Home PI3K/Akt/mTOR Akt Remmer AT7867

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

AT7867 Akt Remmer

Cat.Nr.: S1558

AT7867 is een krachtige ATP-competitieve remmer van Akt1/2/3 en p70S6K/PKA met een IC50 van respectievelijk 32 nM/17 nM/47 nM en 85 nM/20 nM in celvrije assays; deze verbinding vertoont weinig activiteit buiten de AGC kinasefamilie.
AT7867 Akt Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 337.85

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.97%
99.97

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 337.85 Formule

C20H20ClN3

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 857531-00-1 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1CNCCC1(C2=CC=C(C=C2)C3=CNN=C3)C4=CC=C(C=C4)Cl

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 68 mg/mL (201.27 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 5 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
Akt2
(Cell-free assay)
17 nM
PKA
(Cell-free assay)
20 nM
Akt1
(Cell-free assay)
32 nM
Akt3
(Cell-free assay)
47 nM
p70 S6K
(Cell-free assay)
85 nM
RSK1
(Cell-free assay)
>100 nM
In vitro
AT7867 also inhibits structurally related AGC kinases p70S6K and PKA with IC50 of 20 nM and 85 nM, respectively. This compound shows ATP-competitive activity to Akt2 with Ki of 18 nM. It exhibits antiproliferation in cell lines with PTEN or PIK3CA mutations and shows great potent to MES-SA, MDA-MB-468, MCF-7, HCT116 and HT29 with IC50 of 0.94 μM, 2.26 μM, 1.86 μM, 1.76 μM and 3.04 μM, respectively. This chemical also suppresses the cell growth of U87MG, PC-3 and DU145 cells with IC50 of 8.22 μM, 10.37 μM and 11.86 μM, respectively. It suppresses Akt activity by inhibiting phosphorylation of GSK-3β in human tumor cells with IC50 of 2-4 μM. This compound also induces the phosphorylation of the following Akt direct substrates including proapoptotic transcription factors FKHR (FoxO1a), FKHRL1 (FoxO3a) and the downstream target S6RP in U87MG cells.
Kinase Assay
In vitro kinase assays
Kinase assays voor Akt2, PKA, p70S6K en CDK2/cycline A worden allemaal uitgevoerd in een radiometrisch filterbindingsformaat. Assayreacties worden opgezet in aanwezigheid van AT7867. Voor Akt2 worden het Akt2-enzym en 25 μM Aktide-2T-peptide (HARKRERTYSFGHHA) geïncubeerd in 20 mM MOPS (pH 7,2), 25 mM β-glycerofosfaat, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM natriumorthovanadaat, 1 mM DTT, 10 μg/mL runder serumalbumine en 30 μM ATP (1,16 Ci/mmol) gedurende 4 uur. Voor PKA worden het PKA-enzym en 50 μM peptide (GRTGRRNSI) geïncubeerd in 2 mM MOPS (pH 7,2), 25 mM β-glycerofosfaat, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM orthovanadaat, 1 mM DTT en 40 μM ATP (0,88 Ci/mmol) gedurende 20 minuten. Voor p70S6K worden het p70S6K-enzym en 25 μM peptidesubstraat (AKRRRLSSLRA) geïncubeerd in 10 mM MOPS (pH 7), 0,2 mM EDTA, 1 mM MgCl2, 0,01% β-mercaptoethanol, 0,1 mg/mL runder serumalbumine, 0,001% Brij-35, 0,5% glycerol en 15 μM ATP (2,3 Ci/mmol) gedurende 60 min. Voor CDK2 worden het CDK2/cycline A-enzym en 0,12 μg/mL histone H1 geïncubeerd in 20 mM MOPS (pH 7,2), 25 mM β-glycerofosfaat, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM natriumorthovanadaat, 1 mM DTT, 0,1 mg/mL runder serumalbumine en 45 μM ATP (0,78 Ci/mmol) gedurende 4 uur. De assayreacties worden gestopt door een overmaat orthofosforzuur toe te voegen, en het gestopte reactiemengsel wordt vervolgens overgebracht naar Millipore MAPH filterplaten en gefilterd. De platen worden vervolgens gewassen, scintillant wordt toegevoegd en radioactiviteit wordt gemeten door scintillatietelling op een Packard TopCount. IC50-waarden worden berekend uit replicatiecurven met behulp van GraphPad Prism-software. Akt1- en Akt3-enzymassays worden uitgevoerd.
In vivo
AT7867 shows bioavailability of 44% in mice by p.o. route. This compound could increase the cleaved PARP in MES-SA xenografts at 20 mg/kg i.p. or 90 mg/kg p.o.. It significantly inhibits the tumor growth in MES-SA xenografts or U87MG xenografts with T/C of 0.37 and 0.51, respectively.
Referenties