Home MAPK Raf Remmer GW5074

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

GW5074 Raf Remmer

Cat.Nr.: S2872

GW5074 is een krachtige en selectieve c-Raf-remmer met een IC50 van 9 nM, er wordt geen effect op de activiteiten van JNK1/2/3, MEK1, MKK6/7, CDK1/2, c-Src, p38 MAP, VEGFR2 of c-Fms waargenomen. Deze verbinding remt LK-geïnduceerde apoptose.
GW5074 Raf Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 520.94

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: S287201 DMSO]104 mg/mL]false]Water]Insoluble]false]Ethanol]Insoluble]false Zuiverheid: 99.80%
99.80

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 520.94 Formule

C15H8Br2INO2

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 220904-83-6 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1=CC2=C(C=C1I)C(=CC3=CC(=C(C(=C3)Br)O)Br)C(=O)N2

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 104 mg/mL (199.63 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
C-Raf
(Cell-free assay)
9 nM
In vitro

GW5074 is a potent and specific inhibitor of c-Raf with IC50 of 9 nM and has no effect of MKK6, MKK7, p38 MAP kinase and cdks in vitro. However, treatment of neuronal cultures with this compound permits accumulation of activating modifications on c-Raf and also B-Raf. The inhibition of LK-induced apoptosis by this inhibitor in cerebellar granule neurons is not MEK-ERK-dependent. This chemical delays down-regulation of Akt activity but inhibits apoptosis by an Akt-independent mechanism. It affects Ras, nuclear factor-kappa B and c-jun. This compound inhibits cell death caused by neurotoxins in granule cells and other neuronal types.

Kinase Assay
Affiniteitsbepaling
Over het algemeen worden in vitro kinase assays uitgevoerd met gezuiverde kinase en synthetische substraten onder standaardomstandigheden met behulp van de Kinase Profiling-service van Upstate Biotechnology. Kort gezegd wordt voor elke assay 5-10 mU gezuiverde kinase gebruikt. Voor GSK3β, cdk1, cdk2, cdk3, cdk5 wordt de kinase geïncubeerd met 1 μM GW5074 in een buffer die 8 mM MOPS, pH 7,2, 0,2 mM EDTA, 10 mM magnesiumacetaat en [c- 33P-ATP] bevat gedurende 40 min bij kamertemperatuur. Kinase-activiteit wordt gekwantificeerd door 33P-incorporatie te meten door een aliquot op P30-filters te deppen, te wassen in 50 mM fosforzuur en scintillantietelling. De buffersamenstelling voor c-Raf, JNK1, JNK2, JNK3, MEK1, MKK6, MKK7 is 50 mM Tris pH 7,5, 0,1 mM EGTA, 10 mM magnesiumacetaat en [c- 33P-ATP]. De gebruikte peptidesubstraten zijn als volgt: Voor c-Raf, 0,66 mg/mL MBP; voor cdks, 0,1 mg/mL histone H1; voor JNKs, 3 μM ATF2; voor MEK1, 1 μM MAPK2; voor MKK6, 1 μM SAPK2a en voor MKK7, 2 μM JNK1α.
In vivo

GW5074 is protective in an in vivo experimental model of Huntington’s disease. This compound (5 mg/Kg) completely prevented extensive bilateral striatal lesions induced by 3-NP in mice.  It suppresses sidestream smoke-induced airway hyperresponsiveness in mice.

Referenties

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot p-Raf-1 / Raf-1 / p-c-Jun / c-Junc / c-Fos / P-gp
S2872-WB1
28212576