Home Transmembrane Transporters CFTR Modulator VX-809 (Lumacaftor)

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

VX-809 (Lumacaftor) CFTR Modulator

Cat.Nr.: S1565

Lumacaftor (VX-809, VRT 826809) corrigeert CFTR-mutaties die veel voorkomen bij cystische fibrose door de rijping van mutant CFTR (F508del-CFTR) te verhogen, EC50 van 0,1 μM in schildkliercellen van Fisher-ratten. Fase 3.
VX-809 (Lumacaftor) CFTR Modulator Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 452.41

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.87%
99.87

Celkweek, behandeling & werkconcentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
CFBE41o Corrector assay 24 hrs Corrector activity at CFTR F508-del mutant (unknown origin) expressed in human CFBE41o cells harboring HS-YFP preincubated for 24 hrs followed by forskolin/genistein stimulation for 30 mins by fluorescence assay, EC50 = 2.5704 μM. 29272749
FRT Corrector assay 25 mins Corrector activity at human CFTR F508 deletion mutant expressed in FRT cells incubated for 25 mins with forskolin by YFP-based fluorescence analysis relative to control, EC50 = 2.6 μM. 26561003
TC32 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells 29435139
U-2 OS qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
BT-37 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for BT-12 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
fibroblast cells qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for control Hh wild type fibroblast cells 29435139
Rh41 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells 29435139
Rh30 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh30 cells 29435139
U-2 OS qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for U-2 OS cells 29435139
Rh41 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh41 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for RD cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
Rh18 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells 29435139
CFBE41o Corrector assay 1 uM 24 hrs Corrector activity at CFTR F508-del mutant (unknown origin) expressed in human CFBE41o cells harboring HS-YFP assessed as increase in matured protein levels at cell surface at 1 uM after 24 hrs by electrophoretic mobility assay 29272749
HBE Corrector assay Corrector activity at CFTR F508del/F508del mutant in primary HBE cells assessed as increase in chloride ion current across apical membrane measured 18 to 24 hrs post compound treatment on basolateral side of cells in presence of channel potentiator GLPG18 29251932
CFBE41o Corrector assay Corrector activity at CFTR F508del mutant (unknown origin) expressed in human CFBE41o cells assessed as increase in fully glycosylated protein by western blot analysis 26041577
CFBE41o Corrector assay 1 uM 24 hrs Corrector activity at CFTR F508del mutant (unknown origin) expressed in human CFBE41o cells assessed as increase in size of cAMP-dependent current at 1 uM after 24 hrs measured at +100 mV by whole cell patch clamp assay 26041577
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 452.41 Formule

C24H18F2N2O5

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 936727-05-8 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen VRT 826809 Smiles CC1=C(N=C(C=C1)NC(=O)C2(CC2)C3=CC4=C(C=C3)OC(O4)(F)F)C5=CC(=CC=C5)C(=O)O

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 90 mg/mL (198.93 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 13 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Kenmerken
Higher specificity and efficacy relative to other CFTR defect drugs.
Targets/IC50/Ki
F508del-CFTR
(Fisher rat thyroid cells)
0.1 μM(EC50)
In vitro

