Home Cell Cycle PLK Remmer Volasertib (BI6727)

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

Volasertib (BI6727) PLK1-remmer

Cat.Nr.S2235

Volasertib is een zeer potente Plk1-remmer met een IC50 van 0,87 nM in een celvrije test. Het vertoont een 6- en 65-voudig grotere selectiviteit tegen Plk2 en Plk3. Volasertib induceert celcyclusarrest en apoptose in verschillende kankercellen. Fase 3.
Volasertib (BI6727) PLK Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 618.81

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.78%
99.78

Celkweek, behandeling & werkconcentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
KASUMI-1 Growth Inhibition Assay 72 h IC50=170±51 nM 25576074
KG-1 Growth Inhibition Assay 72 h IC50=150±67 nM 25576074
MOLM-13 Growth Inhibition Assay 72 h IC50=57±44 nM 25576074
MV-4-11 Growth Inhibition Assay 72 h IC50=16±6 nM 25576074
NOMO-1 Growth Inhibition Assay 72 h IC50=145±7 nM 25576074
OCI-AML3 Growth Inhibition Assay 72 h IC50=90±51 nM 25576074
SKM-1 Growth Inhibition Assay 72 h IC50=95±52 nM 25576074
THP-1 Growth Inhibition Assay 72 h IC50=56±39 nM 25576074
MCF7/LTED  Growth Inhibition Assay 2.5-40 nM 5 d inhibits cell growth in a dose-dependent manner 25480943
HCC1428/LTED Growth Inhibition Assay 2.5-40 nM 5 d inhibits cell growth in a dose-dependent manner 25480943
A431 Growth Inhibition Assay 0-30 nM 1-4 d inhibits cell growth in both dose- and time-dependent manner 23891096
FaDu  Growth Inhibition Assay 0-1000 nM 1-4 d inhibits cell growth in both dose- and time-dependent manner 23891096
SF188 Growth Inhibition Assay 50-150 nM 72 h DMSO inhibits cell proliferation 23887645
T98G Growth Inhibition Assay 50-150 nM 72 h DMSO inhibits cell proliferation 23887645
DU145 Growth Inhibition Assay 10/50/250 nM 24 h IC50<10 nM 23884428
LNCaP Growth Inhibition Assay 10/50/250 nM 24 h IC50<10 nM 23884428
PC3 Growth Inhibition Assay 10/50/250 nM 24 h IC50∼600 nM 23884428
RT4 Growth Inhibition Assay 48 h IC50=111.27 nM 23792639
5637 Growth Inhibition Assay 48 h IC50=1165.14 nM 23792639
T24 Growth Inhibition Assay 48 h IC50=204.91 nM 23792639
KMCH-1 Apoptosis Assay 200 nM 24 h induces apoptosis 23703673
Mz-ChA-1 Apoptosis Assay 200 nM 24 h induces apoptosis 23703673
HUCCT-1 Apoptosis Assay 200 nM 24 h induces apoptosis 23703673
HCT 116 Growth Inhibition Assay EC50 = 23 nM 19383823
NCI-H460 Growth Inhibition Assay EC50 = 21 nM 19383823
BRO Growth Inhibition Assay EC50 = 11 nM 19383823
GRANTA-519 Growth Inhibition Assay EC50 = 15 nM 19383823
HL-60 Growth Inhibition Assay EC50 = 32 nM 19383823
THP-1 Growth Inhibition Assay EC50 = 36 nM 19383823
Raji Growth Inhibition Assay EC50 = 37 nM 19383823
TC32 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells 29435139
U-2 OS qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
BT-37 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
Rh41 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells 29435139
Rh30 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh30 cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
Rh18 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells 29435139
SKBR3 Cytotoxicity assay 24 hrs Cytotoxicity against human SKBR3 cells after 24 hrs by MTT assay 29288948
MDA-MB-231 Cytotoxicity assay 24 hrs Cytotoxicity against human MDA-MB-231 cells after 24 hrs by MTT assay 29288948
MDA-MB-468 Cytotoxicity assay 24 hrs Cytotoxicity against human MDA-MB-468 cells after 24 hrs by MTT assay 29288948
BT474 Cytotoxicity assay 24 hrs Cytotoxicity against human BT474 cells after 24 hrs by MTT assay 29288948
ZR-75-1 Cytotoxicity assay 24 hrs Cytotoxicity against human ZR-75-1 cells after 24 hrs by MTT assay 29288948
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 618.81 Formule

C34H50N8O3

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 755038-65-4 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen BI 6727 Smiles CCC1C(=O)N(C2=CN=C(N=C2N1C(C)C)NC3=C(C=C(C=C3)C(=O)NC4CCC(CC4)N5CCN(CC5)CC6CC6)OC)C

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 35 mg/mL (56.56 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Kenmerken
A high volume of distribution, indicating good tissue penetration, and a long terminal half-life.
Targets/IC50/Ki
PLK1
(Cell-free assay)
0.87 nM
In vitro

