Name: Nirogacestat (PF-03084014)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S8018
Rating: 5 (21 reviews)

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.31%

99.31

Gerelateerde doelwitten	HDAC Caspase Proteasome MMP HCV Protease Cysteine Protease Tyrosinase HIV Protease DPP Serine Protease
Overige Secretase Inhibitoren	DAPT RO4929097 (RG-4733) LY411575 Dibenzazepine (YO-01027) MK-0752 Avagacestat (BMS-708163) Semagacestat (LY450139) MDL-28170 L-685,458 NGP 555

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht	489.64	Formule	C₂₇H₄₁F₂N₅O	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1290543-63-3	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	PF-3084014			Smiles	CCCC(C(=O)NC1=CN(C=N1)C(C)(C)CNCC(C)(C)C)NC2CCC3=C(C2)C(=CC(=C3)F)F

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 98 mg/mL (200.14 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 49 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	2.400mg/ml (4.90mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 48 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC₅₀/Ki	gamma-secretase (cell-free assay) 6.2 nM
In vitro	Nirogacestat (PF-03084014) inhibits Notch receptor cleavage in cellular assays using HPB-ALL cells that harbor mutations in both the heterodimerization and PEST domains in Notch1 with IC50 of 13.3 nM. It downregulates Notch target genes Hes-1 and cMyc expression in HPB-ALL cells with IC50 of <1 nM and 10 nM, respectively, and inhibits cell growth of a subset of human T-ALL cell lines (HPB-ALL, DND-41, TALL-1, and Sup-T1) through induction of cell cycle arrest and apoptosis with IC50s of 30–100 nM. This compound reduces proliferation of HUVECs with IC50 of 0.5 μM, and decreases the lumen formation with an IC50 value of 50 nM. It (1 μM) has no antiproliferative effect in MX1 cells; however, it inhibits migration by 95%.
Kinase Assay	γ-secretase test
Kinase Assay	Een DNA-fragment dat aminozuren 596 - 695 van de 695-aa-isoform van APP (APP695) en de Flag-sequentie (DYKDDDDK) aan de C-terminus codeert, wordt gegenereerd door PCR-amplificatie met geschikt ontworpen oligonucleotiden en het APP695-cDNA. De Met die dient als de translatie-startplaats is residu 596 van APP695 (het P1-residu met betrekking tot de β-secretase-splitsingsplaats). Dit DNA-fragment wordt ingebracht in het prokaryote expressievector pET2-21b. Het recombinante eiwit, C100Flag, wordt overgeproduceerd in Escherichia coli [stam BL21(DE3)] en gezuiverd door Mono-Q-kolomchromatografie. C100Flag (1,7 μM) wordt geïncubeerd met celmembranen (0,5 mg/mL) in aanwezigheid van CHAPSO, CHAPS (3-[(3-cholamidopropyl)dim-ethylammonio]-1-propanesulfonaat) of Triton X-100 (0, 0,125, 0,25, 0,5 of 1%) in buffer B (50 mM Pipes, pH 7,0y 5mM MgCl₂/5 mM CaCl₂/150 mM KCl) bij 37°C. De reacties worden gestopt door toevoeging van RIPA (150 mM NaCl/1,0% NP-40/0,5% natriumdeoxycholaaty 0,1% SDS/50 mM Tris HCl, pH 8,0) en 5 min koken. De monsters worden gecentrifugeerd en de supernatantoplossingen worden geanalyseerd op de Aβ-peptiden door ECL. De Aβ40- en Aβ42-gerelateerde producten van γ-secretase-gemedieerde verwerking van C100Flag bezitten een Met aan de N-terminus en worden aldus respectievelijk gedefinieerd als M-Aβ40 en M-Aβ42. Op dezelfde manier wordt de supernatantoplossing (0,125 mg/mL) van CHAPSO-geëxtraheerde HeLa-celmembranen (gesolubiliseerde γ-secretase) geïncubeerd met C100Flag (1,7 μM) in buffer B die 0,25% CHAPSO bevat en vervolgens geanalyseerd op M-Aβ40 en M-Aβ42 met behulp van ECL. Deze verbinding, Nirogacestat (PF-03084014), wordt gebruikt in de experimentele context.
In vivo	Nirogacestat (PF-03084014) orally administrated in a single dose of 200 mg/kg causes maximal NICD inhibition for ∼80% in xenograft HPB-ALL tumors. It shows robust antitumor activity in this mode with a maximal tumor growth inhibition of ∼92% at a dose of 150 mg/kg, accompanied by a significant reduction of NICD/Notch1, tumor mitotic index (Ki67), and apoptosis (activated caspase-3) staining. At 120 mg/kg, this compound induces apoptosis, antiproliferation, reduces tumor cell self-renewal ability, impairs tumor vasculature, and decreases metastasis activity in breast cancer HCC1599 tumor-bearing mice. Its treatment displays significant antitumor activity in various types of the breast xenograft models with TGI value of at least 50%.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20530712/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22806875/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10801983/

Toepassingen (Applications)

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	N1ICD / Hes-1 / Hey-1 / p-MEK / MEK / c-PARP		23402814

Informatie klinische proef (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer	Rekrutering	Aandoeningen	Sponsor/Medewerkers	Startdatum	Fasen
NCT02338531	Withdrawn	Breast Cancer	Jules Bordet Institute	June 2015	Phase 2
NCT02299635	Terminated	Triple Negative Breast Neoplasms	Pfizer	February 3 2015	Phase 2
NCT02109445	Terminated	Metastatic Cancer Pancreas	Pfizer\|Academic GI Cancer Consortium (AGICC)	September 3 2014	Phase 2
NCT01876251	Terminated	Breast Cancer Metastatic	Pfizer	November 4 2013	Phase 1

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

Nirogacestat (PF-03084014) γ-Secretase inhibitor

Moleculair gewicht: 489.64