaire regressiemethode met GraphPad Prism software. Het bindingstype wordt bepaald door de correlatie tussen enzymconcentraties en IC50-waarden uit te zetten.
In vivo
LY364947 (1 mg/kg i.p.) accelerates lymphangiogenesis, as evidence by significantly increased the LYVE-1-positive areas, in a mouse model of chronic peritonitis. This compound significantly increases the LYVE-1-positive areas in tumor tissues in tumor xenograft models using BxPC3 pancreatic adenocarcinoma cells. This chemical increases p-Akt and decreases nuclear Foxo3a in leukaemia-initiating cells in CML-affected mice.
Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18310502/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20130650/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20080567/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot FOXC2 / p-Smad / Smad / p-p38 / p38 / p-ATF2 / ATF2
S2805-WB1
26804168
Immunofluorescence TEEB
S2805-IF1
31387632