Home TGF-beta/Smad PKC Inhibitor Enzastaurin

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

Enzastaurin PKC Inhibitor

Cat.Nr.: S1055

Enzastaurin is een krachtige selectieve PKCβ-remmer met een IC50 van 6 nM in celvrije assays, met een 6 tot 20-voudige selectiviteit ten opzichte van PKCα, PKCγ en PKCε. Fase 3.
Enzastaurin PKC Inhibitor Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 515.61

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.98%
99.98

Celkweek, behandeling & werkconcentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 515.61 Formule

C32H29N5O2

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 170364-57-5 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen LY317615 Smiles CN1C=C(C2=CC=CC=C21)C3=C(C(=O)NC3=O)C4=CN(C5=CC=CC=C54)C6CCN(CC6)CC7=CC=CC=N7

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 14 mg/mL (27.15 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
PKCβ
(Cell-free assay)
6 nM
PKCα
(Cell-free assay)
39 nM
PKCγ
(Cell-free assay)
83 nM
PKCε
(Cell-free assay)
110 nM
In vitro

Toepassing van Enzastaurin resulteert in een duidelijke dosisafhankelijke remming van de groei in alle onderzochte MM-cellijnen, waaronder MM.1S, MM.1R, RPMI 8226 (RPMI), RPMI-Dox40 (Dox40), NCI-H929, KMS-11, OPM-2 en U266, met een IC50 van 0,6-1,6 μM. Deze verbinding heeft een directe invloed op menselijke tumorcellen, induceert apoptose en onderdrukt de proliferatie in gekweekte tumorcellen. Het onderdrukt ook de fosforylering van GSK3βser9, ribosomaal eiwit S6S240/244 en AKTThr308, terwijl het geen direct effect heeft op VEGFR-fosforylering. Deze chemische stof verhoogt de apoptose in maligne lymfocyten van CTCL. Bij combinatie met GSK3-remmers vertoonde het een verbetering van de cytotoxiciteitsniveaus. Behandeling met een combinatie van deze verbinding en de GSK3-remmer AR-A014418 leidde tot verhoogde niveaus van β-catenine totaal eiwit en β-catenine-gemedieerde transcriptie. Het blokkeren van β-catenine-gemedieerde transcriptie of small hairpin RNA (shRNA) knockdown van β-catenine induceerde dezelfde cytotoxische effecten als die van de stof in combinatie met AR-A014418. Bovendien verminderde behandeling met de stof en AR-A014418 de mRNA-niveaus en oppervlakte-expressie van CD44.

Kinase Assay
Kinase-inhibitieassays
De inhibitie van PKCβII-, PKCα-, PKCε- of PKCγ-activiteit door Enzastaurin wordt bepaald met behulp van een filterplaat-assayformaat waarbij de incorporatie van 33P in het substraat myeline basisch eiwit wordt gemeten. Reacties worden uitgevoerd in reactievolumes van 100 μL in 96-well polystyreenplaten met de volgende eindcondities: 90 mM HEPES (pH 7,5), 0,001% Triton X-100, 4% DMSO, 5 mM MgCl2, 100 μM CaCl2, 0,1 mg/mL fosfatidylserine, 5 μg/mL diacetylglycerol, 30 μM ATP, 0,005 μCi/μL 33ATP, 0,25 mg/mL myeline basisch eiwit, seriële verdunningen van deze verbinding (1-2.000 nM) en recombinante humane PKCβII-, PKCα-, PKCε- of PKCγ-enzymen (respectievelijk 390, 169, 719 of 128 pM). De reacties worden gestart door toevoeging van het enzym en 60 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd. Vervolgens worden ze gequenched met 10% H3PO4, overgebracht naar multiscreen anionische fosfocellulose 96-well filterplaten, 30 tot 90 minuten geïncubeerd, gefilterd en gewassen met 4 volumes 0,5% H3PO4 op een vacuümmannifold. Scintillatiecocktail wordt toegevoegd en de platen worden afgelezen op een Microbeta-scintillatieteller. IC50-waarden worden bepaald door een logistische vergelijking met drie variabelen te fitten op de 10-punts dosis-responsdata met behulp van ActivityBase 4.0.
In vivo

Behandeling van xenografts met Enzastaurin en bestraling produceerde grotere reducties in de dichtheid van microvaten dan elk van de behandelingen alleen. De afname in microvatdichtheid kwam overeen met een vertraagde tumorgroei.

Referenties

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot p27 / Cyclin D1 / Bcl-2 / Survivin p-ERK / ERK / p-AKT / AKT PKCα / PKCβ / PKCδ / PKCε / PKCθ / p-PKCε / p-PKCθ p-eIF2a / eIF2a / p-ATF2 / ATF2 / CHOP / p21 / ATF6 / IRE1α
S1055-WB1
22253748
Growth inhibition assay Cell viability
S1055-viability1
22253748

Informatie klinische proef (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Rekrutering Aandoeningen Sponsor/Medewerkers Startdatum Fasen
NCT03263026 Completed
Diffuse Large B-Cell Lymphoma
Denovo Biopharma LLC
 March 20 2018 Phase 3
NCT01432951 Completed
Solid Tumor|Lymphoma Malignant
Eli Lilly and Company
 November 2011 Phase 1
NCT01388335 Completed
Solid Tumor|Lymphoma Malignant
Eli Lilly and Company
 August 2011 Phase 1
NCT00744991 Completed
Cutaneous T-Cell Lymphoma
Eli Lilly and Company
 September 2008 Phase 2
NCT00709995 Completed
Metastatic Renal Cell Carcinoma
Eli Lilly and Company
 June 30 2008 Phase 2