Y-27632 Dihydrochloride

Catalogusnr.S1049 Batch:S104928

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C14H21N3O.2HCl
Molecuulgewicht 320.26 CAS-nr. 129830-38-2
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 64 mg/mL (199.83 mM)
Water 64 mg/mL (199.83 mM)
Ethanol 12 mg/mL (37.46 mM)
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Y-27632 Dihydrochloride is een selectieve ROCK1 en ROCK2 remmer met een Ki van 140 nM en 300 nM in een celvrije test, vertoont >200-voudige selectiviteit ten opzichte van andere kinasen, waaronder PKC, cAMP-afhankelijke proteïnekinase, MLCK en PAK.
Doelen
ROCK1 (p160ROCK)
(Cell-free assay)		 ROCK2
(Cell-free assay)
140 nM(Ki) 300 nM(Ki)
In vitro

Y-27632 Dihydrochloride remt ROCK-II terwijl het weinig activiteit vertoont tegen PKC, cAMP-afhankelijke proteïnekinase en myosine lichte-keten kinase (MLCK) met Ki van respectievelijk 26 μM, 25 μM en > 250 μM, evenals PKA geactiveerd door een ander Rho-familie GTPase-lid, Cdc42. Deze verbinding remt gladde-spiercontractie geïnduceerd door verschillende agonisten, waaronder fenylefrine, histamine, acetylcholine, serotonine, endotheline en thromboxaan met een IC50 van 0,3-1 μM, door selectief Ca2+-sensibilisatie te remmen. Het onderdrukt Rho-geïnduceerde, p160ROCK-gemedieerde vorming van stressvezels in gekweekte cellen.

Deze chemische behandeling blokkeert zowel Rho-gemedieerde activering van actomyosine als LPA-gestimuleerde invasieve activiteit van MM1-cellen op een concentratieafhankelijke manier.

Deze verbinding is niet alleen voldoende om de vorming van overmatige axonale processen te initiëren, maar vergemakkelijkt ook de axonale rijping tijdens de zeer vroege stadia van axonogenese, terwijl de axonale elongatie grotendeels wordt gespaard.

In menselijke embryonale stamcellen (hES) vermindert deze chemische behandeling bij 10 μM de dissociatie-geïnduceerde apoptose aanzienlijk, zelfs in serumvrije suspensie (SFEB) cultuur, verhoogt de kloneringsefficiëntie (van ~1% tot ~27%), vergemakkelijkt subklonering na genoverdracht, en stelt SFEB-gekweekte hES-cellen in staat om te overleven en te differentiëren tot Bf1+ corticale en basale telencefale voorlopers.

In Vivo

Orale toediening van Y-27632 Dihydrochloride met 30 mg/kg verlaagt de bloeddruk significant op een dosisafhankelijke manier bij spontaan hypertensieve ratten, renaal hypertensieve ratten, evenals deoxycorticosteronacetaat (DOCA)-zout hypertensieve ratten.

Wanneer deze verbinding gedurende 11 dagen continu wordt toegediend met een snelheid van 0,55 μL per uur via geïmplanteerde pompen, wordt de tumorcelinvasie (MM1-cellen die Val14-RhoA tot expressie brengen bij ratten) significant vertraagd.

Door ROCK te remmen, vermindert deze chemische behandeling hypoxie-geïnduceerde angiogenese en vasculaire remodellering in de pulmonale circulatie. Voorbehandeling met deze verbinding heeft een beschermend effect tegen tumorvorming bij albino muizen met Ehrlich ascitescarcinoom.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • Fosforylatiereacties

    De p160ROCK wordt tot expressie gebracht in COS-cellen als getagde volledige lengte eiwitten en wordt geïmmunoprecipiteerd met behulp van anti-tag antilichamen. De p160ROCK (30 ng) wordt geïncubeerd met 40 μM [γ-32P]ATP (3,3 Ci/mmol) en met 3 μg van ofwel histone (HF2A), gedefosforyleerd caseïne of MBP in aanwezigheid van verschillende concentraties van deze verbinding bij 30 °C in een totaal volume van 31 μL. Een aliquot van 7 μL wordt genomen op 0, 5, 10 en 20 minuten, gemengd met een gelijk volume van 2 × Laemmli monsterbuffer en aangebracht op SDS-PAGE. De gel wordt gekleurd met Commassie Blue, gedroogd en onderworpen aan analyse door een Bioimage Analyzer BAS2000. De concentratie van deze chemische stof die nodig is om de p160ROCK-activiteit met 50% te remmen (IC50-waarde) wordt verkregen. De Ki-waarde wordt berekend volgens de vergelijking, Ki = IC50/(1 + S/Km), waarbij S en Km concentraties van en Km-waarde voor ATP vertegenwoordigen.
Celassay:

[4]
  • Cellijnen

    hES Cells

  • Concentraties

    10 uM

  • Incubatietijd

    1 h

  • Methode

    Y-27632 2HCl was added to culture medium at 10 uM 1 h before detaching the cells from the feeder layer and also upon seeding the cells onto a new MEF layer.
Dierstudie:

[1] [7]
  • Dierlijke modellen

    Male Wistar rats with spontaneous or induced hypertension; Swiss albino mice with Ehrlich ascites carcinoma

  • Doseringen

    30 mg/kg/day (Rat); 0-10 mg/kg (mice)

  • Toediening

    Orally (Rat); i.p. (Mice)

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9353125/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9930872/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10839361/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17529971/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15961717/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10779382/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24905316/

Klantproductvalidatie

The Rho GTPase-JNK pathway is required for the inhibitory effects of vandetanib on Calu-6 cells invasion. Calu-6 cells were incubated for 24 h in the presence or absence of vandetanib (1 or 2 uM), SP600125 (50 or 100 uM), and Y27632 (5 or 10 uM). The morphology of the Calu-6 cells was examined under a light microscope. Scale bar: 50 um.

Gegevens van [ Mol Neurobiol , 2015 , 10.1007/s12035-014-9084-z ]

Effect of mechanical strain on cell morphology. (A) SEM analyses indicate that strain-induced cell elongation is prevented by treatment with HA1100 and Y27632. (B) Quantification of cellular area in the indicated conditions (n = 20). (C) F-actin staining of control, strained and HA1100 or Y27632-treated cells attests that inhibition of RhoA/ROCK prevents mechanical strain-induced cell elongation. *p < 0.05 compared to control without strain (CTL).

Gegevens van [ J Mol Cell Cardiol , 2014 , 67, 49-59 ]

Gegevens van [ Dev Biol , 2012 , 370, 33-41 ]

The ROCK inhibitors fasudil and Y27632 prevented SCP2 cell bone metastasis in nude mice (n = 10 per group). Shown are BLI images of bone metastases, IHC analyses of SMAD3 C-tail phosphorylation and PTHLH, osteoclast TRAP staining, and BLI quantitation.

Gegevens van [ , , J Clin Invest, 2014, 124(4): 1646-59 ]

Sellecks Y-27632 Dihydrochloride Is geciteerd door 1467 Publicaties

Human assembloid model of the ascending neural sensory pathway [ Nature, 2025, 642(8066):143-153] PubMed: 40205039
SLC7A11 is an unconventional H+ transporter in lysosomes [ Cell, 2025, S0092-8674(25)00406-4] PubMed: 40280132
A complete model of mouse embryogenesis through organogenesis enabled by chemically induced embryo founder cells [ Cell, 2025, S0092-8674(25)00807-4] PubMed: 40780195
Subclonal immune evasion in non-small cell lung cancer [ Cancer Cell, 2025, S1535-6108(25)00262-4] PubMed: 40614739
CellNEST reveals cell-cell relay networks using attention mechanisms on spatial transcriptomics [ Nat Methods, 2025, 22(7):1505-1519] PubMed: 40481363
LKB1 inactivation promotes epigenetic remodeling-induced lineage plasticity and antiandrogen resistance in prostate cancer [ Cell Res, 2025, 35(1):59-71] PubMed: 39743630
Loss of Kmt2c or Kmt2d primes urothelium for tumorigenesis and redistributes KMT2A-menin to bivalent promoters [ Nat Genet, 2025, 57(1):165-179] PubMed: 39806204
HNF1A and A1CF coordinate a beta cell transcription-splicing axis that is disrupted in type 2 diabetes [ Cell Metab, 2025, S1550-4131(25)00334-1] PubMed: 40774250
A gut-on-a-chip incorporating human faecal samples and peristalsis predicts responses to immune checkpoint inhibitors for melanoma [ Nat Biomed Eng, 2025, 10.1038/s41551-024-01318-z] PubMed: 39939548
Engineered thoracic spinal cord organoids for transplantation after spinal cord injury [ Nat Biomed Eng, 2025, 10.1038/s41551-025-01549-8] PubMed: 41136603

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.