Name: KD025 (Belumosudil)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7936
Rating: 5 (14 reviews)

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.95%

99.95

Gerelateerde doelwitten	CDK HSP PD-1/PD-L1 Wee1 DNA/RNA Synthesis Microtubule Associated Ras KRas Aurora Kinase Casein Kinase
Overige ROCK Inhibitoren	Y-27632 Dihydrochloride Thiazovivin (TZV) Y-27632 NRL-1049 Ripasudil hydrochloride dihydrate Fasudil (HA-1077) Hydrochloride GSK429286A RKI-1447 GSK269962A HCl Y-39983 Dihydrochloride

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht	452.51	Formule	C₂₆H₂₄N₆O₂	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	911417-87-3	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	SLx-2119			Smiles	CC(C)NC(=O)COC1=CC=CC(=C1)C2=NC3=CC=CC=C3C(=N2)NC4=CC5=C(C=C4)NN=C5

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 90 mg/mL (198.89 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 35%PEG300 2 2%Tween80 3 58%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	7.000mg/ml (15.47mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 140 mg/ml clarified DMSO stock solution to 350 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 20 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 580 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC₅₀/Ki	ROCK2 (Cell-free assay) 41 nM(Ki) ROCK2 (Cell-free assay) 60 nM
In vitro	Belumosudil (KD025) reguleert de secretie van IL-17 en IL-21 in menselijke PBMC's naar beneden, en leidt tot neerwaartse regulatie van STAT3-fosforylering, IRF4 en RORγt-expressie in CD4+ T-cellen. Het remt ook de secretie van IL-21, IL-17 en IFNγ, terwijl het tevens de gefosforyleerde STAT3 verlaagt en de eiwitexpressie van IRF4 en BCL6 in menselijke perifere bloedmononucleaire cellen vermindert.
Kinase Assay	Recombinante ROCK1- en ROCK2-assays
Kinase Assay	Verdunningen en reacties van de Belumosudil (KD025) verbinding worden uitgevoerd in 96-well polystyreen low-binding platen. Filtratie gebeurt in 96-well filterplaten die hydrofiele fosfocellulose-kationenwisselaarmembranen bevatten. De enzymatische activiteit van de recombinante ROCK1 en ROCK2 wordt radiometrisch gemeten in 50 μL reactiemengsel dat assaybuffer bevat (50 mmol/L Tris, pH 7,5, 0,1 mmol/L ethyleenglycoltetra-azijnzuur, 10 mmol/L magnesiumacetaat en 1 mmol/L dithiothreitol).. De reactie wordt gedurende 45 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd en gestopt met 25 μL van 3% fosforzuur. Gefosforyleerd lang S6-peptide wordt gescheiden van niet-gereageerd [[gamma]-³³P]ATP door filtratie van de gestopte reactie-inhoud door een P30 fosfocellulose-filterplaat. Elk filter wordt drie keer gewassen met 75 μL van 75 mmol/L fosforzuur en één keer met 30 μL van 100% methanol. Filterplaten worden aan de lucht gedroogd en 30 μL OptiPhase ‘SuperMix’ scintillatievloeistof wordt aan elke well toegevoegd. ³³Fosfor wordt gekwantificeerd in een I450 MicroBeta scintillatieteller en gecorrigeerd door de radioactiviteit die geassocieerd is met de achtergrondmonsters af te trekken. Gegevens worden geanalyseerd en uitgedrukt als percentuele inhibitie met behulp van de formule ((U − B)/(C − B)) × 100, waarbij U de onbekende waarde is, B het gemiddelde van staurosporine-achtergrond-wells, en C het gemiddelde van controle-wells. Curve-fitting wordt uitgevoerd door GraphPad Prism-software met behulp van sigmoïdale dosis-respons (variabele helling) vergelijkingstypeanalyse om IC50-waarden te genereren. Ki-waarden worden berekend op basis van een vergelijking van Ki = IC50/(1 + [S]/Km)), waarbij [S] en Km respectievelijk de concentratie van ATP en de Km-waarde van ATP zijn.
In vivo	Belumosudil (KD025) (200 mg/kg, p.o.) remt de ROCK activiteit in hersenen en hart, gemeten aan de hand van de mate van MYPT1-fosforylering. Het vermindert significant het gebied van perfusiedefecten en weefselverlies in de ipsilaterale hemisfeer. In een collageen-geïnduceerd artritis (CIA) muismodel reguleert deze verbinding (200 mg/kg, i.p.) de progressie van collageen-geïnduceerde artritis neerwaarts via het targeten van de Th17-gemedieerde route. Het (150 mg/kg, i.p. of p.o.) verbetert effectief cGVHD in een volledig MHC-mismatch model van multi-orgaansysteem cGVHD met bronchiolitis obliterans-syndroom en een minor MHC-mismatch model van sclerodermateuze GVHD.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24466563/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25385601/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26983850/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35427166/

Toepassingen (Applications)

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	pSTAT3 / Bcl6 / pSTAT5 / Blimp1		27436361
ELISA	IL-21 / IL-17 / IFN-γ		25385601

Informatie klinische proef (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer	Rekrutering	Aandoeningen	Sponsor/Medewerkers	Startdatum	Fasen
NCT03919799	Terminated	System; Sclerosis\|Diffuse Cutaneous Systemic Sclerosis	Kadmon a Sanofi Company\|Sanofi	June 26 2019	Phase 2
NCT02841995	Completed	Graft vs Host Disease	Kadmon a Sanofi Company\|Sanofi	September 15 2016	Phase 2
NCT02557139	Completed	Bioavailability	Kadmon Corporation LLC\|Quotient Clinical	September 2015	Phase 1
NCT02317627	Completed	Psoriasis Vulgaris	Kadmon Corporation LLC	December 2014	Phase 2

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

KD025 (Belumosudil) ROCK2-remmer

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 452.51