Lumacaftor (VX-809) werkt op het niveau van het ER om een fractie van het F508del-CFTR toe te staan een correct gevouwen vorm aan te nemen, het ER te verlaten en naar het celoppervlak te mobiliseren voor normaal functioneren. In Fischer rat thyroid (FRT) cellen die F508del-CFTR tot expressie brengen, verbetert deze behandelingsverbinding de maturatie van F508del-CFTR aanzienlijk met 7,1 maal bij een EC50 van 0,1 μM, en verbetert het F508del-CFTR-gemedieerd chloride-transport met ongeveer 5 maal bij een EC50 van 0,5 μM, terwijl VRT-768 hogere EC50-waarden heeft van respectievelijk 7,9 μM en 16 μM. In HEK-293 cellen die F508del-CFTR tot expressie brengen, verhoogt het (3 μM) de uittreding van F508del-CFTR uit het ER met 6 maal, tot niveaus die vergelijkbaar zijn met 34% van CFTR. In primaire humane bronchiale epitheelcellen (HBE) met de F508del-CFTR mutatie, verhoogt het agens de CFTR-maturatie en verbetert het de chloride-secretie met respectievelijk een EC50 van 350 nM en 81 nM, wat effectiever is dan Corr-4a en VRT-325. F508del-CFTR gecorrigeerd door dit middel vertoont een single-channel openingswaarschijnlijkheid van 0,39, vergelijkbaar met de 0,40 van normaal CFTR. In tegenstelling tot VX-770 is het geen CFTR-potentiator, aangezien acute toevoeging geen effect heeft op de F508del-CFTR-functie. In tegenstelling tot VRT-325 en Corr-4a verbetert het de verwerking van de normale of gemuteerde vormen van hERG of P-gp niet, evenals andere ziekteverwekkende, verkeerd gelokaliseerde eiwitten, waaronder α1-antitrypsine Z-mutant (E342K-α1-AT) of N370S-β-glucosidase, wat suggereert dat het specifiek is voor CFTR. In combinatie met VRT-325 of Corr-4a heeft het een additief effect op het CFTR-gemedieerd chloride-transport in gekweekte F508del-HBE.

Kinase Assay
F508del-CFTR rijping
FRT-cellen die stabiel F508del-CFTR tot expressie brengen, worden gedurende 48 uur behandeld met toenemende concentraties VX-809 (Lumacaftor). Na incubatie worden de cellen geoogst in ijskoude D-PBS-oplossing (zonder calcium en magnesium) en gepelleteerd bij 1.000 × g op 4 °C. Celpellets worden gedurende 30 minuten op ijs gelyseerd in 1% Nonidet P-40, 0,5% natriumdeoxycholaat, 200 mM NaCl, 10 mM Tris, pH 7,8 en 1 mM EDTA plus protease-inhibitiemengsel (1:250). Lysaten worden gedurende 10 minuten gecentrifugeerd bij 10.000 × g op 4 °C om kernen en onoplosbaar materiaal te pelletiseren. Ongeveer 12 μg totaal eiwit wordt gedurende 5 minuten op 37 °C verwarmd in Laemmli-buffer met 5% β-mercapto-ethanol en geladen op een 3% tot 8% Tris-acetaatgel. De gel wordt overgebracht op nitrocellulose en verwerkt voor Western blotting met behulp van een monoklonaal CFTR-antilichaam of een polyklonaal antilichaam tegen GAPDH. Blots worden ontwikkeld door middel van verbeterde chemiluminescentie. Kwantificering van de relatieve hoeveelheden van banden C en GAPDH wordt uitgevoerd met behulp van NIH ImageJ-analyse van gescande films.
In vivo

VX-809 (Lumacaftor) (VRT 826809) is een CFTR-modulator die de vouwing en het transport van het CFTR-eiwit corrigeert.
Referenties

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Immunofluorescence CFTR / USP13 Cell surface kAE1 / kAE1
S1565-IF1
30618756

Informatie klinische proef (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Rekrutering Aandoeningen Sponsor/Medewerkers Startdatum Fasen
NCT03512119 Completed
Cystic Fibrosis Homozygous for Phe 508 Del CFTR|Glucose Intolerance or Newly Diagnosis Diabetes
University Hospital Strasbourg France
 February 11 2016 --
NCT02589236 Completed
Cystic Fibrosis
Nivalis Therapeutics Inc.|Medidata Solutions
 November 2015 Phase 2
NCT02514473 Completed
Cystic Fibrosis
Vertex Pharmaceuticals Incorporated
 July 2015 Phase 3
NCT01899105 Completed
Cystic Fibrosis
Vertex Pharmaceuticals Incorporated
 July 2013 Phase 1