Home Protein Tyrosine Kinase CSF-1R Remmer GW2580

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

GW2580 CSF-1R Remmer

Cat.Nr.S8042

GW2580 (SC-203877) is een selectieve CSF-1R-remmer voor c-FMS met een IC50 van 30 nM, 150- tot 500-voudig selectiever vergeleken met b-Raf, CDK4, c-KIT, c-SRC, EGFR, ERBB2/4, ERK2, FLT-3, GSK3, ITK, JAK2 enz.
GW2580 CSF-1R Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 366.41

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.96%
99.96

Celkweek, behandeling & werkconcentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
HUVEC Growth inhibition assay Growth inhibition of VEGF-stimulated HUVEC after 3 days by spectrophotometry
mouse NSO cells Growth inhibition assay Growth inhibition of serum-stimulated mouse NSO cells after 3 days by spectrophotometry, IC50=13.5 μM
human BT474 cells Growth inhibition assay Growth inhibition of serum-stimulated human BT474 cells after 3 days by spectrophotometry, IC50=21 μM
human HN5 cells Growth inhibition assay Growth inhibition of serum-stimulated human HN5 cells after 3 days by spectrophotometry, IC50=29 μM
human PBMC Function assay Inhibition of LPS-induced IL6 production in human PBMC by ELISA, EC50=1.89 μM
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 366.41 Formule

C20H22N4O3

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 870483-87-7 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen SC-203877 Smiles COC1=CC=C(C=C1)COC2=C(C=C(C=C2)CC3=CN=C(N=C3N)N)OC

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 56 mg/mL (152.83 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
c-Fms
30 nM
In vitro
GW2580 remt humane cFMS kinase in vitro volledig bij 0,06 μM. Deze verbinding remt de groei van CSF-1 gestimuleerde M-NFS-60 myeloïde tumorcellen, serum gestimuleerde NSO myeloïde tumorcellen, CSF-1 gestimuleerde vers geïsoleerde humane monocyten en VEGF gestimuleerde humane navelstrengader endotheelcellen met IC50 van respectievelijk 0,33, 13,5, 0,47 en 12 μM. 1 μM van deze chemische stof remt de CSF-1-geïnduceerde groei van muis M-NFS-60 myeloïde cellen en humane monocyten volledig en remt de botafbraak in culturen van humane osteoclasten, rattencalvaria en rattenfoetale lange botten volledig. Het remt CSF1R-fosforylering in RAW264.7 murine macrofagen gestimuleerd met 10 ng/mL met een IC50 van ongeveer 10 nM. Deze verbinding remt ook de TRKA-activiteit met een IC50 van 0,88 μM.
Kinase Assay
cFMS tyrosine kinase assay
Het enzym wordt geactiveerd door autofosforylering door 10 μM enzym, 100 μM ATP en 5 mM MgCl2 te incuberen in 50 mM Tris HCL gedurende 90 min bij kamertemperatuur. Enzymreacties worden uitgevoerd in een volume van 45 μL, door gebruik te maken van ronde-bodem polystyreen 96-well platen op een Biomek 2000. Deze verbinding in 1 μL DMSO of alleen DMSO wordt toegevoegd aan elke put met 30 μL van een 1.5× substraatreactiemengsel dat 50 mM Mops (3-[N-Morpholino]propaansulfonzuur), pH 7.5, 15 mM MgCl2, 6 μM peptidesubstraat, biotine-EAIYAPFAKKK-NH2 7.5 mM DTT, 75 mM NaCl, 10 μM ATP, en 0.5 μCi (1 Ci = 37 GBq) [33P-γ] ATP per assay bevat. De reactie wordt geïnitieerd door de toevoeging van 15 μL verdunde enzymoplossing, resulterend in een uiteindelijke enzymconcentratie van 20 nM. EDTA wordt toegevoegd aan controleputten voor de bepaling van de achtergrond. De reactie mag 40 min duren en wordt gestopt door de toevoeging van een gelijk volume van 0.5% fosforzuur, en 75 μL wordt overgebracht naar een 96-wells fosfocellulose filterplaat die vooraf is bevochtigd met 100 μL van 0.5% fosforzuur. De plaat wordt gefilterd op een Millipore filterplaat vacuüm verdeelstuk en driemaal gewassen met de fosforzuuroplossing, gevolgd door de toevoeging van 40 μL scintillatieoplossing. De platen worden verzegeld en geteld in een Packard Topcount NXT scintillatieteller.
In vivo
GW2580 (oraal toegediend aan 40 mg/kg 0,5 uur vóór de CSF-1-priming dosis) blokkeert het vermogen van exogene CSF-1 om de LPS-geïnduceerde TNF-α-productie bij muizen met 63% te verhogen. Wanneer dit middel aan muizen wordt gegeven vóór de CSF-1-priming, blokkeert het volledig het vermogen van CSF-1 om de muis te primen voor een verhoogde IL-6-productie. Deze chemische stof (80 mg/kg p.o.) remt de groei van CSF-1-afhankelijke M-NFS-60 tumorcellen in de peritoneale holte volledig. Het (80 mg/kg) oraal tweemaal daags toegediend in de week vóór de thioglycolaat-injectie en gedurende de periode van 4 dagen na de thioglycolaat-injectie, vermindert de accumulatie van macrofagen in de peritoneale holte na de thioglycolaat-injectie (met 45%). In een 21-daags adjuvante artritis model, remt dit middel (50 mg/kg) tweemaal daags toegediend van dag 0 tot 21, 7 tot 21, of 14 tot 21 de vernietiging van gewrichtsbindweefsel en bot. Deze chemische stof (160 mg/kg) induceert een meer dan 2-voudige reductie van totale CD45+ CD11b+ myeloïde cellen, CD11b+ F4/80+ TAMs, en CD11b+ Gr-1+ MDSCs in geïmplanteerde 3LL longtumoren, door tumorrekrutering van myeloïde cellen uit perifeer bloed te remmen. De behandeling met het (80 mg/kg) is in staat om de expressie van Vegf-a (met 35%) en Mmp9 (met 70%) te onderdrukken, evenals de tumorvasculaire dichtheid (CD31-kleuring). Combinatietherapie met dit middel en een anti-VEGFR-2 antilichaam resulteert in synergetische tumorreductie. DC101 alleen vermindert de tumorgroei met 35%, de combinatie van DC101 en deze chemische stof resulteert in een schijnbare synergetische tumorreductie van ongeveer 70%.
Referenties

Veelgestelde vragen (Frequently Asked Questions)

Vraag 1:
How to reconstitute it for i.p. injection in mice?

Antwoord:
It can be dissolved in 5% DMSO/30% PEG 300/5% Tween 80/ddH2O at 5 mg/ml clearly. When preparing this kind of vehicle, please dissolve it in DMSO clearly first, then add PEG and Tween. After they are mixed homogeneously, dilute with water.