Net als BI2536 is BI6727 een ATP-competitieve kinaseremmer uit de dihydropteridinone-klasse van verbindingen. Naast Plk1 remt deze verbinding ook krachtig twee nauw verwante kinasen Plk2 en Plk3 met een IC50 van respectievelijk 5 nM en 56 nM. Deze chemische stof vertoont bij concentraties tot 10 μM geen remmende activiteit tegen een panel van >50 andere kinasen. Het remt de proliferatie van meerdere cellijnen afkomstig van verschillende kankerweefsels, waaronder HCT116, NCI-H460, BRO, GRANTA-519, HL-60, THP-1 en Raji-cellen met een EC50 van respectievelijk 23 nM, 21 nM, 11 nM, 15 nM, 32 nM, 36 nM en 37 nM. Deze behandeling met de verbinding (100 nM) in NCI-H460-cellen induceert een accumulatie van mitotische cellen met monopolaire spoelen en een positieve kleuring voor histone H3 fosfoserine 10, wat bevestigt dat cellen vroeg in de M-fase worden gearresteerd, gevolgd door inductie van apoptose. Lage nanomolaire concentraties van deze remmer vertonen een krachtige remmende activiteit tegen neuroblastoom (NB) tumor-initiërende cellen (NB TIC) met een EC50 van 21 nM, terwijl slechts micromolaire concentraties ervan cytotoxisch zijn voor normale pediatrische neurale stamcellen. Het induceert groeiremming van Daoy- en ONS-76-medulloblastoomcellen, vergelijkbaar met BI 2536.

Kinase Assay
In vitro kinase-assays
Recombinant humaan Plk1 (residuen 1-603) wordt tot expressie gebracht als NH2-terminaal, GST-gelabeld fusie-eiwit met behulp van een baculoviraal expressiesysteem en gezuiverd door affiniteitschromatografie met glutathion-agarose. Enzymactiviteitsassays voor Plk1 worden uitgevoerd in aanwezigheid van seriek verdunde deze verbinding met 20 ng recombinant kinase en 10 μg caseïne uit koemelk als substraat. Kinase-reacties worden uitgevoerd in een eindvolume van 60 μL gedurende 45 minuten bij 30 °C [15 mM MgCl2, 25 mM MOPS (pH 7.0), 1 mM DTT, 1% DMSO, 7.5 μM ATP, 0.3 μCi γ-32P-ATP]. Reacties worden beëindigd door toevoeging van 125 μL ijskoude 5% TCA. Na overbrenging van de precipitaten naar MultiScreen gemengde ester cellulose filterplaten, worden de platen gewassen met 1% TCA en radiometrisch gekwantificeerd. Dosis-respons-curven worden gebruikt voor het berekenen van de IC50-waarde.
In vivo

Toediening van BI6727 remt significant de groei van meerdere menselijke carcinoom-xenografts, waaronder HCT116, NCI-H460 en taxaan-resistent CXB1 coloncarcinoom, vergezeld van een toename van de mitotische index en een toename van apoptose. In in vivo studies vertoont deze verbinding een beter toxiciteits- en farmacokinetisch profiel in vergelijking met BI2536.

Referenties

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot Fibronectin / β-integrin / p-vimentin / Vimentin / p-HH3 p-c-Met / c-Met / p-FAK / FAK / p-Src / Src PARP / c-myc p-AKT / AKT / p-MAPK / MAPK p-PLK1 / PLK1
S2235-WB5
31040125
Immunofluorescence PLK1 / Wee1
S2235-IF1
29108241
Growth inhibition assay Cell viability
S2235-viability1
29383095

Informatie klinische proef (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Rekrutering Aandoeningen Sponsor/Medewerkers Startdatum Fasen
NCT02722135 Withdrawn
Leukemia Myeloid Acute
Boehringer Ingelheim
 November 2016 Phase 1
NCT02721875 Terminated
Myelodysplastic Syndromes
Boehringer Ingelheim
 April 28 2016 Phase 1
NCT02201329 Completed
Myelodysplastic Syndromes|Leukemia Myelomonocytic Chronic
Boehringer Ingelheim
 August 2014 Phase 1
NCT01971476 Completed
Leukemia|Neoplasms
Boehringer Ingelheim
 October 22 2013 Phase 1
NCT01772563 Completed
Neoplasms
Boehringer Ingelheim
 February 4 2013 Phase 1
NCT01662505 Completed
Leukemia Myeloid Acute
Boehringer Ingelheim
 August 2012 Phase 1

Veelgestelde vragen (Frequently Asked Questions)

Vraag 1:
I wonder how to reconstitute it for in vivo studies?

Antwoord:
It can be dissolved in 4% DMSO+Corn oil at 2mg/ml for i.p. injection in mice. For oral administration, this compound can be formulated in hydrochloric acid (0.1 N), and diluted with 0.9% NaCl, or suspended in 0.5% Natrosol 250 hydroxyethyl-cellulose as indicated in the publications. We also suggest the vehicle 30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol for a suspension which we tested in house.