Home MAPK MEK Remmer U0126-EtOH

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

U0126-EtOH MEK1/2-remmer

Cat.Nr.: S1102

U0126-EtOH is een zeer selectieve remmer van MEK1/2 met IC50 van 0,07 μM/0,06 μM in celvrije assays, 100-voudig hogere affiniteit voor ΔN3-S218E/S222D MEK dan PD98059. U0126 remt autophagy en mitophagy met antivirale activiteit.
U0126-EtOH MEK Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 426.56

Ga naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.98%
99.98

Producten Vaak Samen Gebruikt Met U0126-EtOH

SP600125

It and SP600125 reverse several genes upregulation in RAW264.7 and Ana-1 cells caused by Echinococcus multilocularis soluble antigen.

SB203580 (Adezmapimod)

It and Adezmapimod ameliorate indoxyl sulfate-induced inhibitory effects and reductions in Kv4.2, Kv4.3, and KChIP2 proteins and genes.

Purmorphamine

In the presence of Purmorphamine, it inhibits sonic hedgehog-induced levels of p-ERK1/2 in RA-FLSs.

Celkweek, behandeling & werkconcentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
rat PC12 cells Function assay 10 μM 1 h Activation of Nrf2/ARE in rat PC12 cells assessed as HO-1 protein induction at 10 uM after 5 hrs pretreated with JNK inhibitor SP600125 for 1 hr before compound addition by Western blot analysis 21345685
mouse RAS-3T3 cells Function assay 10-40 μM Inhibition of MEK-mediated ERK1/2 phosphorylation in mouse RAS-3T3 cells at 10 to 40 uM by ELISA. 24507826
HCT116 cells Function assay Ability of compound to inhibit anchorage independent colony formation (soft agar growth assay) in HCT116 cells, IC50=19.4 μM. 15225706
COS-7 cells Function assay Inhibitory concentration against AP-1 transcription in COS-7 cells， IC50=1 μM. 15006386
HeLa cells Function assay Inhibition of EGF-stimulated Elk1-luciferase reporter assay in HeLa cells, IC50=0.29 μM. 15225706
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Moleculair gewicht 426.56 Formule

C18H16N6S2.C2H6O

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 1173097-76-1 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles CCO.C1=CC=C(C(=C1)N)SC(=C(C#N)C(=C(N)SC2=CC=CC=C2N)C#N)N

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 85 mg/mL (199.26 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Kenmerken
A chemically synthesized and highly selective inhibitor of both MEK1 and MEK2.
Targets/IC50/Ki
MEK2
(Cell-free assay)
0.06 μM
MEK1
(Cell-free assay)
0.07 μM
In vitro

U0126-EtOH functionally antagonizes AP- 1 transcriptional activity and blocks the production of a variety of cytokines and metalloproteinases involved in the inflammatory response. This compound inhibits T cell proliferation in response to antigenic stimulation or cross-linked anti-CD3 plus anti-CD28 Abs without effect on IL-2-induced proliferation by down-regulating IL-2 mRNA levels. A recent study shows that this chemical antagonizes resveratrol-induced apoptosis in castration-resistant human prostate cancer C4-2 cells, inhibits mitochondrial function and shifts cells to aerobic glycolysis independently of MEK.

Kinase Assay
In Vitro Kinase Assays
De hoeveelheid geïmmunoprecipiteerd wildtype MEK die in deze assays wordt gebruikt, is aangepast om een vergelijkbare hoeveelheid activiteitseenheden te verkrijgen als die verkregen met 10 nM recombinant MEK. Reactiesnelheden worden gemeten met behulp van een 96-well nitrocellulose filterapparaat zoals hieronder beschreven. Tenzij anders vermeld, worden reacties uitgevoerd bij een enzymconcentratie van 10 nM, in 20 mM Hepes, 10 mM MgCl2, 5 mM β-mercaptoethanol, 0,1 mg/mL BSA, pH 7,4, bij kamertemperatuur. Reacties worden geïnitieerd door de toevoeging van [γ-33P]ATP aan het voorgemengde MEK/ERK/deze verbinding reactiemengsel, en een alicuot van 100 μL wordt elke 6 minuten genomen en overgebracht naar de 96-well nitrocellulosemembraanplaat die 50 mM EDTA bevat om de reactie te stoppen. De membraanplaat wordt onder vacuüm 4 keer met buffer getrokken en gewassen. Wells worden vervolgens gevuld met 30 μL Microscint-20 scintillatievloeistof, en de radioactiviteit van 33P-gefosforyleerd ERK wordt geteld met een Top Count scintillatieteller. Snelheden worden verkregen uit de hellingen van radioactiviteit versus tijdplots. Concentraties van ERK en ATP zijn respectievelijk 400 nM en 40 μM, tenzij anders aangegeven. Voor alle in vitro enzymassays wordt de procentuele remming berekend als 100 (1 −Vi/Vo) waarbij Vi en Vo respectievelijk de initiële reactiesnelheden in aanwezigheid en afwezigheid van deze chemische stof zijn. De gegevens worden vervolgens uitgezet als procentuele remming als functie van de concentratie van deze verbinding en, door niet-lineaire kleinste-kwadratenregressie, aangepast aan de standaardvergelijking voor een Langmuir-isotherm om de IC50 te bepalen. Zoals gerapporteerd, zijn enzymconcentraties gebaseerd op molecuulgewichten en massa van het eiwit dat in het uiteindelijke assayvolume is gebruikt en niet op actieveplaats-titratie. Aldus kan de feitelijke actieveplaatsconcentratie van het enzym afwijken van het gerapporteerde.
In vivo

U0126-EtOH, as the inhibitor of intracellular Raf/MEK/ERK signaling pathway, demonstrates antiviral activity by suppressing propagation of the 2009 pandemic IV H1N1 variant and highly pathogenic avian influenza viruses (HPAIV) in vivo in the mouse lung by inhibiting. This compound shows the potential neuroprotective effect and improving spatial learning in Morris water maze (MWM) by activating peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator-1a, nuclear respiratory factor 1, and mitochondrial transcription factor A in Aβ-injected rats.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21854809/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22510382/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9660836/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot p-MEK / MEK / p-ERK / ERK E-cadherin / Vimentin / Twist-2
S1102-WB1
27487136
Immunofluorescence pERK / pPPARγ E-cadherin / Vimentin CD40
S1102-IF1
27145370

Veelgestelde vragen (Frequently Asked Questions)

Vraag 1:
I want to know whether it is light-sensitive?

Antwoord:
It is not stable. It should be stored as powder at -20°C, and prepared the solution just before use.