Home MAPK MEK Remmer (E/Z)-BIX02188

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

(E/Z)-BIX02188 MEK Remmer

Cat.Nr.: S1530

(E/Z)-BIX02188 is een selectieve remmer van MEK5 met een IC50 van 4,3 nM, remt ook de katalytische activiteit van ERK5 met een IC50 van 810 nM, en remt geen nauw verwante kinasen MEK1, MEK2, ERK2 en JNK2.
(E/Z)-BIX02188 MEK Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 412.48

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.04%
99.04

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 412.48 Formule

C25H24N4O2

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 1094614-84-2 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles CN(C)CC1=CC(=CC=C1)N=C(C2=CC=CC=C2)C3=C(NC4=C3C=CC(=C4)C(=O)N)O

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 43 mg/mL (104.24 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 3 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
MEK5
4.3 nM
In vitro

BIX02188 blokkeert significant de katalytische activiteit van MEK5 met een IC50 van 4,3 nM en remt de katalytische activiteit van ERK5 met een IC50 van 0,83 μM. Het vertoont geen activiteit tegen nauw verwante kinasen MEK1, MEK2, ERK1, p38α, JNK2, TGFβR1, EGFR en STK16 met IC50-waarden van 1,8 μM voor TGFβR1, 3,9 μM voor p38α en >6,3 μM voor andere kinasen. Voorbehandeling met BIX02188 remt de sorbitol-geïnduceerde fosforylering van ERK5 in HeLa-cellen op een dosisafhankelijke manier en vertoont geen remmende activiteit tegen de fosforylering van ERK1/2, p38 en JNK1/2 MAPKs. Een behandeling met BIX02188 alleen gedurende 24 uur in HeLa- of HEK293-cellen vertoont geen cytotoxisch effect. BIX02188 remt transcriptionele activering van MEF2C via de MEK5/ERK5-signaalcascade in een actief MEK5/ERK5/MEF2C-gedreven luciferase-expressiesysteem in HeLa- en HEK293-cellen met IC50-waarden van respectievelijk 1,15 μM en 0,82 μM.BIX02188 remt ook de fosforylering van BMK1 in rundermicrovasculaire endotheelcellen (BLMEC's) die gestimuleerd worden met 300 μM H2O2, op een dosisafhankelijke manier, met een IC50 van 0,8 μM, specifiek door de MEK5-signaalroute te blokkeren. BIX02188 keert het remmende effect op TNF-mediatie volledig om; JNK-activering had een vergelijkbaar effect op BMK1-remming, wat suggereert dat het TNF-signalering remt via activering van de MEK5-BMK1-signaalroute.
Kinase Assay
Katalytische assay
MEK5-eiwit geïsoleerd uit een baculovirus-expressiesysteem wordt gebruikt om kinaseactiviteit te meten met behulp van PKLight ATP Detection Reagent. De test wordt uitgevoerd met 15 nM GST-MEK5 en 0,75 μM ATP in een testbuffer bestaande uit 25 mM Hepes, pH 7,5, 10 mM MgCl2, 50 mM KCl, 0,2% BSA, 0,01% CHAPS, 100 μM Na3VO4, 0,5 mM DTT en 1% DMSO in aanwezigheid van variërende concentraties van BIX02188. Het kinase-reactiemengsel wordt 90 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd, gevolgd door toevoeging van 10 μL van een ATP-detectiereagens gedurende 15 minuten. Het relatieve lichteenheid (RLU)-signaal wordt gemeten en de RLU-signalen worden omgezet in percentage van controle (POC)-waarden voor de bepaling van de IC50-waarde.
Referenties