Home Metabolism FXR Agonist GW4064

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

GW4064 FXR Agonist

Cat.Nr.S2782

GW4064 is een agonist van de farnesoïde X-receptor (FXR) met een EC50 van 65 nM in de CV1-cellijn en vertoont geen activiteit bij andere nucleaire receptoren bij concentraties tot 1 5M. Deze verbinding stimuleert autophagy in MCF-7-cellen.
GW4064 FXR Agonist Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 542.84

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.80%
99.80

Celkweek, behandeling & werkconcentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
HEK293 Function assay Agonistic activity at FXR in HEK293 cells by GAL4 transactivation activity, EC50 = 0.07 μM. 17292610
CV1 Function assay Agonist activity at FXR expressed in african green monkey CV1 cells by luciferase reporter transient transfection assay, EC50 = 0.065 μM. 18621523
CV1 Function assay Agonist activity at human FXR transfected in african green monkey CV1 cells by luciferase reporter gene transient transfection assay, EC50 = 0.065 μM. 19410460
CV1 Function assay Increase in human FXR-mediated transient transcription of luciferase reporter gene transfected in african green monkey CV1 cells, EC50 = 0.065 μM. 19586769
HEK293 Function assay Agonist activity at human full length FXR transfected in HEK293 cells coexpressing pTRexDest/pGL2promotor assessed as luciferase activity by direct reporter cellular assay, EC50 = 0.03 μM. 20638278
HEK293 Function assay Agonist activity at human GST-fused FXR LBD expressed in HEK293 cells coexpressing GAL4-DNA bindig domain and pFRluc by mammalian one-hybrid assay, EC50 = 0.035 μM. 20638278
CV-1 Function assay Agonist activity at human FXR LBD iexpressed in monkey CV-1 cells assessed as transactivation of luciferase reporter gene expression, EC50 = 0.065 μM. 21256005
CV1 Function assay Agonist activity at human FXR LBD transfected in african green monkey CV1 cells after overnight incubation by luciferase reporter gene assay, EC50 = 0.065 μM. 21890356
HEK293 Function assay Agonist activity at human recombinant FXR expressed in HEK293 cells coexpressing CMX-GAL4N by luciferase reporter gene assay, EC50 = 0.07 μM. 22583617
HEK293 Function assay Agonist activity at human FXR expressed in HEK293 cells by luciferase reporter gene assay, EC50 = 0.026 μM. 25305688
CV1 Function assay Agonist activity at FXR (unknown origin) transfected into african green monkey CV1 cells assessed as ligand-mediated transcription by luciferase reporter/ transient transfection assay, EC50 = 0.065 μM. 25499883
HeLa Function assay 24 hrs Agonist activity at human full length FXR expressed in HeLa cells cotransfected with pSG5-human RXR after 24 hrs by Dual-Glo luciferase reporter gene assay, EC50 = 0.51 μM. 25934227
HEK293 Function assay Agonist activity at human FXR transfected in HEK293 cells assessed as transcriptional activity by luciferase reporter gene assay, EC50 = 0.373 μM. 26568144
HEK-293 Function assay Agonist activity at C-terminal Gal4-tagged human FXR (187 to 472 residues) expressed in HEK-293 cells co-expressing pFRluc by mammalian one hybrid assay, EC50 = 0.035 μM. 27268696
insect cells Function assay 1 hr Agonist activity at recombinant human GST-tagged FXR ligand binding domain (193 to 472 residues) expressed in baculovirus infected insect cells assessed as induction of interaction with biotin labelled SRC-1 after 1 hr by HTRF assay, EC50 = 0.019 μM. 29148806
HEK293T Function assay 24 hrs Agonist activity at human FXR expressed in HEK293T cells assessed as BSEP promoter driven cellular transcriptional activity after 24 hrs by luciferase reporter gene assay, EC50 = 0.095 μM. 29148806
HepG2 Function assay 1 uM 18 hrs Decrease in CYP7A1 gene expression in human HepG2 cells at 1 uM after 18 hrs by RT-PCR 17963371
Caco-2 Function assay 1 uM 6 days Activation of IBABP gene expression in human Caco-2 cells at 1 uM after 6 days by RT-PCR 17963371
HepG2 Function assay 1 uM 18 hrs Activation of BSEP gene expression in human HepG2 cells at 1 uM after 18 hrs by RT-PCR 17963371
Huh7 Function assay 1 uM 18 hrs Activation of SHP gene expression in human Huh7 cells at 1 uM after 18 hrs by RT-PCR 17963371
Huh7 Function assay 1 uM 18 hrs Activation of BSEP gene expression in human Huh7 cells at 1 uM after 18 hrs by RT-PCR 17963371
HepG2 Function assay 10 uM Induction of FXR-mediated SHP mRNA expression in serum-starved human HepG2 cells at 10 uM measured after overnight incubation by qPCR analysis 27372840
HepG2 Function assay 10 uM 10 mins Induction of FXR-mediated Akt-phosphorylation at S473 site in serum-starved human HepG2 cells at 10 uM measured after 10 mins by western blot analysis 27372840
HepG2 Function assay 10 uM 10 mins Induction of FXR-mediated Akt-phosphorylation in serum-starved human HepG2 cells assessed as increase in GSK-3beta-phosphorylation at 10 uM measured after 10 mins by western blot analysis 27372840
HepG2 Function assay 10 uM Activation of FXR in human HepG2 cells assessed as upregulation of SHP mRNA expression at 10 uM by RT-PCR method 30031618
HepG2 Function assay 10 uM Activation of FXR in human HepG2 cells assessed as upregulation of FXR mRNA expression at 10 uM by RT-PCR method 30031618
HepG2 Function assay 10 uM Activation of FXR in human HepG2 cells assessed as downregulation of SREBP-1c mRNA expression at 10 uM by RT-PCR method 30031618
3T3L1 Function assay 10 uM Reduction in lipid accumulation in mouse 3T3L1 cells at 10 uM by Oil Red O staining-based absorbance method relative to control 30342957
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 542.84 Formule

