Home MAPK p38 MAPK Remmer PH-797804

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

PH-797804 p38 MAPK Remmer

Cat.Nr.: S2726

PH-797804 is een nieuwe pyridinoneremmer van p38α met een IC50 van 26 nM in een celvrije test; 4 keer selectiever dan p38β en remt JNK2 niet. Fase 2.
PH-797804 p38 MAPK Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 477.3

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.07%
99.07

Celkweek, behandeling & werkconcentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
human U937 cells Function assay Inhibition of p38alpha kinase-dependent HSP-27 phosphorylation in human U937 cells, IC50=0.00105 μM
human monocytes Function assay Antiinflammatory activity in human monocytes assessed as inhibition of LPS-induced TNFalpha production, IC50=0.0034 μM
human PBMC Function assay Antiinflammatory activity in human PBMC assessed as inhibition of LPS-induced TNFalpha release pretreated for 1 hr before LPS treatment measured after 18 hrs, IC50=0.015 μM
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 477.3 Formule

C22H19BrF2N2O3

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 586379-66-0 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles CC1=C(C=C(C=C1)C(=O)NC)N2C(=CC(=C(C2=O)Br)OCC3=C(C=C(C=C3)F)F)C

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 96 mg/mL (201.13 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 20 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
p38α
(Cell-free assay)
26 nM
p38β
(Cell-free assay)
102 nM
In vitro
This compound blocks LPS-induced TNF-α production and p38 kinase activity in the human monocytic U937 cell line, with comparable IC50 of 5.9 nM and 1.1 nM. It has no inhibitory effect on either the JNK pathway (c-Jun phosphorylation) or ERK pathway (ERK phosphorylation) in U937 cells at concentrations up to 1 μM. This chemical inhibits RANKL- and M-CSF-induced osteoclast formation in a concentration-dependent manner, with IC50 of 3 nM in primary rat bone marrow cells. IC50 values for this compound against the following targets have been determined to be greater than 200 μM (unless specified): CDK2, ERK2, IKK1, IKK2, IKKi, MAPKAP2, MAPKAP3, MKK7 (>100 μM), MNK, MSK (>164 μM), PRAK, RSK2, and TBK1, which means the activity of this chemical is specific.
Kinase Assay
P38 kinase test
Een harsvangstassaymethode wordt gebruikt om de fosforylatie van epidermale groeifactorreceptorpeptide (EGFRP) of GST-c-Jun door p38-kinasen te bepalen. Reactiemengsels bevatten 25 mM HEPES, pH 7,5, 10 mM magnesiumacetaat, ATP (bij de aangegeven concentratie), 0,05 tot 0,3 μCi [γ-33P]ATP, 0,8 mM dithiothreitol en ofwel 200 μM EGFRP of 10 μM GST-c-Jun voor p38α-kinasereacties. De reactie wordt geïnitieerd door de toevoeging van 25 nM p38α-kinase om een eindvolume van 50 μl te verkrijgen. De p38α-kinasereacties worden gedurende 30 minuten bij 25 °C geïncubeerd. Onder deze omstandigheden is de productvorming voor beide p38α-kinasen lineair met de tijd. De reactie wordt gestopt en het ongereageerde [γ-33P]ATP wordt verwijderd door de toevoeging van 150 μl AG 1 × 8 ionenuitwisselingshars in 900 mM natriumformiaat, pH 3,0. Eenmaal grondig gemengd, worden de oplossingen 5 minuten laten staan. Een aliquot van 50 μl kopvolume dat het gefosforyleerde substraat bevat, wordt uit het mengsel verwijderd en overgebracht naar een 96-well plaat. MicroScint-40 scintillatiecocktail (150 μL) wordt aan elk putje toegevoegd en de radioactiviteit wordt gekwantificeerd met behulp van een TopCount NXT microplaat-scintillatie- en luminescentieteller.
In vivo
Orally dosing of PH-797804 effectively inhibits acute inflammatory responses induced by systemically administered endotoxin in both rat and cynomolgus monkeys. This compound treatment for 10 days demonstrates robust anti-inflammatory activity in chronic disease models, significantly reducing both joint inflammation and associated bone loss in streptococcal cell wall-induced arthritis in rats and mouse collagen-induced arthritis. Dose-response analysis resulted in ED50 values of 0.07 mg/kg and 0.095 mg/kg in rat and cynomolgus monkeys, respectively. It inhibits LPS-induced TNF-α, IL-6, and MK-2 activity in a dose- and concentration-dependent manner in a human endotoxin challenge model.
Referenties

Informatie klinische proef (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Rekrutering Aandoeningen Sponsor/Medewerkers Startdatum Fasen
NCT01217918 Completed
Healthy
Pfizer
 October 2010 Phase 1
NCT00827515 Withdrawn
Pain
Pfizer
 February 2009 Phase 1
NCT00614705 Completed
Neuralgia Postherpetic
Pfizer
 April 2008 Phase 2
NCT00620685 Completed
Arthritis Rheumatoid
Pfizer
 March 2008 Phase 2