C28H22Cl3NO4

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 278779-30-9 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles CC(C)C1=C(C(=NO1)C2=C(C=CC=C2Cl)Cl)COC3=CC(=C(C=C3)C=CC4=CC(=CC=C4)C(=O)O)Cl

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 100 mg/mL (184.21 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
FXR
(CV1)
65 nM(EC50)
In vitro

GW 4064 is een volledige agonist met EC50-waarden van respectievelijk 80 en 90 nM in CV-1-cellen getransfecteerd met muis- en humane FXR-expressievectoren en een gevestigd reportergen. Er is geen activiteit van deze verbinding op andere nucleaire receptoren, waaronder de retinoïnezuurreceptor, bij concentraties tot 1 μM. Dit chemische middel is dus een krachtige en selectieve niet-steroïde FXR-agonist.

Kinase Assay
FXR transiënte transfectieanalyse
CV1-cellen worden onderhouden in DMEM hoogglucosemedium. De CV1-cellen worden 72 uur vóór transfectie geoogst en geplateerd in DMEM-F12 fenolroodvrij medium dat 5% houtskool/dextran behandeld foetaal runderserum en 2 mM glutamine bevat. Op de dag van transfectie worden de CV1-cellen geoogst in DMEM-F12 fenolroodvrij medium dat 5% houtskool/dextran behandeld foetaal runderserum en 2 mM glutamine bevat, geteld en uitgezaaid in een T-175 cm2 kolf met een dichtheid van 14 miljoen cellen per kolf voordat het transfectiemengsel wordt toegevoegd. Het FuGENE® 6 transfectiemengsel dat 0,55 5g pFA-CMV-GAL4-humaan FXR LBD expressieplasmid, 10,92 5g van het (UAS)-tk-Luciferase reporterplasmid, 20,75 5g pBluescript II KS+, en 3,82 5g van een humaan steroïde receptor co-activator (SRC-1) construct bevat, wordt geïncubeerd en vervolgens toegevoegd aan de CV1-cellen voor nachtelijke incubatie in de incubator. De getransfecteerde CV1-cellen worden geoogst in DMEM-F12 fenolroodvrij medium dat 5% houtskool/dextran behandeld foetaal runderserum en 2 mM glutamine bevat. Getransfecteerde cellen worden toegevoegd in een concentratie van 3750 cellen/putje aan 384-putjesplaten die liganden bevatten. Luciferase-expressie wordt gemeten met behulp van Steady-Glo? Luciferase Assay System 24 uur na incubatie met ligand. Deze verbinding wordt gebruikt als controle, en gegevens worden genormaliseerd naar deze verbinding als % controle.
In vivo

Farmacokinetische analyse bij ratten toont aan dat GW 4064 een orale biologische beschikbaarheid van 10% heeft met een t1/2 = 3,5 uur. Fisher-ratten krijgen dit middel toegediend via orale gavage. Na 7 dagen wordt een dosisafhankelijke verlaging van de serumtriglyceriden waargenomen bij de ratten die deze chemische stof kregen, met een ED50 = 20 mg/kg.

Referenties

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot PTEN / p-AKT / AKT p-EGFR / EGFR / p-ERK / ERK / p-Src / Src SOCS3 / p21 / p-STAT3 / STAT3
S2782-WB1
25187826
Growth inhibition assay Cell proliferation
S2782-viability1
25187826